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1.
目的:探讨山茱萸多糖诱导人宫颈癌Hela细胞的凋亡作用及Bax蛋白表达的变化.方法:用12.5,25,50 g·L-1的山茱萸多糖作用Hela细胞24 h.倒置显微镜下观察细胞凋亡的形态,免疫组化SP法检测凋亡相关蛋白Bax表达的变化.结果:Hela细胞经3个不同浓度的山茱萸多糖作用后,出现典型的细胞凋亡的形态学变化,其程度与浓度相关;而且Bax蛋白的表达量随浓度升高而增加,免疫组化评分(IHS)分别为0.18,0.44,1.35.结论:山茱萸多糖能够促进Bax的表达,诱导Hela细胞凋亡.  相似文献
2.
隐丹参酮对宫颈癌Hela细胞增殖及细胞凋亡的影响   总被引:3,自引:1,他引:2       下载免费PDF全文
目的:研究隐丹参酮对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响.方法:MTT法检测不同浓度隐丹参酮分别在24,48,72 h对Hela细胞的抑制作用;流式细胞仪(FCM)检测隐丹参酮对Hela细胞周期和凋亡的影响;Western blot法检测E6,p53,p21蛋白的表达.结果:不同质量浓度(0.5~16 mg·L~(-1))隐丹参酮对Hela细胞的毒性均有明显剂量和时间依赖性,其24,48,72 h的IC_(50)值分别为17.8,8.17,6.55 mg·L~(-1);隐丹参酮可使Hela细胞细胞周期的构成发生明显的变化并诱导细胞凋亡.Western blot表明,隐丹参酮作用Hela细胞后HPV E6的蛋白水平表达逐渐降低,p53和p21的蛋白水平表达逐渐升高.结论:隐丹参酮对宫颈癌Hela细胞有较强的细胞毒性,其作用机制可能是使Hela细胞生长停滞在G_0/G_1期并诱导细胞凋亡,使S期细胞比例降低;抑制HPV E6的蛋白的表达,使p53功能恢复,启动凋亡,从而起到杀伤肿瘤的作用.  相似文献
3.

Ethnopharmacological relevance

The Thai/Lanna medicinal plant recipe database “MANOSROI II” contained the medicinal plant recipes of all regions in Thailand for the treatment of various diseases including anti-cancer medicinal plant recipes.

Aim of the study

To investigate anti-proliferative activity on HeLa cell lines of medicinal plant recipes selected from the Thai/Lanna medicinal plant recipe database “MANOSROI II”.

Materials and methods

The forty aqueous extracts of Thai/Lanna medicinal plant recipes selected from the Thai/Lanna medicinal plant recipe database “MANOSROI II” were investigated for anti-proliferative activity on HeLa cell line by SRB assay. The apoptosis induction by caspase-3 activity and MMP-2 inhibition activity by zymography on HeLa cell line of the three selected aqueous extracts, which gave the highest anti-proliferative activity were determined. Phytochemicals and anti-oxidative activities including free radical scavenging activity, inhibition of lipid peroxidation and metal chelating inhibition activities were also investigated.

Result

Sixty percentages of the medicinal plant recipes selected from “MANOSROI II” database showed anti-proliferative activity on HeLa cell line. The recipes of N031(Albizia chinensis (Osbeck) Merr, Cassia fistula L., and Dargea volubilis Benth.ex Hook. etc.), N039 (Nymphoides indica L., Peltophorum pterocarpum (DC.), and Polyalthia debilis Finet et Gagnep etc.) and N040 (Nymphoides indica L. Kuntze, Sida rhombifolia L., and Xylinbaria minutiflora Pierre. etc.) gave higher anti-proliferative activity than the standard anti-cancer drug, cisplatin of 1.25, 1.29 and 30.18 times, respectively. The positive relationship between the anti-proliferative activity and the MMP-2 inhibition activity and metal chelating inhibition activity was observed, but no relationship between the anti-proliferative activity and apoptosis induction, free radical scavenging activity and lipid peroxidation inhibition activity. Phytochemicals found in these extracts were alkaloids, flavonoids, tannins and xanthones, but not anthraquinones and carotenoids. The recipe N040 exhibited the highest anti-proliferative and MMP-2 inhibition on HeLa cancer cell line at 30 and threefolds of cisplatin, respectively (p<0.05), while recipe N031 gave the highest caspase-3 activity (1.29-folds over the control) (p<0.05).

Conclusion

This study has demonstrated that recipe N040 selected from MANOSROI II database appeared to be a good candidate with high potential for the further development as an anti-cancer agent.  相似文献
4.
小檗碱对HeLa细胞凋亡及其凋亡相关蛋白表达的影响   总被引:2,自引:2,他引:0       下载免费PDF全文
目的 研究小檗碱对人宫颈癌HeLa细胞株增殖及凋亡的影响及其发生机制.方法 采用MTT法观察小檗碱对HeLa细胞增殖的影响,DNA ladder、流式细胞仪等方法进行细胞凋亡检测,用Western blotting方法检测凋亡过程中相关蛋白Bel-2和Bax表达的变化.结果 小檗碱在体外试验中能明显抑制HeLa细胞的增殖,在一定的时间、剂量范围内呈时间-剂量依赖关系.20、40 mg/L小檗碱作用48 h后,细胞DNA片段分析可看到凋亡时降解形成的梯带,流式细胞仪检测到了细胞凋亡峰,各组的凋亡率分别是(16.7±2.8)%、(29.6±4.4)%,与对照组(1.9±0.6)%和5 mg/L小檗碱组(2.3±0.8)%相比差异显著(P<0.01).在凋亡过程中,Bax蛋白表达明显增高,而Bcl-2蛋白表达下凋.结论 小檗碱体外能抑制HeLa细胞增殖并诱导其发生凋亡,其机制可能与Bax蛋白表达明显增高,而Bcl-2蛋白表达下调有关.  相似文献
5.
报告基因方法监测重金属汞及其化合物的早期毒性   总被引:1,自引:1,他引:0  
余占江  杨秦  杨晓达  王夔 《中国中药杂志》2006,31(16):1346-1349
目的:基于热休克信号响应和分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告基因,建立HSE-SEAP-HeLa细胞模型,预测重金属(汞及其化合物)的早期毒性。方法:将pHSE-SEAP质粒转染到人子宫颈癌HeLa细胞中,建立瞬时HSE-SEAP响应模型。热休克(42 ℃,1 h)或重金属化合物(CdCl2,5 μmol·L-1,4 h)处理后,在完全DMEM培养基中恢复48 h后,检测细胞上清液中的分泌型碱性磷酸酶的含量(表示该状态下细胞中的热休克蛋白表达量),同时用MTT方法检测对应浓度下的细胞活性,以验证模型的有效性和重复性。并用亚致死浓度(由MTT实验确定)的无机和矿物汞(HgCl2,HgS和朱砂)和柳硫汞钠处理细胞,检测诱导的细胞热休克响应。结果:热休克和CdCl2作用HSE-SEAP-HeLa细胞模型后,细胞上清液中的分泌型碱性磷酸酶的含量显著升高;热休克蛋白表达早于Cd2+对细胞活性的降低。4种汞化合物在亚致死浓度均诱导细胞内热休克蛋白的变化,但4种化合物的作用时间和浓度效应不同,显示不同类型的汞化合物早期毒性存在差异。结论:HSE-SEAP-HeLa细胞模型可有效检测重金属诱导的热休克应激作用,并具有良好的重复性,可应用于重金属有关的早期毒性预测或药物毒性评估。  相似文献
6.
蟾毒灵诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的蛋白组学研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的:该文通过考察蟾毒灵(bufalin)处理人宫颈癌HeLa细胞株后对细胞蛋白质表达谱的影响,寻找蟾毒灵在HeLa细胞中的可能作用靶点。方法:通过MTT检测细胞活性确定蟾毒灵的IC50,并通过流式细胞术和Hoechst 33342染色检测蟾毒灵诱导细胞凋亡。应用蛋白质组学技术寻找差异表达蛋白点并进行鉴定,用Western blotting试验进行确认。结果:蟾毒灵具有较强的细胞毒作用,IC50(154±21.5)nmol.L-1,可以诱导HeLa细胞发生凋亡。蛋白组学的结果显示蟾毒灵处理组与对照组相比有11个差异表达蛋白,其中9个蛋白点发生了下调;2个蛋白发生了上调。这些蛋白可能是蟾毒灵在HeLa细胞中的作用靶点。Western blotting分析显示heat shock protein 27,vimentin,HNRPK在蟾毒灵处理后的表达调节结果与双向电泳的结果吻合。结论:蟾毒灵可以诱导人宫颈癌HeLa细胞发生凋亡,其凋亡诱导作用可能是多个靶点蛋白共同参与的结果。  相似文献
7.
目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对Hela细胞的诱导凋亡作用,寻找其可能的靶点蛋白质。方法:用50、1002、00、400μg/mL梯度浓度的EGCG孵育Hela细胞24h和48h,荧光显微镜下观察Hela细胞凋亡形态,用MTT检测其生长抑制率,用Annexin V-FITC/PI染色观察其凋亡率,鬼笔环肽染色观察其肌动蛋白聚合体(F-actin)降解程度。然后利用偶联EGCG的微球与Hela细胞裂解液孵育,结合靶点蛋白,靶点蛋白经考马斯蓝染色后,切下目标条带进行质谱鉴定。结果:EGCG能诱导Hela细胞凋亡和F-actin的破坏,并呈时间和剂量依赖性。EGCG结合的靶带蛋白为actin类蛋白。结论:直接结合于actin类蛋白并破坏细胞骨架可能是EGCG诱导Hela凋亡的途径之一。  相似文献
8.
翟延君  程飞  王添敏  初正云  李娜 《中成药》2011,33(12):2052-2055
目的观察和探索花旗松素对人宫颈癌Hela细胞的体外抗肿瘤活性及其作用机理。方法结晶紫染色法检测花旗松素对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用;RT-PCR法检测与肿瘤细胞凋亡相关基因的表达。结果花旗松素能够抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,呈剂量依赖关系;花旗松素不能诱导Bcl-2 mRNA和Bax mRNA的表达,但能使P53和P21的mRNA表达量增加。结论花旗松素具有良好的体外抑制人宫颈癌Hela细胞增殖作用;花旗松素诱导Hela细胞死亡与细胞凋亡相关,其分子机制可能与升高P53和P21mRNA表达有关,而与Bcl-2和Bax的蛋白转录无关。  相似文献
9.
目的研究白花蛇舌草多糖对体外培养的人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞生长的影响。方法常规法体外培养人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞,设空白对照组、阳性对照组和供试药物组(大、中、小剂量),分别采用MTT法和流式细胞仪检测白花蛇舌草多糖对人宫颈癌Hela细胞和人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制率和凋亡率;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化。结果白花蛇舌草多糖可抑制人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞的生长,并促进其凋亡,其作用效果与其浓度正相关,与空白对照组相比具均有显著性差异(P﹤0.01)。结论本研究结果提示,白花蛇舌草多糖具有较好的抗肿瘤活性。  相似文献
10.
异亚丙基莽草酸抗炎作用机制研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的观察异亚丙基莽草酸(ISA)对人宫颈癌Hela细胞转录因子STAT1、STAT3、NF-κ B表达作用的影响,探讨其抗炎作用机制。方法用MTT法体外检测ISA不同浓度对Hela细胞生长的抑制作用,采用双荧光素酶报告系统检测不同浓度药物对转录因子STAT1、STAT3、NF-κ B表达活性的影响。结果ISA对人宫颈癌Hela细胞的生长没有明显的抑制作用;ISA处理组NF-κ B-luc荧光素酶活性下降,而GAS-luc、STAT3-luc荧光素酶活性无明显改变。结论ISA可能通过下调转录因子NF-κ B的活性,抑制炎症因子的表达,对炎症反应起到抑制作用。  相似文献
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