继续教育园地(血栓栓塞性疾病防治系列第12讲)器官移植的血栓性并发症

一、器官移植血栓性并发症的发生率 器官移植术后的血栓性并发症是造成移植物失功能和患者死亡的重要原因。如肝移植术后肝动脉血栓(HAT)的发生率目前已经小于5％,但由它导致的死亡率占了原位肝移植术后患者的55％,占需     

从经方的配伍应用探讨细辛宣营之功

[目的]阐发细辛宣营功效在经方配伍中的体现。[方法]追思传承,运用文献分析的方法,搜集整理《神农本草经》和《名医别录》等中医药经典对细辛的阐述,通过分析张仲景在《伤寒论》及《金匮要略》中运用细辛的情况,选用以当归四逆汤为代表的经典方剂,从经方的配伍应用中探讨细辛宣营的特点。[结果]在以历代医家对细辛的认知基础上,仲景在经方的配伍应用中对细辛宣营之功的运用分为四方面:第一,细辛可宣营而散寒解表,如当归四逆汤;第二,细辛可宣营而温化水饮,如苓甘五味姜辛汤;第三,细辛可宣营而通阳行痹,如三黄汤;第四,细辛可宣营而和血安胎,如白术散。[结论]细辛在经方的配伍应用中宣营之功体现为四方面,即散寒解表、温化水饮、通阳行痹、和血安胎,虽为辛热之品,只要合理搭配,即可宣营且不伤阴。     

olomoucine对星形胶质细胞增殖的影响及机制研究

目的:观察细胞周期抑制剂olomoucine对培养星形胶质细胞(AS)机械损伤后增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:建立体外培养大鼠纯化的AS物理损伤模型(划痕损伤模型),随机分为对照组、划痕组和干预组,划痕组和干预组均继续培养,干预组给予olomoucine干预。利用免疫荧光细胞化学方法观察损伤后BrdU表达;利用Westernblot印迹分析损伤后PCNA、p27的表达。结果:划痕损伤刺激12h开始出现损伤边缘区AS胞体肥大、数目增加,BrdU阳性细胞比率和PCNA表达水平较对照组增高(P<0.05),p27表达水平较对照组下降(P<0.05);干预组的BrdU阳性细胞比率和PCNA表达水平较划痕组明显减少(P<0.05),p27表达上调(P<0.05)。结论:损伤刺激可促使AS发生反应性胶质增生,CDK选择性细胞周期抑制剂olomoucine可以通过调控细胞周期抑制其反应性增生。     

基质细胞衍生因子-1对阿尔茨海默病脑内可溶性Aβ清除作用的研究

目的通过对APP/PS1双转基因小鼠侧脑室持续注射基质细胞衍生因子-1(SDF-1),以观察SDF-1对脑内可溶性β淀粉样蛋白(Aβ)的影响及其可能的机制。方法将28周龄的野生型(wild type,WT)小鼠和APP/PS1转基因小鼠分为对照组和SDF-1α干预组,分别予以侧脑室注射SDF-1α和PBS,1周1次,连续注射4周和8周。采用ELISA法检测小鼠脑内可溶性Aβ的水平,采用Wsetern blot方法检测小鼠脑内小胶质细胞标志物Iba-1的水平。结果 SDF-1α侧脑室注射后APP/PS1小鼠脑内可溶性Aβ-40和Aβ-42水平与对照组相比明显减少,APP/PS1小鼠及WT小鼠脑内Iba-1水平较对照组增加。结论 SDF-1α侧脑室注射可能减少APP/PS1小鼠脑内可溶性Aβ的水平,其作用的机制可能是SDF-1α增加了脑内小胶质细胞由外周向中枢的募集,从而促进Aβ的吞噬清除。动员与趋化骨髓来源的小胶质细胞可能成为治疗AD的新靶点。     

重组小鼠Galectin-9在大肠杆菌中的表达以及体外功能检测

本研究旨在构建重组Galectin-9（半乳糖凝集素9）原核表达质粒，并对表达蛋白进行纯化和功能学鉴定。     

健脾化瘀解毒中药复方对溃疡性结肠炎患者血清细胞因子EGF、TGF-β1及TNF-α的影响

[目的]通过观察健脾化瘀解毒复方治疗溃疡性结肠炎(UC)的临床疗效,进一步探讨其分子生物学作用机制。[方法]采用随机、阳性药平行对照方法,将60例轻中度溃疡性结肠炎患者分为观察组30例和对照组30例,观察组给予健脾化瘀解毒复方中药,对照组给予美沙拉嗪4 g/d,疗程为3个月,观察治疗前后高敏C反应蛋白(CRP)、血小板(PLT)、Mayo评分的变化,并检测血清中表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。[结果]血清CRP值、PLT、Mayo评分、EGF、TGF-β1及TNF-α表达治疗前观察组和对照组无统计学差异(P0.05),与治疗前相比,健脾化瘀解毒复方组和观察组治疗后CRP值、PLT、Mayo评分降低、EGF升高、TGF-β1及TNF-α表达降低,均具有统计学差异(P0.01);与对照组相比,健脾化瘀解毒复方组PLT、Mayo评分、TNF-α均具有统计学差异(P0.05);且观察组治疗有效率为93.1%优于对照组的76.7%。[结论]健脾化瘀解毒复方具有良好的抗溃疡性结肠炎的作用,其机制可能与调节血清EGF、TGF-β1、TNF-α的表达有关,其抗炎效果优于美沙拉嗪组。     

32例胰、肾同期联合移植的近期疗效

目的报告32例胰、肾同期联合移植(SPK)的近期结果及经验。方法为合并尿毒症的27例1型糖尿病和5例2型糖尿病患者施行SPK,其中胰液膀胱引流(BD)术式2例,改进的胰液空肠引流(ED)术式30例。术后早期采用他克莫司、霉酚酸酯及皮质激素预防排斥反应,同时以抗淋巴细胞球蛋白或抗CD25单克隆抗体诱导治疗。结果32例手术均获得成功,术后随访2～12个月,1例术后9周死于肺部感染,死亡时肾功能正常,另1例术后6个月死于急性心肌梗死,死亡时移植胰、肾功能正常,其余患者目前仍存活;术后(12.7±8.1)d空腹血糖恢复正常,(8.3±4.5)d停用胰岛素,(8.4±7.8)d血肌酐恢复正常。术后发生手术相关并发症有出血、移植胰切口感染、上消化道出血、右股静脉血栓形成和淋巴漏;其它并发症有药物不良反应、肺部感染,采用BD术式者并发代谢性酸中毒和镜下血尿;4例发生移植肾急性排斥反应,均经活检证实。结论SPK治疗糖尿病并发尿毒症的近期疗效满意,ED术式更符合正常生理。     

转染真核表达载体pGFAP-IRES2-EGFP-p27对星形胶质细胞增殖的抑制作用

目的:探讨脂质体介导真核表达载体pGFAP-IRES2-EGFP-p27转染体外培养星形胶质细胞后对其增殖的影响。方法:利用脂质体将质粒pGFAP-IRES2-EGFP-p27转染入纯化培养的星形胶质细胞,通过免疫荧光化学标记观察转染质粒pGFAP-IRES2-EGFP-p27后星形胶质细胞内外源基因EGFP、p27的表达情况,并观察其对星形胶质细胞Ki67表达的影响。结果:脂质体介导质粒pGFAP-IRES2-EGFP-p27转染后24 h即开始有EGFP的表达,48-72 h EGFP表达达高峰;通过免疫荧光标记发现,表达EGFP的细胞同时有p27表达水平明显增高;和EGFP阴性细胞相比,EGFP阳性细胞中Ki67的阳性率明显下调(P<0.01)。结论:GFAP启动子能启动目的基因p27和EGFP在星形胶质细胞的表达;连于p27的下游EGFP可作为报告基因,通过观察EGFP的表达可了解外源性p27的表达情况;导入外源性p27能有效抑制星形胶质细胞的增殖。     

健脾化瘀解毒复方对溃疡性结肠炎患者炎症因子及免疫屏障影响

目的:观察健脾化瘀解毒复方的临床疗效,探讨其对炎症因子及免疫屏障的影响。方法:选取2014年1月—2016年9月医院诊治的60例慢性复发型活动期或慢性持续型轻中度的溃疡性结肠炎患者,随机分为对照组30例和观察组30例,对照组给予美沙拉嗪颗粒4 g/d,口服,观察组予以健脾化瘀解毒复方口服2次/d,连续治疗3个月,比较两组治疗前后血沉(ESR)、血清降钙素原(PCT)、疾病活动指数(DAI)及肠镜下黏膜病变的变化,酶联免疫法(ELISA)检测血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)及黏膜地址素细胞黏附分子(MAd CAM-1)的水平。结果:治疗前两组患者ESR、PCT、DAI、肠镜下黏膜病变及血清中IL-6、IL-8、IL-10、MAd CAM-1无统计学差异(P0.05)。与治疗前相比,两组治疗后ESR、PCT、DAI显著降低(P0.01),血清中IL-6、IL-8、MAd CAM-1表达明显降低(P0.01,P0.05),而血清中IL-10表达显著升高(P0.01);与对照组相比,观察组ESR、DAI明显降低(P0.01,P0.05),血清中IL-6显著降低、IL-10显著升高均具有统计学差异(P0.05);且两组患者黏膜充血水肿、糜烂、溃疡均有显著好转(P0.01,P0.05),健脾化瘀解毒复方在改善黏膜充血水肿、糜烂方面较美沙拉嗪具有更明显优势(P0.05)。结论:健脾化瘀解毒复方具有明显的修复肠道黏膜、减轻肠道炎症的作用,其机制可能与调节肠道黏膜屏障,提高肠道局部免疫能力有关;在调节IL-6、IL-10平衡方面其作用优于美沙拉嗪。