卡那霉素延长给药时鸡基底乳头的损伤与修复

目的　了解卡那霉素延长给药时鸡基底乳头的超微形态变化。方法　将 3天龄罗曼雏鸡连续肌注卡那霉素 (2 0 0mg·kg- 1·d- 1) 10天后随机分组 :①经典施药组 :不再注射药物 ,于药毕后 1、3、7、10、15天时行ABR检测及基底乳头扫描电镜观察。②延长施药组 :继续肌注卡那霉素 ,于连续施药 13、17、2 0、2 5、3 0天时行ABR检测和基底乳头扫描电镜观察。结果　ABR检测结果显示 ,连续施药 2 0天内 ,鸡ABR阈值损失及恢复不受卡那霉素影响 ,与施药 10天即停药者非常相似 ;施药 2 0天后 ,鸡ABR阈值则再次明显升高。扫描电镜观察 :将鸡施与卡那霉素 10天完毕时 ,鸡基底乳头近端 40 %区域毛细胞完全破坏消失 ;其后虽继续施药 ,毛细胞已开始再生修复损伤 ,连续施药 2 0天内基底乳头再生毛细胞无明显受损 ,其形态发育与施药 10天即停药者基本相似 ;连续施药 2 5天时 ,则有部分再生毛细胞出现受损 ,连续施药 3 0天时 ,大部分再生毛细胞破坏消失。结论　鸡卡那霉素耳中毒后 ,卡那霉素的持续存在明显阻止了鸡基底乳头损伤的完全修复     

柱后衍生化 -HPLC 法测定硫酸卡那霉素注射液 及滴眼液的含量

目的 新建硫酸卡那霉素注射液及滴眼液含量的高效液相色谱 - 柱后衍生化 - 荧光检测方法。方法 色谱柱为 Zorbax Eclipse Plus C18 (4.6mm×100mm, 3.5μm);流动相为 pH3.4 的缓冲液 ( 取庚烷磺酸钠一水合物 4.35g 和无水硫酸钠 16g,加水 溶解并稀释至成 1000mL,用冰醋酸调节 pH 值至 3.4±0.1)- 甲醇 (74:26);柱温为 35℃;流速为 1mL/min。柱后衍生化试液为邻苯 二甲醛溶液;流速为 0.3mL/min;衍生化反应温度为 45℃;荧光激发波长为 340nm,发射波长为 455nm。结果 卡那霉素 A 在 0.0973~583.8μg/mL 浓度范围内线性关系良好 (r=0.9999),硫酸卡那霉素注射液和滴眼液的平均回收率分别为 99.6% 和 99.3%, RSD 为 0.63% 和 0.66%(n=9)。结论 本方法检测灵敏度高,重复性好,简便快速,结果准确可靠,可作为硫酸卡那霉素注射液 及滴眼液的含量测定方法。     

染料比色法测定硫酸卡那霉素滴眼液中主药的含量

目的:建立以染料比色法测定硫酸卡那霉素滴眼液中主药含量的方法。方法:依据卡那霉素与溴甲酚绿在pH值为6.0时的磷酸盐缓冲液中反应生成离子对化合物的光谱特征,于432nm波长处测定吸收度并计算含量。结果:卡那霉素检测浓度在18.0～72.0μg/ml范围内与吸收度呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为99.3%(RSD=1.20%)。结论:本方法快速、简便,可用于该制剂生产过程中的快速检验。     

卡那霉素延长施与时鸡听功能的变化

目的　了解鸟类耳中毒后氨基甙类药物外环境的持续存在是否影响其听功能的恢复。方法　将罗曼小鸡于生后第 3天开始按 2 0 0mg .kg-1.d-1连续肌肉注射卡那霉素 10天。然后再随机分组。经典施药组 :不再注射任何药物 ,于药毕后 1、3、7、10、15天时接受ABR检测。延长施药组 :继续按 2 0 0mg .kg-1.d-1肌肉注射卡那霉素 ,于连续给药 13、17、2 0、2 5、30天时接受ABR检测。结果　小鸡延长施药时 ,其ABR阈移于连续施药 10天时达到极限 (约 4 3dB) ;其后虽继续施药 ,鸡听功能已开始恢复。连续施药 2 0天内 ,鸡听功能的恢复与施药 10天即停药者非常相似 ;施药 2 0天后 ,鸡听功能出现下降趋势 ,至连续施药 2 5天时 ,鸡ABR阈值已显著高于施药 10天毕后 15天时 ,差异非常显著 ;连续施药 30天时 ,鸡ABR阈值明显高于连续施药 2 0天时 ,差异亦有统计学意义。结论　卡那霉素延长施与阻碍了鸡耳中毒后听功能的恢复。     

超氧化物歧化酶在卡那霉素耳中毒中的作用

作者应用羟胺法，观察了卡那霉素（ＫＭ）耳中毒时豚鼠耳蜗组织超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、听神经复合动作电位及微音器电位变化。结果显示：正常ＳＯＤ活力为２４２．２５±４３．１０亚硝酸单位／毫克蛋白（Ｎｕ／ｍｇ．ｐｒｏｔｅｉｎ）；ＫＭ组的ＳＯＤ活力增加到３１３．９２±３５．５９Ｎｕ／ｍｇ．ｐｒｏｔｅｉｎ（Ｐ＜０．０１）．结合耳蜗电图变化对结果进行了讨论，认为脂质过氧化反应很可能参与了ＫＭ耳中毒过程。     

庆大霉素和卡那霉素耳中毒后雏鸡耳蜗毛细胞的再生

给２大龄纯种罗丝鸡分别肌注庆大霉素（ＧＭ）和卡那霉素（ＫＭ）１０天，于停药当天、第１、２、３和４周处死小鸡，取出内耳基底乳头（ＢＰ）用扫描电镜和光镜观察，发现从ＢＰ的基底到中部有广泛性损害，毛细胞损失率约占４０％，在１周后受损部位表皮板上出现丛生的有微绒毛的再生毛细胞，随恢复期延长，再生毛细胞表面积增大，动纤毛和静纤毛来长出，３至４周受损部位已完全被发育成熟的再生毛细胞填补，ＢＰ形态恢复。     

Kanamycin acetyltransferase gene from kanamycin-producingStreptomyces kanamyceticus IFO 13414

A kanamycin producer,Streptomyces kanamyceticus IFO 13414 is highly resistant to kanamycin. Cloning of the kanamycin resistance genes inS. lividans 1326 with pIJ702 gave several kanamycin resistant transformants. Two transformants,S. lividans SNUS 90041 andS. lividans SNUS 91051 showed similar resistance patterns to various aminoglycoside antibiotics. Gene mapping experiments revealed that plasmids pSJ5030 and pSJ2131 isolated from the transformants have common resistant gene fragments. Subcloning of pSJ5030 gave a 1.8 Kb gene fragment which showed resistance to kanamycin. Cell free extracts ofS. lividans SNUS 90041,S. lividans SNUS 91051 and subclone aS. lividans SNUS 91064 showed kanamycin acetyltransferase activity. The detailed gene map is included.     

卡那霉素致豚鼠耳蜗细胞凋亡及 caspase- 3表达的研究

目的:探讨卡那霉素耳慢性中毒与豚鼠耳蜗细胞凋亡的关系,及耳蜗细胞凋亡是否与凋亡蛋白酶caspase-3信号转导有关。方法:取50只豚鼠随机分为5组,实验组连续14d肌肉注射硫酸卡那霉素,200mg/(kg·d),分别对健康对照组及停药1、3、7、14d组处死豚鼠,处死前检测其ABR的变化,并利用TUNEL法检测耳蜗细胞凋亡情况及免疫组化法测定caspase-3的表达。结果:豚鼠卡那霉素耳慢性中毒后,随停药时间延长,ABR阈值较对照组明显上升,同时耳蜗细胞的凋亡数增多,且愈近底回愈多,愈近顶回则愈少。caspase-3阳性表达增高,与对照组比较差异均有显著性(P<0.01)。结论:卡那霉素耳慢性损害与耳蜗细胞的凋亡有关;耳蜗细胞的凋亡过程中有Caspase-3的激活。     

卡那霉素B的酶—化学修饰

用酶—化学修饰的方法,对卡那霉素B的C_3~′位进行化学结构改造。利用耐药菌E.coliK.12 ML1629产生的钝化酶选择性地使卡那霉素B的C_3~′位羟基磷酸化,再用化学方法,将卡那霉素B-3~′—磷酸酯转化为3′—氯代—3′—去氧卡那霉素B,进而合成3′去氧卡那霉素B,即妥布拉霉素。