染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制

本研究拟探讨染料木黄酮对前列腺癌细胞LNCaP和CWR22RV1的增殖、迁移和侵袭能力的影响。一、材料与方法1.材料:前列腺癌细胞株LNCaP和CWR22RV1(中国科学院上海生命科学研究院);Genistein(天津科瑞泰科技有限公司);RPMI 1640、胎牛血清(FBS)、胰蛋白酶(美国Gibco公司);E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin,Abcam公司);聚氰基丙烯酸正丁酯(BCA)试剂盒、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)上样缓冲液(×5)及蛋白质印迹法(Western blot)试剂盒(上海市碧云天生物公司);2.实验方法:采用噻唑蓝(MTT)实验、划痕实验和Transwell实验检测Genistein对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。采用Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、CD44和Oct-4的表达水平。     

今天,你吃钙片了吗

午饭时,咽了一片钙片、一粒维生素D胶丸,用美味的饭菜送进去,假装自己吃的不是药,而是米粒和蔬菜纤维。吃药不是一件开心的事情,对医生来说也是如此,好像人生从此不再自由,期待用法越简单越好,一直等到习惯成自然。吃钙片最好在餐中或者餐后,这样吸收会比较好,因为食物会刺激胃酸的分泌,有利于钙的吸收。中午吃,下午还会喝很多水,还有很多活动,胃肠道的蠕动和血液的流动都比较欢快,可以避免钙质沉积在不适当的地方,比如胆囊和肾脏。     

第553例 重度贫血—反复上腹痛—全身骨痛—爆发痛—皮肤痛觉过敏

本文报道1例青少年女性患者, 重度贫血, 诊断纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)3年, 糖皮质激素及环孢素治疗有效, 但因消化道不良反应多次减量或停药, 贫血反复复发。环孢素加量后1个月出现全身多发骨痛, 伴夜间爆发痛、皮肤痛觉过敏, 非甾体类抗炎药、阿片类止痛药均无效, 诊断为钙调磷酸酶抑制剂相关疼痛综合征, 停用钙调磷酸酶抑制剂改为西罗莫司治疗PRCA后贫血纠正, 加用苯磺酸氨氯地平口服后患者疼痛快速缓解。     

DBM中BMP-2检测初步判断骨库供骨的活性

[目的]定量检测DBM小样中BMP-2含量,以初步评估骨库供体骨的骨诱导活性。[方法]深低温冷冻后的供体骨经过软组织剔除、脱脂、脱钙、干燥、粉碎等过程制成DBM样品。通过Elisa方法对36个供体DBM中BMP-2含量进行定量分析,并结合体内骨诱导实验,得出BMP-2含量与骨诱导活性的关系。[结果]不同供体DBM中BMP-2含量相差较大,最低为5.85 ng/g,最高为71.83 ng/g;体内骨诱导实验结果显示,随着BMP-2含量的增多,成骨现象越来越明显(P0.05);BMP-2含量30 ng/g以下时,成骨面积5%;BMP-2含量60 ng/g以上时,成骨面积25%。[结论] DBM样品中BMP-2的含量与供体骨诱导活性呈正性相关,提示可采用BMP-2的Elisa检测初步评估供体骨的活性。     

E-钙黏蛋白在人非小细胞肺癌细胞多西他赛耐药中的作用

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549、H1299、H358、H441多西他赛（docetaxel，DTX）耐药细胞株与上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的关系，并初步研究逆转E-cadherin的表达对NSCLC细胞多西他赛耐药性的影响。方法:应用Real-time PCR 和Western blot 方法检测上皮间质转化相关标志物E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、Snail在亲本细胞和多西他赛耐药细胞之间的表达差异；应用慢病毒载体介导构建稳定表达E-cadherin的NSCLC多西他赛耐药细胞；MTS法检测NSCLC细胞多西他赛耐药特性。结果:与A549、H1299、H358、H441四株亲本细胞相比，多西他赛耐药细胞（A549DTX，H1299DTX，H358DTX，H441DTX）形态呈长梭形，呈上皮间质转化（EMT）样改变。多西他赛耐药细胞中E-cadherin表达下调，Vimentin、N-cadherin、Snail表达上调。成功构建了过表达E-cadherin的NSCLC多西他赛耐药细胞。过表达E-cadherin细胞株细胞形态与空载对照细胞株以及亲本耐药细胞株相比呈间质上皮转化(MET)样改变。MTS结果显示四种不同E-cadherin过表达的NSCLC多西他赛耐药细胞对多西他赛的敏感性均强于其亲本耐药细胞和空载对照细胞。结论:NSCLC多西他赛耐药细胞发生EMT样改变，上调E-cadherin能增加NSCLC多西他赛耐药细胞对多西他赛的敏感性。     

转化生长因子-β_1对子宫内膜上皮细胞增殖和转分化的影响

目的探究转化生长因子-β_1(TGF-β_1)对子宫内膜组织上皮细胞数目和转分化的影响。方法收集2017年6月1日—12月1日河北工程大学附属医院手术获取的正常子宫内膜组织并分离其上皮细胞。将细胞分为正常对照组(只加培养液)和实验组(培养液和不同浓度的TGF-β_1),采用噻唑蓝染色检测活细胞的数量;用酶联免疫法检测各组细胞悬液中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)和纤黏连蛋白(FN)的分泌情况;免疫印迹法比较各组细胞胞质中的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和钙黏附蛋白-E(E-cadherin)的含量。结果经TGF-β_1作用后,子宫内膜上皮细胞增殖明显,且浓度越大,时间越长,增殖率越高;5 ng/ml TGF-β_1组细胞悬液中Col-Ⅰ和FN的分泌量显著高于正常对照组,差异有统计学意义(t=10.784、16.974,P<0.01);与正常对照组比较,实验组胞质中表达的E-cadherin含量降低,而α-SMA含量增高,且随TGF-β_1浓度增高,E-cadherin、α-SMA含量呈梯度降低/升高,差异有统计学意义(F=171.149、204.618、P<0.01)。结论 TGF-β_1能刺激子宫内膜组织上皮细胞数目增加,诱导其向肌成纤维细胞转变。