HPLC-CAD法测定元胡止痛胶囊中生物碱和香豆素

目的建立高效液相色谱法联合二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法同时测定元胡止痛胶囊中延胡索乙素、盐酸黄连碱、去氢延胡索甲素、延胡索甲素、欧前胡素和异欧前胡素。方法采用HPLC-CAD法,Thermo Hypersil BDS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–10 mmol/L甲酸铵(甲酸调pH 4.0),梯度洗脱;体积流量0.8 mL/min;CAD雾化器温度为35℃;柱温35℃;进样量为20μL。结果延胡索乙素、盐酸黄连碱、去氢延胡索甲素、延胡索甲素、欧前胡素和异欧前胡素分别在0.041～1.020、0.013～0.320、0.068～1.700、0.041～1.020、0.101～2.520、0.039～0.980μg与峰面积线性关系良好;平均回收率分别为98.41%、98.89%、98.32%、99.35%、98.05%、98.67%,RSD值分别为0.9%、1.4%、0.7%、1.1%、0.7%、0.9%。结论该方法准确、简便、灵敏度高,可用于元胡止痛胶囊中生物碱和香豆素类多成分的质量控制研究。     

基于谱效关系的醋延胡索炮制前后特征成分研究

目的探讨醋延胡索炮制前后HPLC指纹图谱与镇痛药效的相关性,筛选炮制特征成分。方法建立生延胡索与醋延胡索HPLC指纹图谱,对两者化学成分进行差异性分析,以大鼠扭体反应为模型建立评价指标,采用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛、孕酮、雌二醇、前列腺素E_2(prostaglandin E_2,PGE_2)、前列腺素F_(2a)(prostaglandin F_(2a),PGF_(2a))等指标评价镇痛药效,结合灰色关联度分析法与熵权法研究醋延胡索的谱-效关系,指认醋延胡索炮制特征成分。结果建立了不同批次生延胡索饮片、醋延胡索饮片的HPLC指纹图谱,确定了31个共有峰。生延胡索饮片与醋延胡索饮片均有止痛效果,以醋延胡索止痛效果最为显著。镇痛谱效关联度分析得到峰9、18～21、25、26醋炙后关联度得分有了显著的提升,与醋炙后镇痛疗效呈显著正相关。结论通过谱-效关系明确了醋延胡索炮制特征成分为原阿片碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、去氢紫堇碱、延胡索乙素、四氢小檗碱、延胡索甲素,为醋延胡索炮制质量控制提供一定依据。     

左旋延胡索乙素印迹聚合物的制备及固相萃取应用

目的利用分子印迹技术制备左旋延胡索乙素(L-THP)分子印迹聚合物(MIPs),并进行固相萃取应用研究。方法以L-THP为模板分子,甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,制备左旋延胡索乙素分子印迹聚合物(L-THP-MIPs),并进行固相萃取实验优化萃取条件,考察L-THP-MIPs吸附的选择性和专一性。结果 L-THP-MIPs能特异性地吸附L-THP,而对L-THP的结构类似物延胡索甲素未表现出明显的吸附行为。结论L-THP-MIPs对L-THP具有良好的选择性和专一性。     

基于一测多评法对延胡索中生物碱类成分的质量控制研究

目的建立同时测定延胡索中原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙素和延胡索甲素7种生物碱类成分的HPLC方法,在此基础上,建立一测多评法的方法学考察方式,验证该方法在延胡索质量控制中应用的可行性和技术适用性。方法以延胡索所含的7种成分为指标成分,采用2种校正方法分别建立各成分与延胡索乙素的相对校正因子(fk/s),计算各成分的量,实现一测多评;同时采用外标法测定延胡索中该7种成分的量,并比较2种一测多评法所得计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果建立了延胡索中7种生物碱类成分一测多评法方法学的考察模式;不同的色谱柱和仪器一测多评法的计算值与外标法实测值之间没有显著性差异。结论同时测定延胡索中原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙素和延胡索甲素7种生物碱的一测多评法可靠,结果准确,可用于延胡索药材的质量控制。     

延胡索提取物在大鼠血浆中的药代动力学研究

目的:考察延胡索提取物中主要成分延胡索乙素(tetrahydropalmatine,THP)和延胡索甲素(corydaline,CDL)在大鼠体内的药代动力学过程。方法:采用血药浓度法,LC-MS/MS测定大鼠ig不同浓度(0.46,0.93,1.38 g.kg-1)延胡索提取物后不同时间点的血药浓度,Win Nonlin药动学数据处理软件计算药动学参数。结果:ESI(+)离子化条件下采用MRM工作模式用m/z 370～354,m/z 356～340分别检测CDL、THP,同时以m/z 306～140来检测内标盐酸山莨菪碱(anisodaminehydrochlo-ride,ADM)。CDL,THP分别在1.13～565,1.5～750 ng.mL-1表现出良好的线性关系,高、中、低3个剂量的回收率、日内和日间精密度均符合要求,不同剂量THP和CDL的Cmax分别为(84.3±9.2),(157.3±99.6),(497.1±71.3)ng.mL-1和(30.8±1.3),(54.4±22.7),(91.2±15.4)ng.mL-1,Tmax分别为(54.8±6.9),(119.2±5.7),(62.5±7.5)min和(31.5±0.07),(65.6±10.6),(111.5±4.2)min。结论:LC-MS/MS选择性好,灵敏度高,适用于血浆样品成分含量的测定,为进一步的复方药代动力学的研究奠定了基础。     

头痛康颗粒剂提取工艺的研究

目的：优选头痛康颗粒剂提取工艺。方法：正交实验。结果：挥发油提取时,加水量（Ａ）,浸泡时间（Ｂ）,蒸馏时间（Ｃ）３因素均对挥发油的含量有显著性影响（Ａ〈０．０１,Ｂ〈０．０５,Ｃ〈０．０１）。渗漉提取时,乙醇浓度（Ａ）,浸泡时间（Ｂ）、渗滤速度（Ｃ）３因素对浸膏得率均无显著性影响,而对延胡素乙素含量部分有显著性影响（Ａ〈０．０５,Ｂ〉０．０５,Ｃ〈０．０５）。结论：本方最佳提取工艺为挥发性药材先用     

Pharmacokinetics of chlorogenic acid and corydaline in DA-9701, a new botanical gastroprokinetic agent,in rats

Abstract

1.?Few studies describing the pharmacokinetic properties of chlorogenic acid (CA) and corydaline (CRD) which are marker compounds of a new prokinetic botanical agent, DA-9701, have been reported. The aim of the present study is to evaluate the pharmacokinetic properties CA and CRD following intravenous and oral administration of pure CA (1–8?mg/kg) or CRD (1.1–4.5?mg/kg) and their equivalent dose of DA-9701 to rats.

2.?Dose-proportional AUC and dose-independent clearance (10.3–12.1?ml/min/kg) of CA were observed following its administration. Oral administration of CA as DA-9701 did not influence the oral pharmacokinetic parameters of CA. Incomplete absorption of CA, its decomposition in the gastrointestinal tract, and/or pre-systemic metabolism resulted in extremely low oral bioavailability (F) of CA (0.478–0.899%).

3.?CRD showed greater dose-normalized AUC in the higher dose group than that in lower dose group(s) after its administration due to saturation of its metabolism via decreased non-renal clearance (by 51.3%) and first-pass extraction. As a result, the F of CRD following 4.5?mg/kg oral CRD (21.1%) was considerably greater than those of the lower dose groups (9.10 and 13.8%). However, oral administration of CRD as DA-9701 showed linear pharmacokinetics as a result of increased AUC and F in lower-dose groups (by 182% and 78.5%, respectively) compared to those of pure CRD. The greater oral AUC of CRD for DA-9701 than for pure CRD could be due to decreased hepatic and/or GI first-pass extraction of CRD by other components in DA-9701.     

UPLC-TQ-MS同时测定金红片中12个成分

目的采用超高效液相色谱-电喷雾三重四极杆质谱(UPLC-TQ-MS)技术建立了同时快速测定金红片(Jinhong Tablets)中12个成分(莽草酸、绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C、普洛托品、别隐品碱、延胡索乙素、紫堇碱、巴马汀、槲皮素、异川楝素、川楝素)的定量分析方法。方法采用Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,体积流量为0.3mL/min;采用多反应监测模式同时对金红片中12个成分进行定量分析。结果在17 min内完成12个成分的准确定量;12个定量成分的线性范围分别为50.00～6 400.00μg/mL(r=0.999 1)、2.28～292.00μg/mL(r=0.999 9)、0.82～104.80μg/mL(r=0.999 8)、1.56～200.00μg/mL(r=0.999 7)、0.91～116.00μg/mL(r=0.999 0)、0.94～120.00μg/mL(r=0.999 0)、9.38～1 200.00μg/mL(r=0.997 4)、2.93～375.00μg/mL(r=0.999 0)、1.25～160.00μg/mL(r=0.999 9)、31.25～4 000.00μg/mL(r=0.999 7)、0.93～120.90μg/mL(r=0.999 8)、1.41～180.70μg/mL(r=0.999 7),平均加样回收率分别为101.9%、101.2%、97.9%、96.8%、100.8%、100.1%、108.7%、100.0%、99.2%、102.0%、99.0%、103.2%,15批金红片中12个成分的质量分数分别为10.11～22.72 mg/g、0.16～0.43 mg/g、0.06～0.23 mg/g、0.13～0.42 mg/g、0.08～0.26 mg/g、0.08～0.25 mg/g、1.94～2.59 mg/g、0.20～0.96 mg/g、0.07～0.30 mg/g、1.72～2.14mg/g、0.03～0.06mg/g、0.03～0.06mg/g。结论采用UPLC-TQ-MS所建立的多指标成分定量分析方法可适用于金红片中不同结构类型成分的同时检测,该方法简单、灵敏度高、专属性好,为金红片的整体质量控制研究提供参考和借鉴。     

不同产地延胡索中金属元素及生物碱含量的相关性研究

采用反相高效液相色谱法和原子吸收光谱法对不同产地的３１件延胡索药材的两种叔胺生物碱（延胡索甲素和乙素）和８种常见金属元素（Ｆｅ，Ｚｎ，Ｃｕ，Ｍｎ，Ｎｉ，Ｓｒ，Ｐｂ和Ｃｄ）的含量进行了测定。通过统计回归分析发现：药材中延胡索甲素的含量与Ｆｅ，Ｚｎ，Ｍｎ和Ｚｎ／Ｃｕ比具有明显的相关关系（ｒ＝０．７７０２，Ｐ＜０．０１）；延胡索乙素与Ｆｅ含量呈正相关（ｒ＝０．５０５１，Ｐ＜０．０１）；胡延索甲素与乙素的相关性为（ｒ＝０．６５０３，Ｐ＜０．０１）。延胡索经炮制后，Ｆｅ含量明显增加，生物碱含量稍有变化，其它元素含量变化不大。以上结果表明中药延胡索的活性可能是有机成份与金属元素相互作用的结果     

延胡索中3种成分近红外同步定量检测模型的建立

目的:建立延胡索近红外定量检测模型,快速测定延胡索中去氢紫堇碱、延胡索乙素、紫堇碱的含量。方法:通过HPLC测定延胡索中去氢紫堇碱、延胡索乙素、紫堇碱的化学值,并通过近红外光谱技术分别采集其近红外光谱,将化学值与近红外光谱一一对应,以偏最小二乘法建立校正模型,采用一阶求导和多元散射校正对模型进行优化,形成最佳延胡索近红外定量检测模型。结果:建立的去氢紫堇碱、延胡索乙素、紫堇碱校正模型的相关系数分别为0.987,0.998,0.997。通过验证集验证,去氢紫堇碱、延胡索乙素、紫堇碱3种生物碱成分真实值与预测值的相关系数分别为0.943,0.978,0.991,相对偏差分别为-14.75%~18.08%,-4.73%~9.23%,-10.99%~9.70%。结论:建立的近红外定量模型预测精度较高,可以用于延胡索3种生物碱成分的快速同步测定。