免疫磁性分选系统大量分选CD34+细胞的实验研究

CD3 4 细胞的分离纯化在自体外周血干细胞、异基因骨髓移植 /外周血干细胞移植及干细胞研究中具有重要的应用价值。为了摸索大量分选CD3 4 细胞的方法 ,本研究应用Isolex3 0 0i磁性分选系统富集CD3 4 细胞 ,采用流式细胞术监测分选前后细胞表面标志 ,经CD3 4 细胞体外增殖实验及克隆形成实验验证分选获得的CD3 4 细胞生物学活性。结果显示 ,所完成的 5例次自体外周血富集CD3 4 细胞时 ,先收获单个核细胞约 ( 3 .5 -6.0 )× 10 10 ,CD3 4 细胞占单个核细胞百分率为 ( 0 .5 5 - 1.2 ) % ;收获的CD3 4 阳性细胞总数为 ( 2 - 3 )× 10 8,纯度为 ( 75 - 85 ) % ,回收率为 ( 4 0 - 65 ) %。体外实验表明 ,在SCF IL 3 FL TPO EPO存在下 ,经过 3 - 4天培养 ,可扩增 2 - 3倍 ;经CFU GM、BFU E集落形成实验显示具有形成集落的能力 ,证实分选后细胞具有造血祖细胞生物活性。结论 :应用Isolex3 0 0iCD3 4 细胞分选仪可以高效大量富集CD3 4 细胞 ,适于临床应用。     

白色念珠菌角膜溃疡并发全眼球炎1例报告

叶XX，女，五岁，汉族，保育员，已婚，1989年11月8日入院，住院号：4992患者于11月1日做棉被时不慎被针尖划破左眼角膜表面，伤后第2天经我院门诊诊断角膜外伤性溃疡，即给予抗生素服液治疗6天，因服部疼痛加剧，视力模糊，羞明，流泪伴有头痛而住院。患者既往史和体格一般检查均未见异常。眼部检查：右眼视力1．0，余未见异常。左眼视力为眼前手动，眼睑痉挛，轻度浮肿，球结膜混合充血（＋＋），水肿（＋），在角膜的瞳孔缘3－6点对应处有约3mm灰白色浸润，荧光素染色（＋），表面有脓性分泌物附着。瞳孔小，虹膜纹理不清，前房混浊。细…     

50例胸腺肽不良反应文献分析

目的探讨胸腺肽所致不良反应（ADR）的一般规律及特点,指导临床合理用药。方法对2000年至2007年国内医药期刊报道的胸腺肽ADR进行统计、分析。结果胸腺肽ADR可累及机体多个系统,临床表现多样,各年龄组基本上没有差异,主要表现为变态反应,以过敏性休克为主。结论临床应合理使用胸腺肽,以避免ADR发生。     

卵巢性腺母细胞瘤1例

性腺母细胞瘤是一种较罕见的性腺肿瘤。由Scully于1953年首先报道并命名,迄今国内外报道约百余例,而国内仅报道4例。本瘤在临床、病理、遗传学等方面均有明显特点,作者遇见1例,现报道如下。患者,15岁,女性表型,未婚。因月经周期缩短伴量少半年,闭经2月,下腹部肿块迅速增大2周,于1989年6月7日入院。患者月经初潮13岁,周期规律(13((3-4)/(30))),量中等,家族中无肿瘤史。检查:发育正常,营养中等,乳腺、外阴正     

CD40/CD40L交联在CD4+T细胞诱导肿瘤细胞凋亡中的机制研究

目的探讨CD40/CD40L交联在CIK细胞中CD4 T细胞(CD4 CIK)诱导肿瘤细胞凋亡中的作用机制.方法体外扩增CIK细胞并纯化CD4 T细胞亚群,AnnexinV染色法观察CD4 CIK诱导肿瘤细胞凋亡的作用;半定量PCR、流式细胞法及ELISA法比较CD4 CIK激活前后CD40L的表达变化;将转染质粒pIRES2-EGFP-sCD40L的CHO细胞(CHO-sCD40L)与乳腺癌细胞T47D共孵育,监测24小时后其表面分子Fas的表达变化及对Fas介导凋亡的敏感性.结果CD4 CIK细胞可诱导肿瘤细胞凋亡,凋亡率随孵育时间和效靶比的升高而增加,且肿瘤细胞表面分子Fas水平升高,可从1.98%±0.23%升高到31.62%±7.07%;CD4 CIK细胞被激活后,CD40L表达水平均较激活前明显增加;成功转染的CHO-sCD40L细胞与T47D共培养后,T47D表面分子Fas可被诱导升高,加入CH-11 24小时后可观察到明显T47D细胞的凋亡.结论CD4 CIK可能通过CD40/CD40L交联提升肿瘤细胞表面功能性Fas表达来诱导其凋亡.     

巢式序列特异性引物PCR方法检测HLA单倍体相合供受者间母胎微嵌合的临床应用研究

目的探索临床应用巢式序列特异性引物聚合酶链式反应（PCR-SSP）方法检测HLA单倍体相合供受者间母胎微嵌合状态的可行性。方法选取25对拟行HLA单倍体相合造血干细胞移植治疗的实体肿瘤患者及其供者,供受者为母子关系15例,父子关系10例。采集供受者外周血提取基因组DNA,采用巢式PCR-SSP方法检测患者外周血中供者来源的HLA-DRB1位点,并计算母胎微嵌合阳性率。随机选取经巢式PCR-SSP证实嵌合阳性和阴性且供受者性别不同的患者各4例,采用荧光原位杂交（FISH）技术进行重复检测,并与巢式PCR-SSP方法的检测阳性率进行比较,同时采用噻唑蓝法检测这8例患者分别与其亲缘供者和HLA完全不相合无关第3人之间的混合淋巴细胞增殖反应（MLR）,并计算增殖指数（SI）。结果巢式PCR-SSP方法灵敏度可高达0.001%,并具有较好的特异性。巢式PCR-SSP检测显示,在母子移植关系患者中母胎微嵌合阳性检出率为40%（6/15）,而在父子移植关系患者中母胎微嵌合阳性检出率为0。巢式PCR-SSP方法的检测灵敏度与FISH技术相比明显增高,其检测阳性率分别为50%（4/8）和12.5%（1/8）。MLR检测显示,嵌合阳性患者对其亲缘供者和无关第3人外周血单个核细胞（PBMC）的SI分别为（0.949±0.023）、（1.320±0.095）,嵌合阴性患者对其亲缘供者和无关第3人PBMC的SI分别为（1.133±0.036）、（1.245±0.069）;嵌合阳性患者对其亲缘供者PBMC的增殖反应强度与嵌合阴性患者相比明显降低（P=0.001）,并且也显著低于其对无关第3人PBMC的增殖反应强度（P=0.003）。结论巢式PCR-SSP方法灵敏度高、特异性好,适用于临床HLA单倍体相合供受者间母胎微嵌合状态的快速检测。     

脚气药水的制备及临床应用

脚气是常见的皮肤真菌病,致病菌90%以上为红色毛癣菌。发病主要见于成人,儿童少见。夏秋重,冬春轻,手足多汗及穿胶鞋或塑料鞋易患本病[1]。脚气药水是我院自制制剂,用于治疗脚气,疗效满意。1处方与配制1.1处方水杨酸100g,苯甲酸50ml,乙醇加至1000ml。1.2制法取水杨酸、苯甲酸、     

包头市青山区2001—2005年病毒性肝炎流行状况分析

病毒性肝炎发病率高，是严重危害人类健康的主要传染病之一。为进一步掌握病毒性肝炎的发病规律和流行特征，为预防工作提供科学依据，现对青山区2001—2005年病毒性肝炎发病情况分析如下。     

房定亚教授外治方临床应用举隅

房定亚教授系中国中医研究院西苑医院院长,博士生导师,业医40余载,学验俱丰,其外治方更是匠心独具,笔者有幸随师学习,受益匪浅,现将房定亚教授用外治方(组成及用法:生大黄20g,芒硝60g,乳香、没药各8g,冰片10g,诸药均研磨成粉,分装瓶中备用。用时以醋或甘油或凡士林或鸡蛋清调成膏状外敷局部,视患处面积大小,将药膏外敷其上,约4mm厚,外包以敷料,24小时换药1次)治疗临床常见病验案介绍如下。     

MAGE-3/CEA(HLA-A2/A24+)肽疫苗冲击树突状细胞诱导消化道肿瘤患者CTL的研究

目的:树突状细胞(DC)是一种重要的抗原递呈细胞,在T细胞参与的HLA限制性免疫应答中起重要作用.已证实在动物模型中DC递呈抗原可以诱导出T细胞介导的免疫反应.我们在体外扩增获得肿瘤患者DC,观察其特点,并以MAGE-3/CEA(HLA-A2/A24+)肽疫苗冲击DC诱导特异性CTL,研究其杀伤活性.方法:选择MAGE-3-HLA-A2/A24+或CEA-HLA-A24+肿瘤患者,收集PBMNC中的贴壁细胞,在含有rhGM-CSF、rhIL-4的1640中培养诱导DC细胞,第7天加入HLA-A2-MAGE-3、HLA-A24-MAGE-3、HLA-A24-CEA肽冲击.以肽冲击后的DC与未经纯化的T细胞混合培养(T-DC-P)诱导的CTL作为效应细胞,Mel526,803,Raji,K562作为靶细胞,以LDH法检测特异性CTL的杀伤力.结果:体外扩增可获得高纯度的DC,高表达DC特异性表面标志CD40(74.18%±15.76%)、CD86(94.6%±3.80%)、HLA-DR(88.6%±10.94%).不同肿瘤患者DC得率表现出较大差异(7.07%±3.24%),反映出免疫功能的不同.T-IL-2细胞与T-DC-P细胞对Mel526和803细胞株的杀伤活性有显著性差异(P＜0.01),可以将特异性杀伤力提高25%～35%,而对Raji和K562细胞株的杀伤活性无显著性差异(P＞0.01).结论:rhGM-CSF、rhIL-4体外联合应用可扩增出高纯度DC,肽疫苗冲击后的DC可诱导出MAGE、CEA特异性的CTL应答.表明DC为基础的疫苗是肿瘤免疫治疗重要的新方法,因其具有简便、快速的特点,有良好的前景.