青钱柳多糖对H4IIE肝细胞胰岛素信号传递的影响

目的：观察青钱柳多糖对肝细胞胰岛素信号传导通路关键靶点基因、蛋白表达的影响。方法：以H4IIE大鼠肝细胞为模型,培养72h后,采用Neutral Red法检测青钱柳多糖（50、100、200、400μg·mL^-1）对细胞活性的影响;根据细胞活性检测结果分为正常对照组（Control组）、胰岛素组（Insulin组）、青钱柳多糖低剂量组（LCP组）和高剂量组（HCP组）;药物干预2h后RT-PCR检测肝细胞相应基因表达,药物干预30min后,利用Western blot法检测肝细胞相应蛋白磷酸化水平。结果：与Control组比较,100、200、400μg·mL^-1青钱柳多糖干预后肝细胞活性显著升高（P<0.01）;干预2h 后,LCP组InsR、IRS-2基因表达显著升高（P<0.05）,Insulin组和HCP组InsR、IRS-2基因表达极显著升高（P<0.01）;干预30min后,Insulin组、HCP组InsR β、IRS-2、Akt蛋白磷酸化水平显著升高（P<0.01）。结论：青钱柳多糖具有增加肝细胞活性作用,其上调肝细胞胰岛素信号通路关键靶点InsR、IRS-2基因表达,以及InsR β、IRS-2、Akt蛋白磷酸化水平可能是其发挥降糖作用的机制。     

绿茶与4种乔木型别样茶抗氧化活性比较研究

目的：比较绿茶与4 种乔木型别样茶的抗氧化活性。方法：通过清除二苯代苦味酰基（DPPH）法、铁离子还原测定（FRAP）法、亚铁离子螯合（FIC）法、β胡萝卜素-亚油酸4 种体外抗氧化活性测定方法,综合考察绿茶和老鹰茶、大叶苦丁茶、石崖茶、青钱柳茶4 种乔木型别样茶水提物的抗氧化活性,同时用Folin-Ciocalteus 法测定4 种别样茶的总多酚含量。结果：石崖茶具有卓越的抗氧化能力,其螯合亚铁离子能力和还原铁离子能力均优于绿茶;老鹰茶、大叶苦丁茶具有良好的抗氧化活性,大叶苦丁茶还原铁离子能力优于绿茶,老鹰茶和大叶苦丁茶清除自由基（DPPH）能力比绿茶稍低,但高于人工合成抗氧化剂二丁基羟基甲苯（BHT）;青钱柳茶抗氧化活性最低。结论：石崖茶、老鹰茶、大叶苦丁茶均具有较高的开发利用价值,值得深入研究和大力推广。     

青钱柳等几种别样茶中咖啡因、可可碱和茶碱的检测

目的：对青钱柳甜茶等几种别样茶中咖啡因、可可碱和茶碱进行检测,为别样茶的合理应用奠定基础。方法：采用超快速液相色谱法（RSLC）,AcclaimPA2色谱柱（150mm×2．1mm,2．2μm）,乙腈-水梯度洗脱;流速：0．5mL·min-1;检测波长：273nm,柱温：30℃。结果：除加入绿茶的商品中检测到适量的咖啡因外,青钱柳神茶、黄芩茶、多穗柯甜茶、悬钩子属甜茶,以及甜叶菊叶和湖北海棠叶中均未检测出上述3种生物碱。结论：相对于绿茶中含有较高含量的咖啡因、可可碱和茶碱,别样茶中未检出上述3种成分,为别样茶的科学应用提供指导。     

青钱柳种子无菌萌发研究

目的 探讨不同处理方式对青钱柳种子无菌萌发的影响.方法 浓硫酸对种子进行预处理后,采用正交设计对影响其萌发的GA3浓度、浸种温度和浸种时间进行研究,再将外植体进行消毒,接种于不同激素组合的MS培养基中进行无菌培养.结果 青钱柳种子萌发的最佳处理为:浓硫酸酸蚀9.5h+1000mg/L的GA3溶液+浸种24h+浸种温度35℃;种子萌发的最优激素组合为:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+ GA3 30 mg/L;对青钱柳幼苗进行离体培养,液体培养基比固体培养基更有利于青钱柳的离体培养.结论 对青钱柳种子进行了综合处理再进行无菌培养,可以提高青钱柳种子的发芽率.     

基于HPLC-Q-TOF-MS/MS和HPLC-DAD的青钱柳叶化学成分的鉴定分析

摘要：目的:基于HPLC-Q-TOF-MS/MS和HPLC-DAD鉴定青钱柳叶中的化学成分,并测定其中5种化学成分的含量。方法:色谱柱为Inertsil ODS-3（4.6 mm×250 mm, 5μm）,以乙腈-0.1%磷酸为流动相梯度洗脱,柱温：30℃;Q-TOF-MS在负离子模式下采集数据,定量模式下检测波长为254 nm。结果:采用HPLC-Q-TOF-MS法鉴定了青钱柳叶中的18种化学成分,其中黄酮类9种、有机酸类7种、其他2种。针对异槲皮苷、金丝桃苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、阿福豆苷、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷5种化学成分建立的HPLC-DAD测定方法,各成分的线性关系良好（r>0.999 9）,精密度、重复性和稳定性良好,回收率在92.93%～103.67%,RSD均小于3.0%（n=6）。29批青钱柳叶样品各成分含量具有一定差异,其中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷在不同产地间的含量差异具有统计学意义（P<0.05）,金丝桃苷在野生与栽培品中差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:本文建立的方法可用于青钱柳叶的质量评价,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和金丝桃苷可作为成分指标进一步系统研究。     

青钱柳多糖对糖尿病小鼠血糖水平和胰腺组织形态的影响

目的:研究青钱柳多糖(CP)对正常及糖尿病小鼠降血糖的作用及胰岛组织形态的影响.方法:通过尾静脉注射四氧嘧啶建立小鼠糖尿病模型,分别以300,450,600 mg/kg青钱柳多糖灌胃给药,连续14 d后,测定空腹12 h血糖,并观察各组小鼠胰脏组织结构.结果:CP不影响正常小鼠血糖,可降低糖尿病小鼠血糖(P<0.05)并对胰岛组织损伤有一定的保护作用.结论:青钱柳多糖具有降血糖作用并对胰岛组织有一定的保护作用.     

青钱柳三萜酸对高糖所致的胰岛α细胞胰岛素抵抗的影响

为探究青钱柳三萜酸(TAE)对胰岛素抵抗胰岛α细胞胰高血糖素分泌的影响及其可能的干预机制,采用长期高糖诱导小鼠胰高糖素瘤细胞株(αTC1-6)建立胰岛α细胞胰岛素抵抗细胞模型。实验分组为:正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),模型组(25 mmol/L葡萄糖),青钱柳三萜酸组(TAE,1、5、10 μg/mL),TAE+PI3K抑制剂渥曼青霉素组(10 μg/mL TAE+10 nmol/L wortmannin)。给药后收集上清液,裂解细胞。采用ELISA试剂盒检测αTC1-6细胞上清液的胰高血糖素含量,qPCR和Western blot检测细胞裂解液中的胰岛素受体-1(IRS-1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)及其胰岛素信号通路中下游蛋白激B(Akt)的mRNA和蛋白表达水平。结果显示,TAE可以浓度依赖性降低高糖诱导的αTC1-6细胞的胰高血糖素分泌量,并可增加胞内IRS-1、PI3K和Akt的基因表达和磷酸化水平,而给予渥曼青霉素后能够逆转其作用。研究表明,TAE对高糖所致的胰岛α细胞胰岛素抵抗具有一定的改善作用,并可能与激活IRS/PI3K/Akt信号通路有关。     

青钱柳降血糖功能因子研究概况

为进一步开发利用青钱柳这一我国独有的植物资源,对其降血糖功能因子青钱柳多糖、青钱柳黄酮及其所含微量元素的研究进展情况进行综述。以期为青钱柳的深入系统研究提供参考依据。