DMOG对间充质干细胞生物学特性影响的研究

[目的]探讨二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxaloylglycine,DMOG)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)生物学特性的影响。[方法]以DMOG作用于P4代MSCs,分为DMOG 0、20、40和80μmol·L~(-1)组,以CCK-8法、流式细胞术、Transwell迁移法和Real-time q PCR依次检测不同浓度的DMOG对MSCs增殖能力、细胞周期、迁移能力以及成骨、成脂、成软骨和成神经分化能力的影响。[结果]DMOG各浓度组细胞生长曲线均接近S型,与DMOG 0μmol·L~(-1)组比较,20μmol·L~(-1)对MSCs增殖能力具有促进作用,40μmol·L~(-1)促进作用最明显,差异具有统计学意义(P0.05)。与DMOG0μmol·L~(-1)组比较,DMOG处理可提高处于S期+G2/M期的MSCs细胞比例,差异具有统计学意义(P0.05)。与DMOG 0μmol·L~(-1)组比较,DMOG20μmol·L~(-1)时促迁移作用显著(P0.05)。DMOG处理后,MSCs仍保留了原有的成骨、成脂、成软骨、成神经分化能力,DMOG 20μmol·L~(-1)可显著促进MSCs成骨和成软骨分化能力,抑制MSCs成脂分化能力,差异具有统计学意义(P0.05),对MSCs成神经分化能力无显著影响(P0.05)。[结论]不同浓度DMOG处理后,MSCs仍保留了原有的多向分化能力,其中20μmol·L~(-1)DMOG可促进MSCs成骨和成软骨分化能力,抑制其成脂分化能力,对其成神经分化能力无显著影响,同时可显著提高MSCs增殖、迁移能力。     

Wnt/β-catenin信号通路在体外调控诱导性多能干细胞向神经干细胞分化中的作用及机制研究

[目的]探讨Wnt/β-catenin信号通路在体外调控诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPS)向神经干细胞分化中的作用及机制。[方法]体外培养小鼠iPS,采用N2B27培养基联合维甲酸(retinoic acid,RA)诱导法,诱导其向神经干细胞分化;免疫荧光法检测iPS来源神经干细胞中的巢蛋白(Nestin)、β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)的表达情况;将细胞分为正常组、Wnt3a组、Dickkopf相关蛋白-1(Dickkopf-1,DKK-1)组和IWR-1组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)、Western blot分别检测iPS神经分化过程中Nestin、β-tubulinⅢ及β-catenin的表达情况;采用悬浮培养法检测Wnt/β-catenin信号通路对iPS来源神经干细胞增殖能力的影响。[结果]iPS来源神经干细胞表达神经干细胞的表面特异性标志物Nestin,以及早期神经元特异性标志物β-tubulinⅢ;iPS向神经干细胞分化过程中,Nestin、β-tubulinⅢ的表达均升高(P0.05,P0.05),β-catenin表达降低(P0.05);采用Wnt3a处理后,iPS来源神经干细胞增殖能力较弱;采用DKK-1和IWR-1处理后,iPS来源神经干细胞增殖能力较强,且Nestin表达提高(P0.01),β-catenin表达降低(P0.05)。[结论]Wnt/β-catenin信号通路在iPS向神经干细胞诱导分化过程中受到抑制;采用DKK-1和IWR-1下调Wnt/β-catenin信号通路,可促进iPS向神经干细胞分化,提高iPS来源神经干细胞的增殖能力,提示Wnt/β-catenin信号通路在iPS向神经干细胞分化过程中具有负调控的作用。     

跨膜丝氨酸蛋白酶4和E-钙黏蛋白在胆囊癌中的表达及与预后的关系

目的:分析跨膜丝氨酸蛋白酶4（transmembrane protease serine 4,TMPRSS4）和E-钙黏蛋白（E-cadherin，E-cad）在胆囊癌中的表达及与预后的关系。方法:应用免疫组织化学技术检测TMPRSS4和E-cad在75例胆囊癌组织中的表达，应用SPSS 17.0软件分析与胆囊癌临床病理特征及预后的关系。结果:在胆囊癌组中，TMPRSS4的高表达显著高于癌旁组织（P＜0.01)，E-cad的高表达显著低于癌旁组织（P＜0.01)，TMPRSS4的高表达、E-cad的低表达与胆囊癌的TNM分期、淋巴结转移显著相关(P＜0.05)；但与性别、年龄、组织学分级、肿瘤大小无关(P＞0.05)。TMPRSS4高表达组的3年生存率及无瘤生存率明显低于低表达者(P＜0.05)；E-cad高表达组的3年生存率及无瘤生存率明显高于低表达者(P＜0.05)。结论:在胆囊癌中，TMPRSS4高表达、E-cad低表达可能与胆囊癌发生、发展有关。     

跨膜丝氨酸蛋白酶4与E-钙黏蛋白在105例结直肠癌中的表达及意义分析

摘 要：［目的］ 探讨跨膜丝氨酸蛋白酶4（transmembrane protease serine 4，TMPRSS4）和E-钙黏蛋白（E-cadherin，E-cad）在结直肠癌中的表达及其临床意义。［方法］ 选取手术切除的结直肠腺癌标本105例，应用免疫组织化学方法检测TMPRSS4与E-cad的表达，分析两者表达与临床病理特征及预后的关系。［结果］ TMPRSS4在结直肠癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为56.19%（59/105）和21.90%(23/105)，差异有统计学意义（χ2=25.93，P<0.05）；E-cad在结直肠癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为28.57%（30/105）和85.71%（89/105），差异有统计学意义（χ2=67.50，P<0.05）。TMPRSS4在Ⅲ+Ⅳ期组、有淋巴结转移组中的阳性率高于Ⅰ+Ⅱ期组(P=0.035)、无淋巴结转移组(P=0.019)；E-cad在 Ⅲ+Ⅳ期组、有淋巴结转移组中的阳性率低于Ⅰ+Ⅱ期(P=0.001)、无淋巴结转移组(P=0.001)；两者表达均与性别、年龄、肿瘤部位、组织学分期无关（P>0.05）。结直肠癌中TMPRSS4与E-cad表达呈负相关（r= -0.33，P=0.01）。TMPRSS4高表达组及E-cad低表达组5年生存率低（P<0.05）。［结论］ 结直肠癌中TMPRSS4表达上调、E-cad表达下调，两者可能在结直肠癌的发生发展过程中发挥作用。     

诱导性多能干细胞移植治疗帕金森病的研究进展

帕金森病(PD)又名震颤麻痹,是一种多发于中老年人群的神经系统变性疾病[1]。目前研究认为,PD发病机制为脑内黑质纹状体病变,导致多巴胺能神经元(DN)变性死亡,释放的多巴胺(DA)含量降低,从而使患者运动不能。但引起黑质纹状体病变的原因仍不明确。诱导性多能干细胞(iPSCs)是指利用载体将特定的转录因子转染已分化成熟的体细胞,通过重编程技术将其诱导成为具有胚胎干细胞(ESCs)特性的多潜能性干细胞[2]。近年来,iPSCs在神经系统疾病、心血管疾病等方面的作用日益凸显,iPSCs已在体外被成功分化为神经干细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等[3-5],其在临床疾病的治疗中显现出巨大的潜能与应用价值。     

结直肠癌预后相关免疫组化标志物研究进展

近年来我国结直肠癌发病率及死亡率逐步增高,结直肠癌的预后评估受到越来越多的重视。应用免疫组化标志物评估结直肠癌患者预后发挥着不可替代的作用。充分认识免疫组化标志物的临床意义,将有助于肿瘤分期、预后判断以及发现新的治疗靶标等。本文结合了与结直肠癌预后相关的免疫组化标志物:PPP2CA、ALDH1A1、 Arl4c、转移相关蛋白-3、UBA2、PD-1/PD-L1的最新研究进展,对上述标志物的临床意义及预后价值做出综述。