首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   2746篇
  免费   188篇
  国内免费   134篇
耳鼻咽喉   21篇
儿科学   21篇
妇产科学   31篇
基础医学   604篇
口腔科学   27篇
临床医学   127篇
内科学   533篇
皮肤病学   29篇
神经病学   185篇
特种医学   39篇
外科学   188篇
综合类   558篇
预防医学   117篇
眼科学   13篇
药学   255篇
中国医学   78篇
肿瘤学   242篇
  2024年   1篇
  2023年   17篇
  2022年   32篇
  2021年   71篇
  2020年   83篇
  2019年   53篇
  2018年   38篇
  2017年   57篇
  2016年   78篇
  2015年   76篇
  2014年   150篇
  2013年   156篇
  2012年   168篇
  2011年   158篇
  2010年   153篇
  2009年   142篇
  2008年   145篇
  2007年   204篇
  2006年   187篇
  2005年   174篇
  2004年   160篇
  2003年   160篇
  2002年   113篇
  2001年   94篇
  2000年   95篇
  1999年   88篇
  1998年   46篇
  1997年   36篇
  1996年   36篇
  1995年   31篇
  1994年   18篇
  1993年   5篇
  1992年   9篇
  1991年   2篇
  1990年   9篇
  1989年   4篇
  1988年   5篇
  1987年   2篇
  1986年   1篇
  1985年   4篇
  1984年   4篇
  1981年   1篇
  1977年   1篇
  1974年   1篇
排序方式: 共有3068条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
目的 克隆菊花脑芳樟醇合酶基因CnTPS1的全长编码序列,利用原核系统表达融合蛋白,为进一步研究该基因在菊花脑萜类合成中的功能提供理论依据。方法 以菊花脑基因组数据为基础,设计特异性引物,PCR扩增CnTPS1的全长编码序列,利用生物信息学分析软件分析序列特征。利用qRT-PCR技术分析CnTPS1基因在不同组织中的基因表达量。构建原核表达载体,体外诱导目的蛋白表达。结果 CnTPS1编码序列全长1749bp,编码582个氨基酸;基因表达模式分析表明该基因在茎和管状花中表达量较高;原核表达系统能诱导出67.58kDa大小的蛋白。结论 首次从菊花脑中克隆得到一个芳樟醇合酶基因CnTPS1,运用生物信息学方法对其编码蛋白的理化性质、结构特征等进行了分析预测,分析了该基因的组织表达模式,并在原核表达系统中成功诱导表达出目标蛋白,这些结果将为菊花脑萜类合酶基因的功能以及萜类物质生物合成途径的解析提供理论依据。  相似文献   
2.
3.
目的 探讨冷诱导RNA结合蛋白(CIRBP)在放射性肺损伤模型中的表达变化。方法 将30只雄性C57BL/6小鼠按体重随机分为2组,每组15只,对照组小鼠不做任何处理,模型组小鼠经20 Gy X射线单次胸部照射,构建放射性肺损伤模型,于照射后5周解剖。采用苏木素-伊红(H&E)染色和Masson染色观察肺组织病理改变及胶原的沉积;采用免疫组织化学法检测肺组织炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达;采用qRT-PCR技术检测肺组织中CIRBP mRNA的表达;采用免疫荧光技术和Western blotting技术检测肺组织中CIRBP蛋白的表达。结果 与对照组相比,模型组肺组织血管扩张充血、炎细胞浸润、部分肺泡间隔增厚,IL-6的表达[(187.22 ±34.77) vs (129.41 ±5.58),t = 3.179,P < 0.05]和TNF-α的表达[(187.02 ±19.16 )vs (137.52 ±23.53),t = 5.069,P < 0.05]均升高,差异具有统计学意义,而且模型组肺组织中CIRBP mRNA的表达明显升高[(1.97 ±0.39) vs (1 ±0.08),t = 3.45,P < 0.05]。除此之外,免疫荧光和Western blot结果显示模型组CIRBP蛋白表达均明显升高[(14.76 ±1.61) vs (9.32 ±1.26),t = 3.751,P < 0.05;(1.49 ±0.14) vs (1.13 ±0.17),t = 2.819,P < 0.05],差异具有统计学意义。结论 CIRBP在放射性肺损伤模型中的表达明显升高,其可能是放射性肺损伤过程中的重要促炎因子。  相似文献   
4.
Cervical squamous cell carcinoma and endocervical adenocarcinoma (CESC) is the fourth commonest female malignancy worldwide. CESC progresses in immune-microenvironment mainly composed of infiltrating immune and stromal cells. Here, we performed an integrated analysis incorporating the expression profiles from the Cancer Genome Atlas (TCGA) database and scores of immune and stromal cells calculated by Estimation of Stromal and Immune cells in Malignant Tumours using Expression data (ESTIMATE) algorithm. A two-gene signature (CD1C and CD6 genes) was established to predict the prognosis of CESC. Based on this signature, patients were divided into the high- and low-risk groups, and this signature showed good prognostic performance according to the results of Kaplan-Meier analysis and receiver operating characteristic (ROC) analysis in train set and two validation sets. A nomogram was built for evaluating the clinical applicability of this signature. In addition, based on Tumor Immune Estimation Resource (TIMER) database, 2 hub genes showed negative correlations with tumor purity and positive correlations with infiltrating levels of immune filtrating cells. What’s more, we propose new treatment strategies for the two prognostic subtypes. Low- risk patients were found presenting with a higher level of immune checkpoint molecules and showing higher immunogenicity in immunophenoscore (IPS) analysis, which indicated a better response for immunotherapy. Meanwhile, estimated by Genomics of Drug Sensitivity in Cancer (GDSC) database, the high-risk patients showed sensitive responses to five chemotherapy drugs. Finally, 10 candidate small-molecule drugs for CESC were defined. In summary, the CD1C-CD6 signature can accurately predict the prognosis of CESC.  相似文献   
5.
目的:为了验证丹参类黄酮-3′,5′-羟基化酶(Flavonoid 3′,5′-hydroxylase,F3′5′H)基因与丹参花色表型的相关性,本研究克隆并分析了紫花丹参99-3株系和一些白花丹参中的F3′5′H基因。方法:本研究通过提取紫花丹参和白花丹参中的总RNA,再将其反转录得到cDNA,以此cDNA为模板,利用PCR方法扩增获得F3′5′H基因全长序列。再利用生物信息学分析方法,分析了该基因编码蛋白质的理化性状、结构域、系统进化等特点,并预测了该蛋白质的亚细胞定位、跨膜区等;利用实时定量PCR方法检测了该基因的表达特异性;利用毛状根遗传转化方法获得了该基因的过表达阳性毛状根株系。结果:F3′5′H基因全长1551 bp,编码516个氨基酸,相对分子质量为57.4 kDa。该基因在丹参花中高丰度表达。在42份(紫花25份;白花17份)丹参样品中发现一个单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNP)位点在紫花和白花丹参中呈现与花色相关的稳定变化。系统发育分析表明丹参F3′5′H与美女樱的F3′5′H具有较高序列同源性。获得了过表达F3′5′H的毛状根株系。结论:本研究在丹参中克隆到F3′5′H基因,对其序列进行了分析,为进一步研究丹参F3′5′H基因的功能奠定基础。  相似文献   
6.
7.
目的:探究并分析加味香砂六君子汤通过抑制Wnt信号通路对胃癌大鼠桩蛋白(paxillin)、大鼠凋亡相关蛋白(RelA)表达的影响。方法:选取健康成年Wistar大鼠120只,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组60只,对2组大鼠进行胃癌造模处理,对照组大鼠又随机分为未处理组、处理(生理盐水)后8周组、处理(生理盐水)后12周组,每组20只。观察组大鼠又随机分为未处理组、处理(汤药)后8周组、处理(汤药)后12周组,每组20只。观察2组大鼠处理前、处理后8周、处理后12周paxillin、RelA。结果:2组大鼠处理前后体质量差异有统计学意义(P<0.05),2组大鼠处理前体质量比较差异无统计学意义(P>0.05),处理后,2组大鼠体质量有所降低,但观察组大鼠降低程度明显小于对照组(P<0.05);2组大鼠处理前后wnt-1、paxillin、RelA水平差异有统计学意义(P<0.05),2组大鼠处理前wnt-1、paxillin、RelA水平比较差异无统计学意义(P>0.05),处理后,2组大鼠wnt-1、paxillin、RelA水平呈降低趋势,但观察组大鼠wnt-1、paxillin、RelA水平明显小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:加味香砂六君子汤能有效通过抑制wnt以降低胃癌大鼠paxillin、RelA的表达。  相似文献   
8.

Background

The cytochrome P-450 2J2 (CYP2J2) is known to be one of the major enzymes of epoxygenase pathway of arachidonic acid in extrahepatic tissues, which produces series of regioisomeric cis-epoxyeicosatrienoic acids (EETs) such as 5,6-, 8,9-, 11,12-, and 14,15-EETs. In the present study, we analyzed the impact of a genetic variant in CYP2J2 on coronary artery disease (CAD) in the Telangana region of Indian population.

Material and methods

The case–control study consisted of 100 CAD cases and 110 healthy controls. The deoxyribonucleic acid was extracted using the salting out method. Genotyping and gene expression was performed by polymerase chain reaction (PCR)-restriction fragment length polymorphism and real-time-PCR methods.

Results

In the present study, the percentage of smokers, alcoholics, hypertensive patients, and diabetics was high. Increase in fasting glucose, urea, creatinine, fasting triglycerides, total cholesterol (TC), low-density lipoprotein-cholesterol (LDL-C), total cholesterol/high-density lipoprotein (TC/HDL), LDL/HDL, homocysteine, and C-reactive protein levels were significantly higher in patients with CAD than in controls (p < 0.001). CYP2J2 G-50T was associated with CAD (p = 0.04). The mRNA expression of CYP2J2 showed altered gene expression in this study among CAD patients in comparison with control (p = 0.01).

Conclusions

A functionally relevant polymorphism of the CYP2J2 gene was independently associated with an increased risk of CAD.  相似文献   
9.
目的 探讨细胞黏附分子CD99在人髓母细胞瘤组织中的表达特点及其临床意义。方法 采用免疫组化法检测107例髓母细胞瘤及15例瘤旁正常脑组织标本中CD99的表达。所有病人均随访至死亡或截止至2013年12月,随访时间为12~80个月,利用Kaplan-Meier生存曲线进行生存分析。结果 髓母细胞瘤CD99阳性表达率(57.94%,62/107)明显高于瘤周正常脑组织(0%,0/15;P<0.05)。CD99的表达水平与病人性别、年龄、肿瘤的病理组织学分型和分子亚型均无明显相关性(P>0.05)。CD99的高表达与髓母细胞瘤病人的预后呈显著负相关(P<0.05)。结论 CD99高表达与髓母细胞瘤预后显著相关,可作为预后判断的指标及治疗髓母细胞瘤潜在的新靶点。  相似文献   
10.
目的 构建人CD147胞内结构域(CD147 intracellular domain,CD147ICD)融合蛋白质粒,表达、提取、纯化CD147ICD蛋白并进行蛋白质互作分析。方法 将CD147ICD的cDNA片段插入pET-32a(+)质粒载体后,转化大肠杆菌Origami B(DE3)感受态细胞,大量培养后用异丙基硫代-β-d-半乳糖苷诱导蛋白表达,超声破碎法裂解细胞,采用Ni-Sepharose FF预装柱纯化TrxA-His6-CD147ICD融合蛋白,经凝血酶酶切、超滤后获得CD147ICD蛋白。结果 CD147ICD融合蛋白质粒经测序比对后表明构建成功;采用Ni-Sepharose FF预装柱纯化的TrxA-His6-CD147ICD融合蛋白纯度和浓度均较高,经凝血酶酶切、超滤后获得的CD147ICD蛋白纯度在95%以上,蛋白浓度为0.74 mg/mL。结论 纯化出了高纯度的、具有生物学活性的CD147ICD蛋白,为CD147ICD互作分子的鉴定及结构解析奠定了基础。  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号