苓桂术甘汤中多糖结构组成及其抗氧化活性考察

目的:研究苓桂术甘汤中多糖的结构,包括单糖组成以及官能团检测,并对其抗氧化能力进行评估,为体外生物测定法运用于苓桂术甘汤的质量评价提供基础。方法:利用高效凝胶色谱对全方多糖分子量进行研究;进一步采用气相色谱-质谱(GC-MS)柱前衍生化法及红外光谱扫描分析全方多糖结构组成;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)及羟基自由基测定全方粗多糖及精多糖的抗氧化能力。结果:全方多糖由单一峰组成,且相对分子质量为3 689 Da,主要由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、果糖组成,摩尔比为6. 85∶1. 00∶109. 21∶1. 04∶21. 82,其中葡萄糖和果糖为主要组成成分;红外结果显示聚糖结构中存在吡喃糖及糖醛酸,并且糖苷键存在2种立体异构(α-糖苷键及β-糖苷键);抗氧化研究发现全方多糖有一定清除DPPH自由基及羟基自由基的能力,粗多糖的活性优于精多糖。进一步采用LC-Q-TOF-MS对粗多糖中的其他成分进行定性分析,提示这与甘草中五环三萜类成分的吸附有关。结论:苓桂术甘汤中多糖及五环三萜类物质均是苓桂术甘汤抗氧化作用的物质基础,利用体外生物测定法测定抗氧化活性可作为全面控制苓桂术甘汤质量的评价指标。     

阿胶酶解液相对分子质量分布及其补血升白作用

目的:研究阿胶酶解液的相对分子质量分布及其补血、升白的作用。方法:采用TSK-GEL G2000SWXL色谱柱(7.8 mm×300 mm,5μm),流动相0.1 mol·L~(-1)NaCl+0.05%NaN_3+0.1 mol·L~(-1)磷酸盐缓冲液(pH 6.7),流速0.5 m L·min~(-1),检测波长280 nm,对阿胶原液、阿胶仿生酶解液、阿胶胰蛋白酶酶解液进行相对分子质量分布的测定;采用放血法致小鼠血虚模型及环磷酰胺致小鼠白细胞减少模型,观察阿胶酶解液的补血升白作用。结果:阿胶所含蛋白及多肽的相对分子质量6.64×10~4Da,胰蛋白酶酶解液及仿生酶解液的相对分子质量主要集中在3.7×10~3Da左右;阿胶仿生酶解液及胰蛋白酶酶解液可使血虚模型小鼠血红蛋白(Hb),红细胞计数(RBC)水平显著提高,使白细胞减少模型小鼠的白细胞计数(WBC),RBC和Hb水平显著提高。结论:阿胶经酶解后相对分子质量减小且具有显著的补血升白作用,胰蛋白酶酶解与仿生酶解效力大致相当。     

酶联免疫吸附法测定三种CTB与其受体GM1的亲和性

霍乱毒素(cholera toxin,CT)是霍乱弧菌产生的相对分子质量为84 kD的肠毒素,由1个A亚单位(CTA)和5个B亚单位(CTB)形成的五聚体共价连接而成。CTA(大约28 kD)为毒性亚单位,CTB(大约12 kD)为无毒的受体结合亚单位,可以和所有有核细胞膜上的单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)结合。CTA则通过CTB与GM1的结合作用得以进入细胞发挥其毒性级联反应[1,2]。目前,CTB已作为载体蛋白广泛用于基础研究。本文采用ELISA法测定了两种国产CTB与其受体GM1之间的亲和性,并与国际标准品CTB进行了比较。材料与方法1材料GM1为Sigma公司产品。羊…     

琵琶甲多糖的提取分离、结构表征及生物活性研究

目的 研究昆虫琵琶甲多糖的结构表征及生物活性。方法 采用水提醇沉和分级沉淀法制备得琵琶甲粗多糖组分BP50、BP75和BP90,并用葡聚糖凝胶G-75进一步分离纯化BP90得琵琶甲多糖组分BP90-Ⅱ。用苯酚-硫酸法、BCA法、HPLC、凝胶渗透色谱联用多角度激光光散射和示差检测器、红外光谱法分析表征多糖结构特征;测定各组分清除DPPH、ABTS和OH自由基的能力来评估抗氧化活性;此外,采用脂多糖诱导的BV-2小胶质细胞初步研究琵琶甲多糖的抗炎活性。结果 多糖组分BP90的抗氧化能力最强。BP90-Ⅱ的总糖、蛋白质含量分别为82.13%和11.28%。BP90-Ⅱ的红外光谱呈现多糖的典型特征吸收峰,重均分子质量为56 200 g·mol^–1。BP90-Ⅱ是由甘露糖、鼠李糖、氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和岩藻糖10种单糖组成的杂多糖,其中葡萄糖含量最高,达74.85%。结果显示琵琶甲多糖BP90-Ⅱ对脂多糖诱导产生的NO有一定的抑制作用,当BP90-Ⅱ浓度为10 μg·mL^–1和100 μg·mL^–1时,NO抑制率分别为(14.86±1.63)%、(36.43±5.62)%。结论 琵琶甲多糖具有良好的抗氧化能力和一定的抗炎活性,具有一定的药用和食用开发价值。     

HPMEC-ELSD法检测注射用丹参多酚酸中大分子物质

目的 建立注射用丹参多酚酸（SAFI）中大分子物质（相对分子质量≥1.0×10⁴）的高效分子排阻色谱-蒸发光散射（HPMEC-ELSD）检测方法。方法 采用超滤离心方法（截留相对分子质量为3 000,转速为4 000 r·min^-1）对供试品溶液中的大分子物质进行分离富集。色谱条件为：检测器ELSD,Ultrahydrogel 500与Ultrahydrogel 250色谱柱串联,流动相0.02%甲酸水溶液,流动相体积流量0.6 mL·min^-1,柱温35℃,进样量10 μL,压缩空气体积流量2.5 L·min^-1,漂移管温度105℃,不分离模式,增益1。结果 该方法空白无干扰,专属性良好;精密度、重复性、加样回收率均良好;右旋糖酐在相对分子质量2 700～36 800线性良好,回归方程为Y＝－0.220 5 X＋10.247 0（R²＝0.994 5）;对照品溶液和供试品溶液50 h稳定性良好;不同流动相、流动相体积流量、柱温、压缩空气体积流量、漂移管温度等的耐用性良好。17批SAFI均未检出大分子物质。结论 建立的HPMEC-ELSD方法简便、快捷,可用于SAFI中大分子物质的检测。     

论文撰写规范

<正>1时间单位:采用d、h、min、s而不用天、小时、分钟、秒。2关于分子量、原子量名称和符号。我国法定单位将"原子量"改为"相对原子质量"(符号为Ar),"分子量"改为"相对分子质量"(符号为Mr),不再用Dalton(D,道尔顿)或u,如分     

关于计量单位等表示方法的说明

<正>根据有关规定,我们对来稿中有关计量、浓度等表示方法有统一要求,望作者参照执行。1时间表达:正文中时间的表达,凡前面带有具体数据者应采用d、h、min、s,而不用天、小时、分钟、秒。例:3d、19h、20min、5s,不用3天、19小时、20分钟、5秒。2人体及动物内压力测定的计量单位:根据国家质量技术监督局和卫生部联合发出的质技监局量函[1998]126号文件《关于血压计量单位使用规定的补充通知》,凡是涉及人体及动物体内的压力测定,可以使用毫米     

计量单位须知

本刊实行国务院1984年2月颁布的《中华人民共和国法定计量单位》,并以单位符号表示,注意单位名称与单位符号不可混合使用,如ng·kg-1·天-1应改为ng·kg-1·d-1;组合单位符号中表示相除的斜线多于1条时应用负数幂的形式表示,如ng/kg/min应采用ng·kg-1·min-1的形式;组合单位中斜线的负数幂亦不可混用,如前例不宜采用ng/kg·min-1的形式。在叙述中,应先列出法定计量单位数值,括号内写旧制单位数值;但如同一计量单位反复出现,可在首次出现时注出法定计量单位与旧制单位的换算系数,然后只列法定计量单位数值。人体血药浓度测定,同人体其他检测值一样以升(L)为基     

肺炎链球菌不同菌株自溶酶基因的克隆、序列分析及重组表达

目的克隆肺炎链球菌自溶酶(LytA)的基因序列，并进行重组表达。方法分别提取不同临床分离株的基因组DNA，根据已知肺炎链球菌野生R6株LytA基因序列设计引物，进行PCR扩增，将获得的目的基因片段克隆人原核表达质粒，然后测序；利用生物信息学方法，对不同临床分离株LytA基因序列进行比较分析，同时进行LytA基因的重组表达。结果从不同临床分离株的基因组中均扩增出完整的LytA基因片段，成功构建了重组质粒pGEX-4T-1-LytA。比较不同临床分离株LytA基因的DNA序列及推测的氨基酸序列，发现各株LytA基因序列及氨基酸序列间存在差异。通过异丙基巯基半乳糖(IPTG)诱导，LytA基因在大肠埃希菌JM109中得到高效表达，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示pGEX-4T-1-LytA融合蛋白相对分子质量约62000，与理论预测一致。结论序列分析发现各分离株的LytA基因序列及氨基酸序列间存在差异，但同源性极高，推测LytA基因序列保守，可用于疫苗研发。     

中药多糖相对分子质量测定方法的概述

目的:目前中药多糖药理活性的研究比较活跃,关于多糖相对分子质量测定方法的文献研究较少。综述中药多糖相对分子质量的测定方法,简要的归纳分析其优缺点并进行对比,筛选出较为简便实用的多糖相对分子质量测定方法,为中药多糖相对分子质量的测定以及中药多糖的药理活性进一步研究提供理论基础。方法:查阅国内近些年关于中药多糖相对分子质量测定的大量文献,对中药多糖相对分子质量的测定方法进行分析归纳。结果:测定多糖相对分子质量的方法主要有黏度法、超离心法、光散射法、渗透压法、凝胶色谱法、高效凝胶色谱法以及联用法等,其中近些年最常用的是高效凝胶渗透色谱法。结论:该方法操作简单、快速、灵敏、重复性好和样品用量少,可作为测定多糖相对分子质量及分子分布的首选方法。