姜黄素修复脊髓损伤的信号通路研究进展

姜黄素是从中药姜黄中提取的天然多酚化合物,对于脊髓损伤的修复显示出良好的疗效。姜黄素可以抑制神经炎症反应;减少胶质瘢痕的形成;减少局部神经组织自由基释放和脂质过氧化;减少神经细胞凋亡和改善脊髓损伤微环境。综述目前姜黄素修复脊髓损伤研究所涉及8条信号通路（NF-κB、TLR4-TAK1-NF-κB、JAK/STAT、Nrf2、ERS、N-甲基-D-天冬氨酸受体-Ca²⁺诱导型一氧化氮合酶、SOX9和Wnt/β-catenin）及相关具有潜力的通路（mTOR）,为姜黄素治疗脊髓损伤作用机制的深入研究提供新思路。     

基于谱效关系的醋延胡索炮制前后特征成分研究

目的探讨醋延胡索炮制前后HPLC指纹图谱与镇痛药效的相关性,筛选炮制特征成分。方法建立生延胡索与醋延胡索HPLC指纹图谱,对两者化学成分进行差异性分析,以大鼠扭体反应为模型建立评价指标,采用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛、孕酮、雌二醇、前列腺素E_2(prostaglandin E_2,PGE_2)、前列腺素F_(2a)(prostaglandin F_(2a),PGF_(2a))等指标评价镇痛药效,结合灰色关联度分析法与熵权法研究醋延胡索的谱-效关系,指认醋延胡索炮制特征成分。结果建立了不同批次生延胡索饮片、醋延胡索饮片的HPLC指纹图谱,确定了31个共有峰。生延胡索饮片与醋延胡索饮片均有止痛效果,以醋延胡索止痛效果最为显著。镇痛谱效关联度分析得到峰9、18～21、25、26醋炙后关联度得分有了显著的提升,与醋炙后镇痛疗效呈显著正相关。结论通过谱-效关系明确了醋延胡索炮制特征成分为原阿片碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、去氢紫堇碱、延胡索乙素、四氢小檗碱、延胡索甲素,为醋延胡索炮制质量控制提供一定依据。     

基于Box-Behnken设计-响应面法优化蜜麦麸的制备工艺

目的采用Box-Behnken响应面法优化蜜麦麸的制备工艺。方法根据《浙江省中药炮制规范》(2015版)中蜜麦麸制备方法,通过单因素试验筛选影响蜜麦麸制备工艺的关键因素,以麸皮与炼蜜比例、加热温度、加热时间为考察因素,蜜麦麸含水量、堆积密度和色度及阿魏酸含量的总评归一值作为综合指标,利用Box-Behnken设计-响应面法优选蜜麦麸制备工艺,并进行预测分析及工艺验证。结果蜜麦麸最刘制备工艺为麸皮与炼蜜比例为10∶3,加热温度为90℃,加热时间为90 s;含水量、堆积密度、色度、阿魏酸含量均符合蜜麦麸要求,综合指标平均值为0.676 0,与预测值(0.692 7)相对误差为2.41%,相对误差较小。结论优选的制备工艺稳定可靠,且简单可行,适用于蜜麦麸的制备应用。     

60Co-γ辐射对元胡品质及根际菌群的作用

[目的] 研究60Co-γ辐射对元胡品质的直接影响及对根际微生态的间接影响。 [方法] 利用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法和高通量测序检测不同剂量射线辐射对元胡品质的影响和辐射后根际细菌群落结构和多样性的变化。[结果] 随着60Co-γ辐射剂量的增加,元胡的鲜重、干重、粒径及膨大率均明显增加,但其主要药效成分的含量并未显著提升。研究元胡根际土壤的菌群发现,与无辐射组比较,辐射组的生物多样性指数更高,表明辐射会改变元胡根际菌群多样性,其中80 Gy辐射组的细菌多样性最高。从菌群组成来看,各组在细菌的门以及优势属的分类水平上差异无统计学意义(P＞0.05),而一些含量低于4%的非优势菌变化明显,其数量随辐射剂量增加而增加,表明元胡经过射线辐射后,根部菌群可能会发生变化,在根部富集一些新的细菌,从而提高细菌多样性。 [结论] 60Co-γ照射会显著影响元胡的产量和大小,但对药效成分的改变不显著。辐射可能会通过提高根际土壤的非优势菌水平,甚至富集一些新的细菌来提高根际土壤细菌多样性。综合来看,60～80 Gy是元胡的最佳诱变剂量。     

基于网络药理学联合GEO 芯片探讨肾气丸治疗肾小管上皮间质转化的作用机制

目的：基于网络药理学联合GEO 芯片差异基因分析方法探讨肾气丸治疗肾小管上皮间质转化（EMT） 的作用机制,动物实验进一步验证肾气丸治疗EMT 的作用靶点。方法：依据中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP） 和BATMAN-TCM 数据库筛选出肾气丸的活性成分及其对应靶点,利用GEO 数据库获取疾病相关靶点, 通过Cytoscape3.7.0 软件绘制“ 药物-成分-靶点” 网络。使用STRING 数据库与Cytoscape3.7.0 软件绘制核心靶点蛋白相互作用网络,并利用R 语言对核心靶点进行GO 功能和KEGG 通路富集分析。通过实时荧光定量PCR 验证肾气丸对苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）、细胞分裂周期蛋白20（CDC20）、表皮生长因子受体（EGFR）、核受体辅激活蛋白1（NCOA1）、细胞周期蛋白B1（CCNB1） mRNA 的影响。结果：共得到肾气丸活性成分229 个,预测作用靶点共1 331 个,与EMT GEO 芯片共同靶点共221 个。肾气丸治疗EMT 主要作用于AKT1、CDC20、EGFR、NCOA1、CCNB1 等靶点。GO 富集分析涉及到营养物质反应、金属离子反应、氧化应激反应等多种生物过程,KEGG 富集分析得到cAMP 信号通路、钙信号通路、甲状腺激素信号通路、催产素信号通路、HIF-1 信号通路等多条信号通路。实时荧光定量PCR 证明肾气丸治疗可升高腺嘌呤造模小鼠肾组织中AKT1 mRNA 表达,降低CDC20、EGFR 和CCNB1 mRNA 表达（P＜0.05）。结论：基于网络药理学方法及实验验证,初步阐明肾气丸可通过调节AKT1、CDC20、EGFR、CCNB1 mRNA 表达来改善EMT,其作用机制可能与cAMP 信号通路、钙信号通路等多条信号通路有关。     

玄胡索散通过下调粒细胞集落刺激因子抑制脾脏髓源抑制细胞分化发挥抗乳腺癌作用

目的:探讨玄胡索散抑制乳腺癌小鼠脾脏髓源抑制细胞(MDSC)分化的作用机制。方法:4～5周龄BALB/c雌性小鼠48只,其中6只为正常对照组,其他42只采用小鼠左侧第二对乳腺皮下脂肪垫接种4T1细胞构建乳腺癌荷瘤小鼠模型,分为粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对照组、G-CSF敲减组、模型对照组、玄胡索散小剂量组、玄胡索散中剂量组、玄胡索散大剂量组和环磷酰胺组,每组6只。其中G-CSF对照组和G-CSF敲减组分别采用shRNA慢病毒转染联合嘌呤霉素构建相应4T1稳转细胞模型。各组造模48 h后,玄胡索散小剂量组、玄胡索散中剂量组、玄胡索散大剂量组分别按2、4、8 g·kg^-1·d^-1玄胡索散灌胃,每天一次;环磷酰胺组按30 mg/kg腹腔注射环磷酰胺,隔天一次;其他组给予等体积0.5%羟甲基纤维素纳。各组连续给药25 d。苏木精-伊红染色观察脾脏组织病理学改变,流式细胞术测定脾脏MDSC亚群比例,免疫荧光法检测脾脏CD11b、Ly6G共表达,酶联免疫吸附测定外周血G-CSF浓度。在体外,建立荷瘤小鼠脾脏与4T1稳转株共培养体系,玄胡索散(30μ...     

骨质疏松分级诊疗政策解读及方案专家共识

2015年9月8日，国务院办公厅发布了《关于推进分级诊疗制度建设的指导意见》，为指导各地推进分级诊疗制度建设，围绕总体要求、以强基层为重点完善分级诊疗服务体系、建立健全分级诊疗保障机制、组织实施等四方面提出了意见。分级诊疗是按照疾病的轻、重、缓、急，以及治疗难易程度进行分级，不同级别的医疗机构分别承担规范治疗，实现基层首诊和双向转诊。骨质疏松分级诊疗需要构建一个全新的概念单元、命题和理论体系。其结构实体包括：个体、科室、基层医院、二级医院、三级医院、整合型医疗服务体系等多层组织框架。骨质疏松分级诊疗是对骨质疏松患者全程管理，早发现、早诊断、早治疗，全程管理的人群可分为4组：骨密度正常、骨量减少、骨质疏松、严重骨质疏松。对每组人群制定相应的防治方案，畅通转诊，连续治疗，上下联动，闭环管理。该共识旨在推动骨质疏松分级诊疗工作。     

高效液相色谱法测定静电层层自组装载药多层膜中葛根素的载药量

[目的]建立测定静电层层自组装载药多层膜内葛根素载药量的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)方法。[方法]多层膜浸没于十二烷基硫酸钠饱和溶液,超声崩解,崩解液冻干后甲醇定容,由HPLC法定量测定。葛根素的定量分析采用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%甲酸(18/82),流速1.0mL·min-1,检测波长250nm,柱温30℃,进样量为10μL。[结果]在本研究确定的色谱条件下,葛根素浓度2.0~12.0μg·mL-1范围内,葛根素浓度与出峰面积线性关系良好(r=0.9994)。以HPLC法测定静电层层自组装多层膜内葛根素载药量精密度、重复性和稳定性良好;在低、中、高三个剂量水平下的空白回收率为96.98%~102.34%。利用该方法定量测定10、15和20双层载药多层膜中葛根素的载药量,随着多层膜组装层数增加,载药量显著增大,葛根素含量分别为(1.92±0.54)μg·cm-2、(2.58±0.52)μg·cm-2和(4.23±0.77)μg·cm-2,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]以HPLC法测定静电层层自组装多层膜内葛根素载药量,方法简便、条件温和、结果可靠,为静电组装多层膜的载药量测定提供了参考。     

薏苡仁麸炒前后治疗脾虚水湿不化谱效关系研究

目的研究薏苡仁麸炒前后HPLC指纹图谱与治疗脾虚水湿不化药效之间的相关性,为明确薏苡仁麸炒前后药效物质基础提供实验依据。方法通过HPLC法建立麸炒前后薏苡仁指纹图谱;建立脾虚水湿不化大鼠模型,比较其麸炒前后的药效作用;同时采用灰色关联度法,对5批生品及其麸炒品进行谱效关系分析,分别找出关联度较大的化学成分,并比较麸炒前后谱-效关系差异。结果 HPLC指纹图谱中指认9个共有峰。与模型组比较,生品与麸炒品均有显著性差异;与生品组比较,麸炒薏苡仁各药效指标明显高于生品。麸炒品中9种共有成分与GAS、MTL、SS、体质量、胸腺指数以及脾指数的关联度明显高于生品;生品中9种共有成分与VIP的关联度明显高于麸炒品。结论薏苡仁治疗脾虚水湿不化的药效是多成分共同作用结果,麸炒后药效明显高于麸炒前。