病理生理学双语教学的实践与探讨

病理生理学双语教学是教学改革的趋势。青海大学医学院对2006级5年制临床医学专业学生实施《病理生理学》双语教学,取得了一定经验,摸索出了比较合适的双语教材和课堂教学模式。     

病理生理学实验双语教学的实践与探讨

病理生理学实验双语教学是理论双语教学的有益补充与促进。青海大学医学院在前期开展病理生理学理论教学的基础上对2009级5年制临床医学专业本科学生实施了病理生理学实验双语教学,取得了一定经验,有力地促进了病理生理学学科双语教学的进一步开展。     

胃癌患者血清P53、PCNA抗体的检测及意义

目的:了解P53、PCNA抗体在胃癌血清学检测中的意义。方法:采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测胃癌患者血清P53、PCNA抗体。结果:胃癌患者血清P53、PCNA抗体阳性率均高于正常且具有显著性差异。结论:P53与PCNA抗体可用于胃癌血清学检测。     

HSP90β干扰和过表达慢病毒载体的构建及其在骨肉瘤细胞Saos-2中的表达

目的:获得热休克蛋白90β(HSP90β)基因干扰和过表达慢病毒表达系统，并检测其在人骨肉瘤细胞株Saos-2中的表达水平。方法:设计合成shRNA，以慢病毒表达质粒构建HSP90β干扰和过表达载体，酶切电泳、测序技术鉴定载体构建是否成功。重组病毒转染H1299细胞，以嘌呤霉素筛选稳定转染的Saos-2细胞，通过荧光显微镜观察计数获得转染效率。将感染好的细胞分为干扰NC组（NEG-shRNA）、干扰组（shRNA-HSP90β）、过表达NC对照组（NEG-pEZ）及过表达组（pEZ-HSP90β）。通过qRT-PCR 与Western blotting 分别从mRNA 和蛋白表达水平验证目的基因的干扰和过表达水平。结果:插入慢病毒表达载体的基因片段与目的基因的碱基序列完全一致。病毒包装成功后，嘌呤霉素最小致死浓度1 μg/ml，感染复数200，感染人Saos-2的感染效率达80%，其中shRNA-HSP90β组干扰效率为86.35%，pEZ-HSP90β组的mRNA相对表达量增加2.8倍。进一步研究发现，shRNA-HSP90β组较NEG-shRNA组中HSP90β蛋白表达明显降低，pEZ-HSP90β组较NEG-pEZ组HSP90β蛋白表达增加。结论:HSP90β基因干扰和过表达慢病毒载体构建成功，并能够在Saos-2中稳定表达。     

人骨肉瘤细胞系MG-63细胞球形成细胞干性特征

目的从人骨肉瘤细胞系MG-63中分离细胞球,鉴定其干性特征并探讨其与侵袭、转移的相关性及可能机制。方法无血清悬浮培养富集MG-63细胞球,PKH26染色确定细胞球中存在干细胞,Western blot检测细胞球干性相关蛋白表达。甲基纤维素半固体培养及Transwell小室检测细胞球自我更新及侵袭能力,并对上皮间质转化和侵袭、转移相关蛋白进行检测。结果 MG-63细胞无血清悬浮培养11 d后形成的细胞球中存在单个PKH26阳性细胞。与MG-63单层细胞相比,干细胞相关蛋白OCT-4、SOX2和Nanog表达显著提高(P0. 05)。MG-63细胞球细胞成球数是单层细胞的1. 84倍(P0. 01),侵袭能力较单层细胞提高1. 45倍(P0. 01)。细胞球中E-cadherin低表达,snail及MMP2高表达(P0. 05)。结论骨肉瘤细胞系MG-63细胞球形成细胞具有干性特征,通过上皮间质转化促进了细胞的侵袭与转移。     

研究生临床病理生理学课程建设与教学实践

青海大学位于西部地区,该校研究生教育在招生质量、教育经费、实验条件、技术储备等方面与东部地区有较大差距。青海大学医学院病理生理教研室从教学方式、考核方式、师资队伍等方面着手,建设医学科研型研究生《临床病理生理学》课程。通过融合教师授课与学生自主学习（PBL教学、文献研讨、学生讲座）,邀请院外专家讲学,开展形成性评价,优化教师队伍等多项措施,取得一定教学成效,并促进了研究生培养质量的提升。     

胃癌患者血清P53蛋白与抗体检测的比较

目的 比较胃癌患者血清P53蛋白与抗体检测的敏感性.方法 采用间接ELISA法检测胃癌患者血清P53抗体,夹心ELISA法检测胃癌患者血清P53蛋白.结果 胃癌患者血清P53蛋白阳性率为14.0%,抗体阳性率为32.0%,二者差异有统计学意义(P<0.05).结论 胃癌患者血清P53抗体的检测比P53蛋白的检测更敏感.     

内镜下窄带成像技术在诊断Barrett食管中的应用

Barrett食管(Barrett esophagus,BE)是指食管下段的复层鳞状上皮被单层柱状上皮所替代的一种病理现象,可伴或不伴肠化,其中伴有特殊肠上皮化生(specialized intestinal metaplasia,SIM)者属于食管腺癌的癌前病变。目前认为BE的癌变经过SIM→低度异型增生→高度异性型增生→原位癌→浸润性     

HSP90α和HSP90β蛋白在人骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的:探讨热休克蛋白HSP90α和HSP90β在骨肉瘤中的表达及意义。方法:采用免疫组化法检测90例骨肉瘤组织和21例癌旁组织中HSP90α和HSP90β的表达,并分析其与骨肉瘤临床病理特征的关系。结果:在骨肉瘤组织中,HSP90α和HSP90β的阳性表达率分别为57.78%和77.78%,均显著高于癌旁组织(P＜0.05)。HSP90α高表达与骨肉瘤Enneking外科分期相关(P＜0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤位置无关(P＞0.05)。HSP90β高表达与骨肉瘤Enneking外科分期相关(P＜0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤位置无关(P＞0.05)。Spearman相关性分析显示,HSP90α和HSP90β在骨肉瘤中协同表达(r=0.247,P＜0.05)。结论:HSP90α和HSP90β在骨肉瘤组织中共同表达上调,可能作为骨肿瘤潜在的诊断和治疗靶点。