基于谱效相关的何首乌抗血小板聚集药效物质研究

应用体外抗血小板聚集生物活性检测方法,并结合化学指纹图谱进行谱效相关分析,探索何首乌抗血小板聚集的活性物质。采用体外抗血小板聚集法进行检测,何首乌50%乙醇提取物的抗血小板聚集作用强于10%或90%的乙醇提取物,超声提取优于回流提取。对正交试验的不同提取物进行抗血小板聚集活性评价,抑制率在32.03%~74.56%。谱效相关分析结果表明,反式二苯乙烯苷、顺式二苯乙烯苷、儿茶素与抗血小板聚集活性的相关系数较高且具有统计学意义,分别为0.963(P0.01),0.902(P0.01)和0.656(P0.05);进一步对上述3种与活性相关系数较高化合物的单体进行活性验证,均有较好的抗血小板聚集活性;最后根据3种单体化合物在何首乌中的含量差异计算相对活性贡献度可知,反式二苯乙烯苷是何首乌体外抗血小板聚集的主要活性物质。     

Tetrahydroxy Stilbene Glucoside Alleviates High Glucose-Induced MPC5 Podocytes Injury Through Suppression of NLRP3 Inflammasome

Background

Tetrahydroxy stilbene glucoside (TSG) is an active ingredient of Heshouwu and is an antioxidant. The underlying mechanisms of the renoprotective effect of TSG in diabetic nephropathy have not been previously reported. In this study, we investigated the mechanisms of TSG in preventing podocytes injury in high glucose (HG) condition.

RP-HPLC法同时测定乙肝舒康胶囊中虎杖苷和二苯乙烯苷含量

目的:建立同时测定乙肝舒康胶囊中虎杖苷和二苯乙烯苷的高效液相色谱法。方法:采用 Hypersil C_(18)色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以乙情-水(20:80,v/v)为流动相,流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长为320 nm。结果:虎杖苷和二苯乙烯苷的线性范围分别为1.5～30μg·mL~(-1)。(r=0.9993)和5～100μg·mL~(-1)(r=0.9999),平均回收率(n=9)分别为96.5%和100.9%。结论:本法简便,准确,重现性好。     

不同炮制辅料对何首乌药效成分含量的影响

目的研究不同炮制辅料对何首乌药效成分含量的影响,为选择何首乌炮制辅料提供依据。方法分别采用5种不同炮制辅料制备制何首乌,高效液相色谱法按照2015年版中国药典中制何首乌成分含量测定方法分别测定制何首乌中二苯乙烯苷、游离蒽醌的含量,比较不同炮制辅料对何首乌中药效成分含量的影响。结果炮制辅料基本都会降低制何首乌中二苯乙烯苷和游离蒽醌的含量。不同炮制辅料制备的制何首乌中二苯乙烯苷含量从高到低依次为空白对照何首乌>米泔水制何首乌>生姜汁制何首乌>甘草汁制何首乌>熟地汁制何首乌>黑豆汁制何首乌,游离蒽醌含量从高到低依次为甘草汁制何首乌>空白对照何首乌>米泔水制何首乌>熟地汁制何首乌>黑豆汁制何首乌>生姜汁制何首乌。不同炮制辅料制备的何首乌中二苯乙烯苷含量均高于2015年版中国药典中的要求,而游离蒽醌含量均未达到2015年版中国药典中的要求。结论不同炮制辅料对制何首乌中药效成分含量的影响不同。     

制何首乌的炮制方法探索

目的:考察黑豆汁炖制时间对制何首乌外观性状及各类有效成分含量变化规律的影响。方法:采用HPLC同时测定不同炮制时间制何首乌样品中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷的含量,选择Agilent ZORBAX Extend-C_(18)色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),甲醇(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0～30 min,5%～100%A; 30～40 min,100%A),流速1. 0 mL·min~(-1),柱温35℃,检测波长280 nm。结果:随炖制时间的增加,二苯乙烯苷含量逐渐降低,与8 h时相比,至64 h时含量降低76%;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷2种蒽醌苷含量先上升后下降,至24 h时达最高值,炖制40 h时降至与8 h近似的水平,之后略有波动;大黄素、大黄素甲醚2种蒽醌苷元含量先上升后下降,炖制32 h时达最大值,之后缓慢降低并趋于稳定。结论:炖制时间对制何首乌中各类成分含量的影响显著,且变化趋势不尽相同,应规范制何首乌饮片的炮制时间;同时,仅以二苯乙烯苷及蒽醌类成分作为制何首乌的指标性成分依据不够充分,应考虑增加多糖类等质量控制指标。     

基于分子对接技术探讨二苯乙烯苷通过SIRT1-TP途径舒张血管的机制研究

目的: 探讨二苯乙烯苷通过SIRT1-TP途径拮抗血管舒缩功能障碍的具体分子机制。方法: 选用DMT Myograph肌动描计系统,在体外观察二苯乙烯苷拮抗U46619(TP受体特异性激动剂)诱发的血管平滑肌收缩的作用;进一步利用Auto Dock软件将TP受体与二苯乙烯苷进行分子对接,验证其结合活性;用SIRT1抑制剂-尼克酰胺(Nic)及激动剂白藜芦醇(Res)与二苯乙烯苷共同处理后观察U46619诱发的血管平滑肌收缩张力的变化,同时用蛋白免疫印迹法检测血管平滑肌SIRT1及TP受体的蛋白表达水平。结果: 二苯乙烯苷对U46619预收缩的血管平滑肌具有舒张作用,其与TP受体的结合能≤ －6 kcal·mol^-1,二者有较好的亲和力;Nic可阻断二苯乙烯苷的舒张血管的作用,而Res可使其舒张作用增强;蛋白免疫印迹检测结果显示二苯乙烯苷可增加血管平滑肌SIRT1蛋白的表达,显著降低TP受体的表达水平。结论: 二苯乙烯苷可通激活SIRT1通路,抑制血管平滑肌TP受体的激活,从而发挥舒张血管的作用。     

滋肾清肝代平方中7种成分血药浓度的测定及其在大鼠体内的药代动力学分析

目的:建立UPLC-MS-MS同时测定大鼠血浆中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,1-脱氧野尻霉素和决明子苷、红镰霉素龙胆二糖苷、橙黄决明素、甲基钝叶决明素、白藜芦醇的分析方法,研究大鼠服用滋肾清肝代平方后的药代动力学特征。方法:采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱,流动相0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,采用电喷雾电离源,扫描方式为多反应离子监测。结果:7种成分在大鼠血浆中线性关系良好,提取回收率94.83%~106.58%,日内、日间精密度和准确度良好。7种成分在模型组大鼠中的药时曲线下面积、末端半衰期、达峰时间、清除率、表观分布容积、药峰浓度分别为(326.65±26.66)μg·L-1·h-1,(3.64±1.69)h,0.33 h,(60.56±5.32)L·h-1·kg-1,(325.13±167.18)L·kg-1,(169.25±18.02)μg·L-1。结论:该方法特异、快速、准确、灵敏,可用于滋肾清肝代平方在大鼠体内的药动学研究。     

二苯乙烯苷对大鼠骨密度与骨强度的影响

目的：检测由何首乌中提取的有效成分2,3,5,4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷（二苯乙烯苷）,长期给药对大鼠骨密度及骨强度的影响。方法：大鼠分别按剂量150 mg/kg、300 mg/kg、600 mg/kg连续灌胃给药90 d,使用双能X线骨密度扫描仪测量大鼠骨密度后,处死取股骨测量骨9骼强度。结果：二苯乙烯苷各剂量组均能增加髂骨段的骨密度,增加髂骨段和肱骨段的骨矿重量和骨矿面积;显著增加骨折力与骨碎力。结论：二苯乙烯苷不仅能够增强骨密度,提高单位面积骨矿的含量及骨矿在组织中的含有面积,增强骨组织对于外力作用的抵抗能力,提高结构韧性与结构强度,为临床有效预防并改善骨质疏松症提供实验依据。     

HPLC法测定乌参醒脑滴丸中二苯乙烯苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定乌参醒脑滴丸中2,3,5,4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（二苯乙烯苷）含量的方法。方法采用SunFireTM C18（250 mm×4.6 mm,5.0μm）色谱柱,柱温为30℃;以乙腈-水（体积比20∶80）为流动相,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为320 nm。结果二苯乙烯苷在12.75～85.0μg.mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.8%,RSD为2.16%。结论该法可用于乌参醒脑滴丸中二苯乙烯苷的含量测定。     

2种藜芦属植物化学成分及其抗真菌活性研究

目的 采用活性指导分离的方法研究百合科藜芦属植物Veratrum virid和藜芦V.nigrum干燥根及根茎的抗真菌活性成分.方法 利用多种色谱技术进行分离纯化.通过现代波谱技术对单体化合物进行结构鉴定.结果 从V.virid的甲醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为rubivirine-3-O-β-glucop...