基于网络药理学研究黄连解毒汤抗幽门螺杆菌感染作用机制

目的运用网络药理学方法预测黄连解毒汤抗Hp感染的主要有效成分、靶点及信号通路,挖掘其潜在作用机制,为后续实验研究提供依据。方法应用TCMSP筛选黄连解毒汤中黄连、黄芩、黄柏、栀子4味中药的主要有效成分及其潜在作用靶点。通过GeneCards数据库和人类孟德尔遗传数据库(OMIM)筛选Hp感染相关靶点,并取药物和疾病的交集靶点。将交集靶点导入Cytoscape 3.7.2构建有效成分和Hp感染相关靶点网络,并进行拓扑学分析。应用STRING在线分析平台构建靶蛋白相互作用(PPI)网络并进行分析。运用R语言在线检索Bioconductor平台对靶点进行GO功能富集;通过DAVID数据库对靶点进行KEGG通路富集分析。结果黄连解毒汤中共筛选出85个有效成分,主要包括槲皮素、小檗碱、山柰酚、汉黄芩素、黄芩素等。对应靶点112个,疾病相关靶点1960个,药物疾病共同靶点71个。网络中度值最高的有效成分为槲皮素,度值最高的靶点为环加氧酶1(PTGS1)。PPI网络中69个节点中度值较高的靶蛋白包括半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)、IL6、MAPK8、原癌基因(MYC)、VEGFA、表皮生长因子受体(EGFR)等。GO功能富集分析共获得89个条目,KEGG通路富集分析共筛选12条存在显著差异的信号通路,其中发挥主要作用的有癌症通路、ErbB信号通路、p53信号通路、凋亡、黏附斑等。结论黄连解毒汤可通过多成分、多靶点、多通路发挥对Hp的治疗作用,可通过抗肿瘤机制调控胃癌进程,本研究可为其有效成分研究和抗Hp机制研究提供依据。     

黄连薄层鉴别研究

目的优化药典已有标准,新建薄层鉴别方法,更加全面有效地控制黄连药材的质量。方法以硅胶G板为薄层板,盐酸小檗碱为对照品,乙酸丁酯-甲醇-异丙醇-水=5∶3∶1.5∶0.6为展开剂进行展开,紫外灯365 nm下观测,对其进行方法学考察,并对不同品种黄连、黄连混淆品进行鉴别。结果新建方法可快速鉴别出黄连中6种生物碱成分,斑点在不同薄层板、不同温度、不同湿度及微调的展开剂下均清晰可见,具有较好的耐用性,同时使用该方法还可区分黄连不同品种、不同混淆品等。结论新建方法与现有药典方法相比,展开剂使用种类少、毒性小,展开斑点多,可用于黄连药材的快速检测。     

基于网络药理学和分子对接法探寻黄连解毒汤治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)活性化合物的研究

目的:基于网络药理学和分子对接技术,探寻黄连解毒汤治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的物质基础和作用机制。方法:利用TCMSP和Stitch及文献资料的检索,得到黄连解毒汤的化学成分和作用靶点。通过Cytoscape 3.3.0构建化合物-靶点网络图,Cludterirofiler对药物与疾病相同靶蛋白进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。使用Autodock Vina软件进行分子对接,根据结合能和药物主要成分选择最佳的结合靶点。结果:研究共筛选出66个化合物和相应靶点239个,关键化合物主要有槲皮素、豆甾醇、山柰酚、汉黄芩素、谷甾醇、黄芩素、甲基黄连碱等,靶点涉及PTGS1、PTGS2、HSP90AA1、PRKACA、SCN5A等。GO功能富集分析生物过程主要集中于氧化应激、脂多糖、细菌的反应和凋亡信号通路的调节等。KEGG通路富集筛选信号通路(P<0.05),涉及糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、疱疹病毒感染、IL-17信号通路、TNF信号通路和甲型流感等。分子对接结果显示小檗碱、槲皮素、黄连碱、黄芩素主要化合物与SARS-CoV-2 3CL水解酶的结合能均高于参照药物的亲和力。结论:黄连解毒汤中的活性化合物能通过与新型冠状病毒3CL水解酶结合作用于PTGS2、HSP90AA1、ESR1等靶点调节,从而有可能对COVID-19有治疗作用。     

评价消风散合黄连解毒汤治疗湿疹效果及价值

目的:探讨评价消风散合黄连解毒汤治疗湿疹效果及价值。方法:选择2017年5—12月治疗湿疹的患者54例作为对象,随机数字表分为对照组(27例)和观察组(27例)。对照组给予常规盐酸西替利嗪片治疗的方法,观察组采用消风散合黄连解毒汤治疗,15 d后对两组治疗方法的患者血清白细胞介素(Interleukin,IL)-4、γ-干扰素(γ-Interferon,IFN-γ)水平和临床治疗效果进行评估,比较两组湿疹患者体内的血清IL-4、IFN-γ含量以及患者治愈、显效、好转、无效以及总有效率的情况。结果:治疗前后两组患者IL-4、IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05)。经15 d治疗后,观察组血清IL-4、IFN-γ水平相较于对照组有明显改善,差异有统计学意义(P<0.05),观察组患者总有效率高于对照组,临床治疗效果显著优于对照组(P<0.05)。结论:将消风散合黄连解毒汤治疗用于湿疹,相较于盐酸西替利嗪片治疗,患者血清水平更佳,临床疗效更好,值得推广应用。     

“黄连-半夏”药对治疗胃癌的网络药理学研究和实验验证

基于系统药理学采用数据挖掘和分子对接的方法分析黄连-半夏药对治疗胃癌的作用机制。通过中药系统药理学数据库平台(TCMSP)和中国科学院上海有机化学研究所化学专业数据库进行数据挖掘获得黄连-半夏药对的化学组分;然后通过ADME筛选得到其有效成分;采用化学计量学方法对有效成分进行靶点预测,并使用分子对接和结合自由能分析对靶点进行验证和筛选,从而获得黄连-半夏药对治疗胃癌的作用靶点;进一步分析靶点对应的生物功能、疾病及相关的信号通路,进而阐述黄连-半夏药对治疗胃癌的多成分、多靶点、多通路作用机制;最终通过MTT试验、划痕试验、Transwell小室试验和Western blot试验验证黄连-半夏对人胃癌细胞MKN-45的抑制作用。研究共筛选出黄连-半夏药对的有效成分46个,对应靶点77个,与胃癌及其并发症相关靶点共38个,相关信号通路前8条,GO分析相关度前20个靶点分子功能。细胞实验证实了黄连-半夏水提物能有效抑制MKN-45细胞的增殖、侵袭迁移,并抑制转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的Wnt/β-catenin信号通路的激活。黄连-半夏药对具有多种有效成分,能够调控神经和精神系统、细胞周期、细胞分化和转移,增强抗炎和免疫功能,在胃癌及其相关并发症发挥着多成分、多靶点、多通路协同抗癌作用,为后续临床治疗胃癌提供新的思路。     

黄连解毒汤对Aβ1-42诱导AD大鼠学习记忆能力及胆碱能系统的影响

目的 探讨黄连解毒汤对β-淀粉样蛋白（Aβ）_1-42诱导阿尔茨海默病（AD）模型大鼠学习记忆能力和胆碱能系统的影响。方法 选用60只雄性SD大鼠，分为正常组，模型组，石杉碱甲组（2.1×10^-5 g·kg^-1），黄连解毒汤高、中、低剂量组（6，3，1.5 g·kg^-1）。运用Aβ_1-42海马注射复制AD大鼠模型，术后连续灌胃治疗4周，进行Morris水迷宫实验。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠海马病理改变，腹主动脉取血，酶联免疫吸附测定（ELISA）检测大鼠血清、海马中乙酰胆碱（ACh），乙酰胆碱酯酶（AchE），胆碱乙酰转移酶（ChAT）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChR）蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测海马α7nAChR mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组动物脑组织皮质区神经元坏死、海马区锥体细胞或颗粒细胞坏死、排列紊乱和炎性细胞浸润等病理改变明显，大鼠逃避潜伏期延长、逃逸平台次数降低、有效区域停留时间、有效区域游泳路径均减少（P<0.05，P<0.01），血清中ACh，ChAT浓度降低（P<0.01），海马中ACh，AchE，ChAT含量，α7nAChR蛋白，α7nAChR mRNA表达降低（P<0.01）；与模型组比较，黄连解毒汤中剂量组逃避潜伏期变短（P<0.05），逃逸平台次数、有效区域游泳路径、有效区域停留时间增加（P<0.05，P<0.01），血清ACh，ChAT含量和海马AchE，ChAT，α7nAChR mRNA表达上升（P<0.05），海马α7nAChR蛋白表达升高明显（P<0.01）；高剂量组有效区域有效区域停留时间延长（P<0.01）；逃逸平台次数增加，血清ACh，ChAT含量和海马ACh，AchE，α7nAChR蛋白，α7nAChR mRNA表达上升（P<0.05）。结论 黄连解毒汤可显著改善Aβ_1-42诱导AD大鼠学习记忆能力，其作用机制可能与改善Aβ_1-42所导致的胆碱能系统损伤，增强胆碱能系统功能有关。     

黄连化学成分及药理作用研究进展

黄连是毛茛科多年生草本植物,其化学成分主要包括生物碱类、木脂素类、黄酮类、酸性成分等。黄连味极苦、性寒,具有清热燥湿,泻火解毒之功,常用于治疗泄泻痢疾、消渴、痈疮肿毒等。随着现代研究的深入,黄连新的药效相继被发现,其临床用途日益广泛,对多种疾病的治疗均有很大价值,可通过不同的途径和作用靶点起到保护心脑血管、抗肿瘤、降血糖、抗病原微生物、抗炎以及改善消化系统等药理作用。笔者将对近年来黄连的的化学成分、药理作用方面的研究进展予以综述,为其进一步的开发利用提供参考。     

黄连解毒汤联合抗生素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抑菌效果研究

目的?观察中药复方黄连解毒汤及其联合抗生素对临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的体外抑菌效果。方法?采用微量肉汤稀释法检测中药复方黄连解毒汤对15株临床分离MRSA的最低抑菌浓度（MIC），观察其体外抑菌效果；同时采用棋盘法检测中药复方黄连解毒汤联合临床常见4种抗生素（苯唑西林、庆大霉素、左氧氟沙星、克林霉素）对MRSA的MIC。结果?15株临床分离MRSA中，全部对苯唑西林耐药，11株对庆大霉素耐药，12株对左氧氟沙星耐药，11株对克林霉素耐药；单独使用中药复方黄连解毒汤时对15株临床分离MRSA的MIC范围为4.69~37.5 mg/mL；黄连解毒汤联合抗生素实验中，黄连解毒汤联合苯唑西林后对15株耐苯唑西林的MRSA有显著的抑菌效果，其中11株为协同作用，4株为相加作用；联合庆大霉素后对11株耐庆大霉素的MRSA有3株协同、6株相加、2株无关；联合左氧氟沙星后对12株耐左氧氟沙星的MRSA有1株协同、11株相加；联合克林霉素后对11株耐克林霉素的MRSA有9株协同、1株无关、1株拮抗。结论?中药复方黄连解毒汤对MRSA有明显的抑菌效果；黄连解毒汤联合临床常用4种抗生素具有显著的协同抑菌效果，根据部分抑菌浓度值判断其联合抑菌效果依次为：苯唑西林、左氧氟沙星、庆大霉素、克林霉素。     

黄连温胆汤治疗幽门螺杆菌相关性胃炎临床观察

目的观察黄连温胆汤治疗幽门螺杆菌相关性胃炎Hp根除的临床疗效。方法选择接收的Hp感染慢性浅表性胃炎患者82例,纳入时间为2017年2月—2018年7月,采用随机数字表法将其分为实验组与对照组,每组均41例。对照组采用西药四联治疗,试验组行黄连温胆汤与四联联合治疗,对比2组患者症状积分、不良反应及Hp根除率。结果试验组胃脘胀痛、腹胀满、口苦、恶心呕吐、胃脘灼热、尿黄、口臭等症状积分均低于对照组,差异明显(P 0. 05)。2组患者便秘、腹泻、皮疹等不良反应发生率(9. 76%、7. 32%)未见明显差异(P 0. 05)。试验组Hp根除率(87. 80%)明显高于对照组(65. 85%),差异有统计学意义(P 0. 05)。结论幽门螺杆菌感染所致慢性浅表性胃炎患者采用黄连温胆汤治疗效果显著,其安全性水平较高,应予以临床推广。     

黄连紫草油纱条治疗糖尿病足早期溃疡的效果观察

目的探讨黄连紫草油纱条治疗糖尿病足早期溃疡的临床效果。方法选取2017年6月—2018年6月本院收治的糖尿病足患者64例,随机分为治疗组32例(黄连紫草油纱条)与对照组32例(碘伏消毒配合康复新液)。比较2组治疗效果及血清血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维生长因子(b FGF)的含量。结果治疗组、对照组总有效率分别为96. 87%、84. 37%,差异有统计学意义(P 0. 05)。干预后,2组VEGF、bFGF含量均有升高,且治疗组VEGF、bFGF含量显著高于对照组(P 0. 05)。结论黄连紫草油纱条治疗糖尿病足早期溃疡效果显著。