芍药汤及其加减方治疗溃疡性结肠炎的研究进展

芍药汤由黄连、黄芩、大黄、白芍、当归、木香、槟榔、肉桂,甘草构成。因其具有清热利湿、调气活血功效,后世医家皆推此方为治疗湿热泄痢之主方。现代临床应用中,除芍药汤原方,其加减方亦用于溃疡性结肠炎治疗,并可与其他方剂（痛泄要方、白头翁汤、参苓白术散等）、西药（美沙拉嗪、柳氮磺吡啶、英夫利昔单抗等）、中医针刺或艾灸等特色疗法联用。临床疗效结果显示芍药汤及其加减方能明显降低梅奥内镜（Mayo）评分、结肠黏膜病变（Baron）评分、中医证候积分等疾病评分,改善患者肠道症状效果显著且不良反应少。实验药理学研究显示芍药汤可通过抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)等促炎因子表达,上调白细胞介素-10(IL-10)等抑炎因子来减轻炎症反应;可通过调节炎症信号通路,阻断连环反应,减少细胞凋亡;可通过调节免疫轴平衡、调节免疫蛋白修复异常免疫屏障;可调节肠道菌群平衡、促进肠上皮细胞再生、改善黏膜通透性,从而恢复肠道内环境平衡以达到治疗溃疡性结肠炎的效果;其药物单体黄芩苷、芍药苷、黄连素等可起到抗炎、抗菌、调节代谢等作用。该文就芍药汤治疗溃疡性结肠炎...     

芍药汤对湿热泄泻大鼠的炎性细胞因子与肠道菌群的影响

目的 明确芍药汤对湿热泄泻大鼠的止泻抗炎作用和肠道菌群调节作用，探讨芍药汤中“通因通用”法的作用机制。方法 采用高温+高湿+高糖高脂饮食+致病因子方式造模，分别设置正常组（不造模）、模型组（给予生理盐水），芍药汤全方组（生药5.62 g·kg^-1），芍药汤全方去大黄组（生药5.15 g·kg^-1），单味大黄组（生药0.01 g·kg^-1），给药5日，每天早晚2次。每天晚上给药3 h后用腹泻指数评估各给药组止泻效果，最后1次给药3 h后用酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α），大鼠白细胞介素-6（IL-6），大鼠白细胞介素-1β（IL-1β）和大鼠白细胞介素-2（IL-2）含量，用16sDNA对大鼠粪便中菌群结构进行表征。结果 与模型组比较，芍药汤全方、芍药汤去大黄和单味大黄水煎液均可显著降低大鼠腹泻指数（P<0.01），其起效速度为芍药汤全方>芍药汤去大黄>单味大黄。与模型组比较，3种给药方案均可显著降低大鼠体内炎症因子水平（P<0.01），其中芍药汤全方组效果最佳，而单味大黄组和芍药汤去大黄组次之，二者之间并无显著性差异。与模型组比较，各组给药方案均可以显著减少致病菌和条件致病菌（如Escherichia-Shigella，Prevotella，Enterorhabdus和Bacteroides）的丰度，增加益生菌（如Ruminococcus，Turicibacter和Lachnospiraceae）的增殖（P<0.01）。其中单味大黄组、芍药汤全方组和正常组的肠道菌群结构更加接近，芍药汤去大黄组较正常组和其余两个给药组差异较大（P<0.01）。结论 芍药汤可通过抗炎和调节肠道菌群紊乱两个环节促进湿热泄泻大鼠的转归，方中大黄对于降低有害菌丰度、促进益生菌增殖方面起到关键作用，是芍药汤促进肠道菌群再平衡的关键，也初步证实了芍药汤方用大黄“通因通用”治疗湿热泄泻的科学性。     

基于LC-MS研究芍药汤对溃疡性结肠炎大鼠粪便代谢产物的影响

目的：基于液相色谱-质谱联用（LC-MS）探究芍药汤对2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的溃疡性结肠炎（UC大鼠的粪便代谢产物的影响。方法：将SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、芍药汤组（11.1 g·kg-1）,除正常组外,采用TNBS诱导UC大鼠模型,除芍药汤组外,各组分别予以生理盐水,均治疗7 d,观察各组大鼠一般情况和疾病活动指数（DAI）,采用苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理学改变,免疫组化法（IHC）检测结肠组织中白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-22(IL-22)蛋白表达,采用LC-MS技术检测大鼠粪便样本,并通过主成分分析（PCA）、偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）分析数据,对筛人体代谢组数据库（HMDB）数据库及京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库,结合文献筛查,筛选差异代谢物,结合Metabo Analyst 5.0检索,得到通路富集分析。结果：UC大鼠灌胃芍药汤可使DAI评分降低,与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜结构破坏,黏膜下层炎性细胞浸润,结肠组织IL-8蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,IL-22蛋白表达水平明...     

芍药汤对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜免疫屏障的干预作用

目的:探讨芍药汤对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜免疫屏障的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,美沙拉嗪组(0.067 g·kg~(-1)),芍药汤低、中、高剂量组(1.8,3.6,7.2 g·kg~(-1)),采用TNBS诱导溃疡性结肠炎模型,对应给予生理盐水、美沙拉嗪、芍药汤灌胃治疗7 d,采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理学改变,免疫组化法和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肠黏膜中CD4~+T淋巴细胞数量和分泌型免疫球蛋白A(SIg A)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肠黏膜损伤程度评分及病理学评分显著升高(P0.01);CD4~+T淋巴细胞,SIg A蛋白表达显著下降(P0.01);与模型组比较,各给药组大鼠结肠黏膜损伤程度评分及病理学评分显著下降(P0.01),肠黏膜CD4~+T淋巴细胞,SIg A表达明显升高(P0.05,P0.01);与美沙拉嗪组及芍药汤低剂量组比较,芍药汤中、高剂量组肠黏膜损伤程度评分和病理学评分显著下降(P0.01),芍药汤中、高剂量组大鼠肠黏膜中CD4~+T淋巴细胞及SIg A蛋白表达明显升高(P0.05)。结论:芍药汤可通过增加肠黏膜中CD4~+T细胞数量及SIg A分泌的表达,起到减轻肠黏膜损伤,保护肠黏膜免疫屏障功能作用。     

芍药汤调节湿热型溃疡性结肠炎大鼠JAK2/STAT3和SOCS3的分子机制

目的:观察芍药汤通过治疗湿热型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型,对结肠组织JAK2/STAT3和SOCS3的影响,从分子水平上探讨芍药汤治疗湿热型UC的机制。方法:Wistar大鼠雌雄各60只,分为空白组、模型组、芍药汤高、中、低(24,12,6 g·kg~(-1))剂量组、阳性药组(柳氮磺砒啶组,1 g·kg~(-1)),通过高脂高糖辛辣食物加免疫复合法,2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)结合乙醇复合法复制湿热型UC大鼠模型,芍药汤高、中、低剂量灌服,柳氮磺砒啶组予柳氮磺砒啶研磨成粉灌服,空白组及模型组予等体积生理盐水灌胃,连续21 d。采集结肠组织,运用苏木素-伊红(HE)染色观察病理切片、实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测基因含量、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测蛋白含量。结果:模型组产生炎症反应,镜下出现黏膜损伤、溃疡,提示造模成功。与空白组比较,模型组JAK2,STAT3蛋白及基因表达明显升高(P0.05),SOCS3明显下降(P0.05);与模型组比较,各治疗组JAK2,STAT3蛋白及基因表达明显下降,其中芍药汤高剂量组最为显著(P0.01),SOCS3明显升高,芍药汤高剂量组最为显著(P0.05)。结论:芍药汤能够改善湿热型UC大鼠结肠黏膜组织的病变程度,有效减轻炎症反应,与SOCS3抑制JAK2/STAT3信号通路,产生负反馈调节,降低其活化有关。     

HPLC-Q-TOF-MS/MS分析防风芍药汤水煎液的化学成分

目的:运用高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(HPLC-Q-TOF-MS/MS)对复方防风芍药汤水煎液的主要化学成分进行分析与鉴定。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0 m L·min-1,进样量5μL,检测波长254 nm,采用正、负离子两种模式对色谱流出物进行检测与分析。结果:通过分子离子峰和二级质谱特征碎片离子,结合对照品的质谱信息和相关文献报道,对35个主要峰进行成分分析,最终鉴定了其中31个化合物,包括5个色原酮类,4个蒎烷单萜苷类化合物,15个黄酮类化合物,分别是中药防风、芍药和黄芩的特征性化合物,基本明确了复方防风芍药汤水煎液中化合物的主要类型成分。结论:采用HPLC-Q-TOF-MS/MS可快速分析鉴定防风芍药汤水煎液的主要化学成分,对复方药效物质基础和其作用机制的进一步研究具有重要意义。     

芍药汤对大肠湿热型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中CD14，FADD，Caspase-8表达的影响

目的:观察芍药汤对大肠湿热型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠血清中细胞黏附分子-1(ICAM-1),转化生长因子-β1(TGF-β1)含量及病灶结肠组织中白细胞分化抗原14(CD14),Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)与天冬半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)mRNA及蛋白表达的影响。方法:将SPF级Wistar大鼠80只随机分为正常组10只、造模组70只,采用病证结合的方式复制大肠湿热型UC大鼠,即高脂高糖辛辣饮食+2,4-二硝基苯磺酸(DNBS)结合乙醇复合法造模,造模成功后,按随机数字表法将造模组分为模型组、柳氮磺砒啶(SASP)组及芍药汤低、中、高剂量组,每组14只,给予柳氮磺嘧啶0.2 g·kg^-1·d^-1,芍药汤低、中、高剂量(6,12,24 g·kg^-1·d^-1)灌胃,正常组及模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续21 d。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清ICAM-1,TGF-β1含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测结肠组织CD14,FADD,Caspase-8 mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织CD14,FADD,Caspase-8蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中ICAM-1含量明显升高,TGF-β1含量明显降低(P<0.05);CD14,FADD,Caspase-8 mRNA及蛋白相对表达量明显升高(P<0.05)。与模型组比较,芍药汤中、高剂量组及SASP组大鼠血清中ICAM-1含量明显降低,而芍药汤低、中、高剂量组及SASP组大鼠血清中TGF-β1含量明显升高(P<0.05);各干预组CD14,FADD,Caspase-8 mRNA及蛋白表达量明显降低(P<0.05),并以芍药汤高剂量组及SASP组更为明显。结论:芍药汤对大肠湿热型UC大鼠具有一定干预作用,其机制可能与抑制CD14,FADD及Caspase-8 mRNA及蛋白的表达有关。