ATG-F培养体系制备CIK细胞的表型特点及其对K562细胞的杀伤作用

目的：探讨抗人T细胞兔免疫球蛋白-费森尤斯（anti-human T lymphocyte rabbit immunoglobulin-Fresenius,ATG-F）和IFN-γ、IL-2 组成的培养体系诱导细胞因子诱导的杀伤（cytokine induced killer,CIK）细胞的性能并用于临床细胞治疗的可行性。方法:采集分离健康供者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),依照激活抗体的不同分组分别培养CIK细胞,在第7 和14 天计数总细胞数量。流式细胞术检测ATG-F组、CD3 组和TG（抗人胸腺细胞兔免疫球蛋白,Thymoglobulin）组CIK细胞组成及细胞表面活化性、抑制性受体分子的比例,还检测第14 天时ATG-F高剂量组、CD3 组和TG组CIK细胞对K562 靶细胞的杀伤性能。结果：使用ATG-F、IFN-γ、IL-2 培养体系成功诱导出CIK细胞。第14 天时高剂量ATG-F（F-H）组增殖倍数明显高于TG组（27.25±1.25 vs 16.60±1.72,P<0.01）;其CD3+CD56+细胞比例与CD3 组无统计学差异(P<0.05）,但CD3-CD56+的NK细胞显著高于TG 组及CD3 组[ （11.19±2.60）% vs（5.66±1.00）%、（1.42±0.51）,P<0.01]、CD4+T 细胞比例显著低于CD3、TG 组[（4.35±1.47）% vs（26.88±5.01）%、（14.52±6.22）%,P<0.01]、CD56+CD94+ 、CD56+CD158a+ 、CD56+CD158b 细胞比例均明显高于CD3 组（ 均P<0.01）;F-H 组在靶效比为1∶10 时对K562 的杀伤效力显著高于CD3 组[ （60.52±2.05）% vs（30.02±6.67）%,P<0.01]。结论：ATG-F培养体系制备的CIK 细胞比常规培养体系所得CIK 细胞具有更高的NK细胞比例,其活化受体对K562细胞更强的细胞毒性。