木瓜提取物的抗炎活性研究

目的 研究不同部位木瓜提取物在细胞水平上的抗炎作用及机制.方法 依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取已用65％乙醇抽提的木瓜粉末,得到乙酸乙酯、正丁醇及水溶性部位提取物;建立THP-1及L929细胞炎症模型,用MTr法检测3个部位提取物的抗炎活性.利用核转录因子(NF-κB)报告基因系统检测NF-κB的活性,并用半定量PCR检测药物处理后细胞内炎症反应相关基因的表达.结果 与对照组比较,用乙酸乙酯部位处理后的THP-1细胞内Toll样受体及其下游炎症因子的表达水平明显下降,且用该组上清液处理后的L929细胞的活细胞数明显高于其他组.结论 木瓜的乙酸乙酯部位提取物具较好的抗炎效果.     

西藏木瓜HPLC指纹图谱研究及多成分测定

目的建立西藏木瓜的HPLC多指标定量指纹图谱,为西藏木瓜的质量控制和真伪鉴别提供方法和技术支持。方法采用高剪切分散乳化(HSDE)法提取木瓜鲜样,采用Agilent Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱,乙腈-0.5%冰乙酸+10 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相,进行梯度洗脱,体积流量为0.8 m L/min,柱温为25℃,检测波长为280 nm。利用ESI-TOF/MS法对西藏木瓜提取物中多种化合物进行鉴别,在对多指标活性成分进行定量测定的基础上,建立西藏木瓜的HPLC指纹图谱。结果西藏木瓜HPLC指纹图谱共有30个共有峰,指认了其中9个峰,分别为绿原酸、香草酸、咖啡酸、藜芦酸、芸香苷、槲皮苷、金丝桃苷、齐墩果酸和熊果酸,并对其进行了定量测定。指纹图谱中相似度分析表明,10批西藏木瓜的相似度较为接近,而西藏木瓜与其他品种木瓜的相似度差别较大。结论 HSDE-HPLC-DAD-ESI-TOF/MS法可以用于木瓜鲜样的快速提取和分析,在此基础上建立的指纹图谱结合相似度分析可用于其质量评价,为提高西藏木瓜的质量控制水平提供了方法和技术支持。     

木瓜总黄酮抗肿瘤活性研究

目的:研究木瓜总黄酮抗肿瘤活性。方法:通过乙醇-正丁醇萃取方法提取木瓜总黄酮;通过分子药物筛选模型、酶联免疫法检测木瓜总黄酮对免疫共刺激分子程序性死亡因子(PD)-1与其配体(PD-L1)结合的抑制作用。通过H22肿瘤细胞模型小鼠,观察木瓜总黄酮对模型小鼠体内肿瘤体积与存活时间的影响;流式细胞仪测定小鼠腹水中肿瘤细胞及淋巴细胞表面相关分子的表达。结果:正丁醇馏分中木瓜总黄酮占85%。木瓜总黄酮具有抑制PD-1和PD-L1结合的作用,且抑制效率具有剂量依赖性。木瓜总黄酮在复制模型10 d后对模型小鼠体内肿瘤有明显抑制作用;对S180细胞表面PD-L1表达具有明显抑制作用,对体内淋巴细胞侵润有明显增强作用。结论:木瓜总黄酮可以抑制PD-1与PD-L1的结合,同时可降低肿瘤细胞表面PD-L1的表达从而促进机体对肿瘤的免疫应答,最终达到抑制肿瘤生长,提高肿瘤鼠存活率的作用。     

液相色谱-质谱联用法分析木瓜中绿原酸与抗癌活性成分的相关性研究

目的：高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS）分析木瓜中绿原酸与抗癌活性成分的相关性。方法：采用HPLC-MS联用法,在Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱;流速为0.8 ml/min;检测波长为325 nm;柱温为25℃。分离测定木瓜中绿原酸的含量。结果：木瓜中绿原酸的含量为1.3 mg/g,相对标准偏差（RSD）为0.4%,线性关系良好。结论：木瓜中含有绿原酸,其主要成分与木瓜对脂肪酸合酶（FAS）的抑制及抗肿瘤作用有潜在的相关性。     

不同产地木瓜多糖含量的测定

目的:探讨不同产地木瓜多糖的含量,为临床合理应用和质量评价提供科学依据.方法:采用蒽酮-浓硫酸法显色,利用紫外分光光度法测定不同产地木瓜多糖的含量.结果:不同产地木瓜多糖的含量具有明显差异.木瓜多糖的含量与产区的平均日照、温度、气候、地理条件等有关.结论:本测定方法操作简单,重复性较好,结果准确可靠,可用于木瓜多糖的含量测定.     

HPLC法快速测定8种中药中齐墩果酸和熊果酸

目的建立一种快速分析方法,同时测定中药材马鞭草Verbena officinalis、女贞子Ligustrum lucidum、夏枯草Prunella vulgaris、白花蛇舌草Hedyotis diffusa、败酱草Patrinia scabiosaefolia、枇杷叶Eriobotrya japonica、山楂Crataegus pinnatifida、木瓜Chaenomeles Fructus papaya中齐墩果酸和熊果酸的量。方法使用快速溶剂萃取法,采用甲醇作为提取溶剂,静态萃取时间6 min,制备样品溶液,液相色谱分析采用Acclaim C_(30)色谱柱,以乙腈-0.2%醋酸(85∶15)为流动相,体积流量为0.3 mL/min,紫外检测波长为205 nm。结果样品提取时间为10 min,待测物齐墩果酸和熊果酸达到基线分离,且无样品基质干扰,r大于0.999,平均回收率在95.8%～102.7%,本法测定结果与《中国药典》2015年版方法的平均质量分数差异不显著。结论本方法简便、快速,且一法多用,可用于8种中药中齐墩果酸和熊果酸的测定。     

光皮木瓜质量标准研究与不同产地药材的质量评价

目的探讨光皮木瓜的质量控制方法,对不同产地光皮木瓜的质量进行评价。方法参照文献对不同产地的光皮木瓜进行薄层色谱鉴别,并依照药典附录要求对不同产地光皮木瓜进行水分、总灰分和醇溶性浸出物等常规检测项目测定。结果薄层色谱条件可以有效对光皮木瓜进行鉴别。此外光皮木瓜10个测定样品中,水分含量最高为13.11%,最低为9.28%;总灰分含量最高为3.12%,最低为2.22%;采用热浸法测定醇溶性浸出物含量最高值为24.51%,最低为14.10%。结论薄层色谱条件可以有效地鉴别光皮木瓜,新增的水分、总灰分、醇溶性浸出物的试验结果可作为建立光皮木瓜药材质量标准的实验依据。     

宣木瓜总有机酸的纯化及镇痛抗炎作用

目的:筛选适合分离纯化宣木瓜总有机酸的阴离子交换树脂,并对其进行分离纯化;研究纯化后总有机酸的镇痛抗炎作用。方法:以有机酸的收率为指标,筛选分离纯化宣木瓜有机酸最佳的离子交换树脂、最佳洗脱剂的浓度;通过ig给药,采用热板法和醋酸扭体法研究并比较宣木瓜总有机酸与醇提物的镇痛作用;以二甲苯诱导小鼠耳肿胀,观察并比较宣木瓜总有机酸与醇提物的抗炎作用。结果:717型强碱性阴离子交换树脂对宣木瓜总有机酸的交换能力最强,最佳洗脱剂为0.3 mol·L-1的盐酸,纯化后的有机酸纯度可达65.15%;宣木瓜总有机酸(0.15,0.3,0.6 g·kg-1)对醋酸和温度引起的小白鼠疼痛有明显的镇痛作用,对二甲苯致小鼠耳肿胀有一定的抑制作用,且与醇提物(1.25,2.5,5 g·kg-1)无显著性差异。结论:宣木瓜总有机酸可能是宣木瓜镇痛抗炎作用的有效组分之一。     

木瓜药材质量研究

目的考察不同产地木瓜药材的质量。方法采用2010年版《中国药典》规定方法测定不同产地木瓜药材的水分;采用高效液相色谱法测定齐墩果酸和熊果酸的含量。结果源自不同产地的10批木瓜药材中齐墩果酸、熊果酸的含量有显著差异。结论不同产地木瓜药材的质量存在差异。     

中药木瓜多糖的提取及含量测定

用苯酚—硫酸法对中药木瓜中多糖含量进行了测定 ,结果显示 ,中药木瓜中多糖平均含量为 7 0 3%。