首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   360篇
  免费   23篇
  国内免费   37篇
耳鼻咽喉   3篇
儿科学   1篇
妇产科学   9篇
基础医学   101篇
口腔科学   19篇
临床医学   28篇
内科学   20篇
皮肤病学   4篇
神经病学   22篇
特种医学   4篇
外科学   35篇
综合类   79篇
预防医学   11篇
眼科学   15篇
药学   32篇
中国医学   17篇
肿瘤学   20篇
  2023年   6篇
  2022年   5篇
  2021年   12篇
  2020年   15篇
  2019年   8篇
  2018年   8篇
  2017年   7篇
  2016年   16篇
  2015年   22篇
  2014年   22篇
  2013年   43篇
  2012年   23篇
  2011年   33篇
  2010年   25篇
  2009年   18篇
  2008年   17篇
  2007年   16篇
  2006年   14篇
  2005年   13篇
  2004年   9篇
  2003年   8篇
  2002年   7篇
  2001年   5篇
  2000年   6篇
  1999年   7篇
  1998年   4篇
  1997年   3篇
  1996年   8篇
  1995年   9篇
  1994年   8篇
  1993年   4篇
  1992年   7篇
  1991年   1篇
  1990年   3篇
  1989年   2篇
  1987年   1篇
  1986年   1篇
  1985年   2篇
  1982年   1篇
  1980年   1篇
排序方式: 共有420条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
Bone marrow mesenchymal stem cells can reduce retinal ganglion cell death and effectively prevent vision loss. Previously, we found that during differentiation, female rhesus monkey bone marrow mesenchymal stem cells acquire a higher neurogenic potential compared with male rhesus monkey bone marrow mesenchymal stem cells. This suggests that female bone marrow mesenchymal stem cells have a stron-ger neuroprotective effect than male bone marrow mesenchymal stem cells. Here, we ifrst isolated and cultured bone marrow mesenchymal stem cells from female and male rats by density gradient centrifugation. Retinal tissue from newborn rats was prepared by enzymatic digestion to obtain primary retinal ganglion cells. Using the transwell system, retinal ganglion cells were co-cultured with bone marrow mesenchymal stem cells under hypoxia. Cell apoptosis was detected by lfow cytometry and caspase-3 activity assay. We found a marked increase in apoptotic rate and caspase-3 activity of retinal ganglion cells after 24 hours of hypoxia compared with normoxia. Moreover, apoptotic rate and caspase-3 activity of retinal ganglion cells signiifcantly decreased with both female and male bone marrow mesenchymal stem cell co-culture under hypoxia compared with culture alone, with more signiifcant effects from female bone marrow mesenchymal stem cells. Our results indicate that bone marrow mesenchymal stem cells exert a neuroprotective effect against hypoxia-induced apoptosis of retinal ganglion cells, and also that female cells have greater neuroprotective ability compared with male cells.  相似文献   
2.
ABSTRACT

Purpose: To investigate the role of G-protein-coupled bile acid receptor-1, Gpbar1 (TGR5) in the pathogenesis of Vogt-Koyanagi-Harada (VKH) disease.

Methods: The mRNA level of TGR5, iNOS, Arg1, CD16, and CD206 in macrophages was assayed by real-time PCR. ELISA was used to detect the production of cytokines in cell culture supernatants. The frequencies of CD4+IFN-γ+ and CD4+ IL-17+ T cells were tested by flow cytometry.

Results: A decreased expression of TGR5 in M1 macrophages was observed in active VKH patients as compared with normal controls. TGR5 stimulation of M1 macrophages with INT-777 caused a shift of the inflammatory M1 toward the anti-inflammatory M2 macrophage subtype. TGR5 activation of macrophages co-cultured with CD4+ T cells inhibited Th1 and Th17 polarization, as well as the release of IFN-γ and IL-17 in the culture supernatant.

Conclusion: Our results show that a decreased TGR5 expression might contribute to the pathogenesis of VKH disease.  相似文献   
3.
Cancer cachexia is a life-threatening syndrome characterized by muscle atrophy. Cancer cachectic muscle atrophy (CCMA) is associated with mitochondrial injury. Mitochondrial calpains have been reported to induce mitochondrial injury in mouse cardiomyocytes and pulmonary smooth muscle. In the present study, the presence of calpain in the mitochondria of skeletal muscle and its potential role in CCMA were investigated. Transwell plates were used to develop a myotube-carcinoma cell co-culture model to simulate the cancer cachexia environment in vitro. The calpain inhibitors, calpastatin (CAST) and calpeptin (CAPT), were used to inhibit calpain activity in myotubes during co-culture. Calpain-1, calpain-2 and CAST were found to be present in mouse myotube mitochondria. Co-culture activated calpain in both cytoplasm and mitochondria, which caused myotube atrophy. CAST and CAPT treatment prevented calpain activation in both cytoplasm and mitochondria, which inhibited myotube atrophy during co-culture. Additionally, CAST and CAPT treatment increased mitochondrial complex I activity, decreased mitochondrial permeability transition pore opening and improved mitochondrial membrane potential in myotubes during co-culture. In addition, CAST and CAPT treatment increased AKT/mTOR activity, inhibited FoxO3a activity and decreased atrogin-1 content in myotubes during co-culture. The present findings provide new insights to understand the mechanism of CCMA and further help the development of focused approaches to treat CCMA by manipulating the mitochondrial and cytosolic calpain activity.  相似文献   
4.
目的 观察大鼠神经干细胞(NSCs)在脊髓脱细胞支架(SCAS)上黏附、生长和分化情况,评价其构建脊髓组织工程的可行性。 方法 新生Sprague-Dawley大鼠大脑皮质来源NSCs传代培养并鉴定;Sprague-Dawley雌性大鼠脊髓组织改良物理振荡结合化学萃取法制备SCAS,并行基础评估;将第三代NSCs种植在SCAS上,体外共培养,免疫荧光、免疫组化和扫描电镜观察支架上细胞形态。 结果 共培养的细胞为能增殖、分化的NSCs。制备的SCAS孔隙率、含水率、酶解率都明显高于正常脊髓(|t| > 4.679, P < 0.01);SCAS基质结构呈疏松网络状,基质上可见极少量残留细胞核。NSCs在SCAS上黏附、生长良好,可分化为神经元和神经胶质细胞。 结论 制备的SCAS脱细胞较彻底,具有多通道空间结构,适合NSCs黏附、生长和分化,可用于脊髓组织工程。  相似文献   
5.
6.
目的:研究熊果酸对巨噬细胞-肝癌细胞共培养体中肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其作用 机制。方法:采用Transwell迁移和侵袭试验检测熊果酸处理与非处理的巨噬细胞-肝癌细胞共培养体中肝癌细胞的迁 移和侵袭能力的变化;Western印迹法检测共培养体中肝癌细胞上皮-间质转化蛋白E-cadherin,N-cadherin和vimentin的 表达情况。结果:共培养后的肝癌细胞的迁移和侵袭能力显著增强,并发生了上皮-间质样表型转变,上皮-间质转化 的标志蛋白E-cadherin的表达下调,而N-cadherin和vimentin的表达均上调;熊果酸处理的巨噬细胞-肝癌细胞共培养体 中,肝癌细胞的迁移和侵袭能力降低,E-cadherin表达上调,N-cadherin和vimentin的表达下调。结论:熊果酸能够显 著抑制共培养体中肝癌细胞的迁移和侵袭能力及上皮-间质转化能力。  相似文献   
7.
背景:既往研究表明壳聚糖和左旋聚乳酸制备的复合支架与一些细胞有着良好的生物相容性。目的:观察壳聚糖增强型左旋聚乳酸支架与大鼠嗅鞘细胞的生物相容性。方法:将出生1-3 d SD大鼠的嗅鞘细胞接种于壳聚糖增强型左旋聚乳酸膜上作为实验组,设置嗅鞘细胞与多聚赖氨酸联合培养为对照组,培养1,3,5,7 d进行细胞增殖力检测和免疫荧光抗体标记检测。结果与结论:嗅鞘细胞可在壳聚糖增强型左旋聚乳酸膜上存活,细胞毒性评级为Ⅰ级。实验组细胞形态呈圆形和椭圆形,突起少,细胞聚集成团;接种1d后,可见部分细胞团的外围细胞伸出短小突起,并渐向外周散开;接种第3天,见聚集成团的细胞扩散开来,大部分细胞生成突起,呈双极或三极,以双极为主;接种第5天,细胞突起明显伸长,形态仍以双极细胞和三极细胞为主,并可见扁圆细胞和不规则三角形细胞;接种第7天,细胞密度增加,突起伸展。对照组细胞形态与实验组具有类似特征。两组嗅鞘细胞数量、细胞周长和细胞面积差异无显著性意义(P〉0.05)。表明壳聚糖增强型左旋聚乳酸支架与嗅鞘细胞具有良好的生物相容性。  相似文献   
8.
目的:研究大鼠坐骨神经缺损后损伤近端神经组织中胞外基质分子TNC(tenascin-C)的表达变化及初步功能分析。方法:采用冰冻切片和免疫荧光染色法,检测神经缺损0d(对照组),4d(实验组)损伤近端神经组织TNC的表达变化及表达位置;并利用体外共培养施万细胞/成纤维细胞及细胞划痕实验初步研究TNC的作用。结果:免疫荧光染色发现TNC在损伤后4d处于高表达状态,并在神经外膜处与波形蛋白(Vimentin)共定位状况良好;体外细胞共培养实验发现下调成纤维细胞中的TNC可以降低与之共培养的施万细胞的迁移速度。结论:在神经损伤后成纤维细胞分泌TNC并比对照组表达大幅上调,且体外实验发现TNC可促进施万细胞的迁移速度。  相似文献   
9.
罗云  孙桂波  秦蒙  姚帆  孙晓波 《中国中药杂志》2012,37(22):3345-3349
细胞共培养由于能更好地模拟体内环境,便于更好的观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用以及探讨药物的作用机制和可能的作用靶点,填补了单层细胞培养与整体动物实验研究的鸿沟,近年来倍受医药领域的关注,成为药物研发、生物制药领域的研究热点.细胞共培养方法包括直接共培养和间接共培养,主要用于疾病病理基础、新型治疗手段以及药物活性筛选的研究.现有的细胞共培养技术主要用于单一药物的药效学研究,用于联合药物相互作用的研究甚少.中药复方之间协同配伍,减毒增效.细胞共培养技术符合中药多成分、多靶点的作用特点,这对于未来探讨中药联合用药对机体的作用及机制的研究具有一定参考价值,为中药及复方研究提供了一种新的手段.该文就细胞共培养技术的方法与运用进行了概述,并对该技术运用于中药及复方的研究进行了展望.  相似文献   
10.
细胞共培养技术是指在体外将各种不同的细胞置于同一培养环境中,近似模拟体内微环境的一种方法.该系统能很好地展现细胞与细胞之间,细胞与微环境之间的联系,在了解细胞内在机制方面具有重要的理论意义.该方法广泛应用于干细胞研究领域.该文就共培养的研究方法及在干细胞领域中的应用作一综述.  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号