凉血通瘀方干预高血压大鼠急性脑出血模型对脑组织中差异miRNA表达的影响＊

目的 研究凉血通瘀方对高血压大鼠急性脑出血模型脑组织miRNA表达的影响，对差异表达的miRNA靶基因进行分析，探索凉血通瘀方可能的药效机制。方法 将自发性高血压大鼠随机分成对照组（B）和实验组（C）。适应性饲养一周后，C组灌胃凉血通瘀方，B组灌胃等体积生理盐水，连续5天，每天1次。构建脑出血模型后收集脑组织，借助全转录组测序技术获得miRNA表达量，与miRBase数据库比对获取已知miRNA，使用miRDeep2预测新miRNA。差异分析软件为DESeq2，筛选阈值为|log₂FC| ≥1 并且P <0.05。对显著差异表达的miRNA进行靶基因预测，对靶基因进行GO功能、KEGG通路富集和PPI网络分析。结果 实验组和对照组对比，共发现21个显著差异表达的miRNA，上调有9个，下调有12个，共预测得到1243个有统计学意义的靶基因。GO富集分析发现，生物过程中突触囊泡分泌的调节、神经递质分泌的调节和神经递质运输的调节占前三位，神经元投射终点、全膜、质膜区域和细胞投射则是主要的细胞成分。分子功能分别为小GTPase绑定、底物特异性跨膜转运蛋白活性和离子跨膜转运体活性。通路分析结果显示，靶基因在癌证通路、pI3K-Akt信号通路、人类乳头瘤病毒感染、神经活性配体-受体相互作用和MAPK通路等分布广泛。采用STRING网站和Cytoscape软件，根据MCC算法筛选出ADRA2C、CASR、CCL28、CCR1、DRD2、GNAT3、GRM2、DYNC1LI1、GABBR1、GNAI1等核心靶基因。结论 凉血通瘀方对脑出血急性期鼠脑组织内miRNA的表达有重要影响；显著差异表达miRNAs可能通过靶向核心基因调控凉血通瘀方干预急性脑出血的病理过程及预后。     

半夏泻心汤对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠肠道微生态及Th17/Treg细胞平衡的影响＊

目的 观察半夏泻心汤对饮用葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导建立的溃疡性结肠炎（UC）模型小鼠Th17/Treg细胞平衡及肠道微生态的影响，从免疫失衡及菌群紊乱角度分析半夏泻心汤治疗UC的作用机制。方法 将40只C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药（美沙拉嗪）组及半夏泻心汤组，除空白组外的各小鼠采用2.5% DSS水溶液自由饮用7天诱导建立UC小鼠模型。自实验第8日起，分别采用灭菌水、美沙拉嗪水溶液、半夏泻心汤水溶液给上述各组别小鼠灌胃。采用HE染色观察结肠组织病理学变化，ELISA方法检测组织炎症因子含量，流式细胞术检测Th17及Treg细胞的相对数量，16S rRNA测序技术进一步检测模型小鼠粪便中菌群的变化。结果 与空白组比较，模型组小鼠结肠损伤严重，血清炎症因子含量显著升高（P<0.01）；与模型组比较，中药干预组小鼠结肠损伤减轻，血清TNF-α、IFN-γ含量显著下降（P<0.05）。较空白组小鼠相比，模型组小鼠Th17细胞百分比显著升高（P<0.01），而Treg细胞百分比显著降低（P<0.01）。经半夏泻心汤干预后，其小鼠Th17细胞数量均显著降低（P<0.05），Treg细胞数量则显著升高（P<0.05）。同时，半夏泻心汤可升高门水平上Firmicutes、属水平上Lachnospiraceae_NK4A136_group、unclassified_f_Lachnospiraceae、Prevotellaceae_UCG-001、Alistipes；降低门水平上Actinobacteriota，科水平上Bifidobacteriaceae、Atopobiaceae、Clostridiaceae，属水平上Clostridium_sensu_stricto_1、Coriobacteriaceae_UCG-002、Bifidobacterium的相对丰度。结论 半夏泻心汤可使Treg细胞相对数量升高、Th17细胞相对数量降低，以维持Th17/Treg细胞动态平衡；同时可降低有害菌Clostridium_sensu_stricto_1、Coriobacteriaceae_UCG-002的相对丰度，升高产短链脂肪酸类菌Lachnospiraceae_NK4A136_group、Prevotellaceae_UCG-001、unclassified_f_Lachnospiraceae等菌属的相对丰度，调控肠道微生物结构及动态平衡，从而发挥治疗UC的作用。     

凉血消疕丸联合阿维A胶囊治疗掌跖脓疱病临床观察

目的:探讨凉血消疕丸与阿维A胶囊联合使用治疗掌跖脓疱病的临床疗效。方法:52名掌跖脓疱病患者通过采用随机数字表法划分为对照组和治疗组各26例。对照组患者仅服用阿维A胶囊剂,治疗组加服凉血消疕丸。治疗周期设定为8周,比较分析治疗后的两组皮损评分、总有效率、复发率及不良反应发生率。结果:结束治疗后观察,总有效率情况为治疗组92.3%,对照组80.8%,差异对比有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后的皮损评分及复发率均低于对照组,两组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:凉血消疕丸和阿维A胶囊联合使用治疗掌跖脓疱病较仅使用阿维A胶囊具有疗效优势,值得推广应用于掌跖脓疱病的临床治疗。     

补中益气汤对于肝再生线粒体能量代谢的研究概况＊

肝再生的机制非常复杂，线粒体功能障碍所引起的能量供给不足是影响因素之一，但其机理亟待研究。严重肝损害时肝细胞ATP供应减少、线粒体能量代谢异常，导致肝再生受到抑制。补中益气汤为李东垣所创，其具补中益气、升阳举陷之功，有实验证实补中益气汤具有保护线粒体功能、增加线粒体能量代谢的作用，从而促进肝再生。本文综述补中益气汤总方与其中各类中药对线粒体能量代谢的保护作用，从而为促进肝再生提供新的治疗手段并对改善病人预后有重要意义。     

二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫血管生成相关因子表达的影响

目的：探讨二补助育汤对胚胎着床障碍模型小鼠子宫内膜形态及血管生成素-1（Ang-1）mRNA、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达和定位的影响。方法：24只ICR雌性小鼠随机分为空白组、模型组、戊酸雌二醇组、二补助育汤组，每组6只，用米非司酮建立胚胎着床障碍动物模型，各组给予相应药物灌胃，妊娠第5天处死小鼠后，检测各组妊娠率、平均着床位点数、子宫内膜Ang-1和VEGF mRNA表达量及其蛋白定位。结果：模型组小鼠平均胚胎着床位点数、Ang-1 mRNA、VEGF mRNA表达量明显低于空白组（均P<0.05）；与模型组比较，二补助育汤组平均胚胎着床位点数、Ang-1 mRNA、VEGF mRNA表达量显著提高（均P<0.05）。结论：二补助育汤可提高子宫内膜Ang-1和VEGF蛋白表达量，促进子宫内膜血管生成，从而提高子宫内膜容受性。     

健脾消癌方通过PI3K/Akt信号通路抑制结肠癌血管生成的研究＊

目的 观察结肠癌HCT116细胞健脾消癌方的条件培养液对HUVEC细胞管腔形成的影响，从PI3K/Akt生物轴调控角度探讨其作用机制。方法 培养HCT116细胞，细胞设3组：对照组，健脾消癌方组（加入15%健脾消癌方含药血清）及人参皂苷Rg3组；制备HCT116细胞健脾消癌方条件培养液（分组及制备方法见实验方法），用条件培养液干预HUVEC（脐静脉内皮细胞，Human Umbilical Vein Endothelial Cells），Matrigel基质胶法检测HCT116细胞健脾消癌方条件培养液对HUVEC小管形成的影响。随后采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组HCT116细胞磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、p-Akt、VEGF（血管内皮生长因子，Vascular endothelial growth factor）蛋白表达。最后在结肠癌HCT116荷瘤小鼠中验证健脾消癌方对肿瘤生长速度的影响，并经瘤组织VEGF蛋白表达、CD31免疫组化染色检测肿瘤内血管生成情况。结果 模型组HUVEC细胞管腔形成较空白血清组显著增加（P<0.05）；健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组较模型组HUVEC细胞管腔形成显著减少（P<0.01）。p-Akt和VEGF蛋白表达水平模型组高于空白血清组（P<0.05），健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组显著低于模型组（P<0.01）；PI3K、Akt蛋白表达量组间差异无统计学意义。与对照组比较，模型组荷瘤小鼠肿瘤体积显著性增大，瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积显著性增加，差异有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组荷瘤小鼠肿瘤体积显著减小，瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 健脾消癌方可抑制肿瘤的血管生成和生长，其作用机制可能与PI3K/Akt生物轴调控VEGF表达有关。     

四物汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂有效成分比较

目的比较四物汤传统饮片汤剂与其配方颗粒汤剂有效成分的含有量差异。方法四物汤传统饮片汤剂与其配方颗粒汤剂溶液的分析采用依利特SinoChrom ODB⁃BP柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相乙腈⁃0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;体积流量0.8 mL/min;检测波长215 nm(没食子酸),230 nm(芍药苷),330 nm(绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、毛蕊花糖苷);柱温30℃。结果6种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9996),平均加样回收率96.81%~99.01%,RSD 0.81%~1.58%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于四物汤的质量控制。     

清热化瘀汤对急性脑出血患者血清hs-CRP、血浆S100β蛋白和NSE的影响

目的:探究清热化瘀汤联合依达拉奉对急性脑出血患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血浆S100β蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的影响。方法:选择2017年5月—2019年5月在我院神经内科就诊符合纳入标准的80例急性脑出血患者,随机分为联合组(40例)和依达拉奉组(40例),两组均给予基础治疗和依达拉奉静脉滴注治疗,联合组则在此基础上加用清热化瘀汤。观察并比较两组的临床疗效、神经功能缺损程度评分(NIHSS)、格拉斯哥昏迷评分(GCS)、hs-CRP、S100β蛋白和NSE水平及脑血肿量。结果:联合组的总有效率为95%(38/40),显著高于依达拉奉组的总有效率75%(30/40)(P<0.05)。治疗后,两组NIHSS评分降低,GCS评分升高,且联合组NIHSS评分明显低于依达拉奉组(P<0.05),GCS评分高于依达拉奉组(P<0.05)。治疗后,两组hs-CRP、S100β蛋白和NSE水平及均脑血肿量均低于治疗前,且联合组hs-CRP、S100β蛋白和NSE水平及脑血肿量明显低于依达拉奉组(P<0.05)。结论:清热化瘀汤联合依达拉奉对急性脑出血患者具有良好的疗效,可显著改善其神经缺损,降低hs-CRP、S100β蛋白和NSE水平及脑血肿量。     

八珍汤对肺癌化疗致白细胞减少症临床疗效及部分机制研究

目的:探究八珍汤对肺癌化疗所致白细胞减少症的疗效及作用机制,有助于精准治疗并提高疗效。方法:选取2017年4月至2018年4月哈尔滨医科大学附属第一医院收治的肺癌化疗所致白细胞减少症患者66例作为研究对象,采用数字随机表法按就诊顺序号,分为对照组和观察组,每组33例。对照组予利血生20 mg口服,3次/d;鲨肝醇100 mg口服,3次/d,升白治疗,观察组在对照组基础上加用八珍汤化裁治疗,均治疗4周,观察不同方法治疗后在白细胞水平含量比较,比较治疗前、治疗末神疲乏力、心悸气短、头晕目眩、面色淡白、畏寒肢冷、纳呆食少中医症候积分和免疫功能指标CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、NK细胞变化情况,治疗过程中收集不良反应情况,结束治疗后观察疗效情况。结果:1)2组治疗1周、2周、3周、4周后白细胞计数菌显著高于治疗前(P<0.05),观察组治疗1周、2周、3周、4周后显著优于对照组(P<0.05);2)2组患者治疗前神疲乏力、心悸气短、头晕目眩、面色淡白、畏寒肢冷、纳呆食少,比较差异无统计学意义(P>0.05),完成治疗方案后,2组患者以上指标较治疗前均显著下降(P<0.05)。治疗末观察组患者以上指标显著低于对照组(P<0.05)。3)2组患者治疗前CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、NK细胞比较,差异无统计学意义(P>0.05),完成治疗方案后,2组患者CD8^+较治疗前均显著下降,CD4^+、CD4^+/CD8^+、NK细胞较治疗前显著升高(P<0.05),治疗末观察组患者以上指标显著优于对照组(P<0.05)。4)完成治疗后观察组患者显效率、总有效率明显高于对照组(P<0.05)。5)2组在不良反应发生率上比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:八珍汤对肺癌化疗所致白细胞减少症能升高白细胞水平,提高疗效,改善症状。可能和该药能提高机体免疫力,促使骨髓造血功能有关。     

穴位贴敷联合风咳汤治疗感染后咳嗽的临床研究

目的:探究风咳汤联合穴位贴敷治疗感染后咳嗽的临床疗效,以期丰富治疗方法,为治疗感染后咳嗽提供科学依据。方法:选取2017年1月至2018年1月南京市中西医结合医院收治的感染后咳嗽患者88例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组44例。对照组予常规治疗,观察组在对照组基础上加用风咳汤联合穴位贴敷治疗,均治疗2周。观察比较2组患者采用不同方法治疗前、后中医证候积分、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、诱导痰上清液中P物质(SP)含量水平变化情况。治疗过程中收集不良反应资料,结束治疗后比较2组疗效。结果:1)2组患者完成治疗方案后,中医症候积分较治疗前均显著下降,观察组显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2)治疗后2组患者IL-8、TNF-α、SP含量均较治疗前显著下降,且观察组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);3)观察组患者临床控制率、总有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。4)2组患者ALT、AST、CCr、BUN水平和不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:风咳汤联合穴位贴敷治疗感染后咳嗽能提高疗效,降低炎性反应水平,改善症状和生命质量。