水蛭及其制剂在心脑血管疾病中的应用

本文以"水蛭"为关键词,在古今医案云平台进行检索,共获取3 033条医案,系统分析了水蛭治法与临床主要适应证,同时基于已有批准文号制剂,归纳相关制剂的临床应用现状。结果发现,水蛭在传统医案或现代中成药中临床疗效的发挥大多均基于其活血、化瘀、通络功效,在心脑血管疾病治疗中有着至关重要的作用。     

水蛭分子鉴定方法的研究进展

水蛭基原复杂、市场混乱、传统方法难以有效鉴别,临床用药的安全性无法保障。分子鉴定方法根据生物间的分子特征差异进行鉴定,不受自然环境、生长发育阶段等外部因素影响,具有快速、准确、客观的特点。目前应用于水蛭的分子鉴定方法有:基于核酸的RAPD技术、SSR技术、DNA条形码技术和基于蛋白质的SDS-PAGE技术、同工酶分析技术,本文在简述水蛭不同分子鉴定方法研究进展的基础上,对水蛭不同分子鉴定方法的技术和应用特点进行比较,最后对DNA宏条形码技术、Target-sequencing技术、电化学传感检测技术在水蛭混合物,特别是中成药中水蛭成分的鉴定进行展望,旨在为水蛭鉴定方法的深入研究提供参考和借鉴。     

水蛭(蚂蝗)滑石粉烫制品抗凝血酶活性标准研究

目的:建立水蛭(蚂蝗)滑石粉烫制品抗凝血酶活性标准。方法:采用滴定法测定不同批次的水蛭滑石粉烫制品抗凝血酶活性。结果:水蛭滑石粉烫制品抗凝血酶活性线性关系良好,其中y=1.027,54x+0.013,3,R=0.997,8,稳定性和重复性RSD均小于2.5%,测定的12批水蛭滑石粉烫制品含量测定标准在2.28～4.68 U/μL。结论:该方法工艺简单、操作方便;凝血酶滴定法简单且准确,可用于滑石粉烫水蛭的质量控制。     

水蛭真伪鉴定和质量评价方法研究进展

目的 通过进一步完善水蛭的真伪鉴别与质量评价方法,为保障水蛭临床用药安全有效提供参考。方法 以“水蛭”、“鉴定”、“鉴别”以及“质量评价”等为关键字,在中国知网、维普网、万方数据、PubMed、Science Direct、Web of science等数据库中查询2000年1月—2022年8月发表的相关研究论文,并以“真伪鉴定”和“质量评价”为主旨进行文献综述。结果 水蛭真伪鉴别方法包括性状鉴别、理化鉴别、分子鉴别、蛋白质电泳鉴别和毛细管电泳鉴别等多种方法,其中分子鉴别和蛋白质电泳鉴别两种方法客观性强、准确性高,应用广泛;而质量评价方法较为丰富,包括抗凝血酶评价法、高效液相色谱法、蛋白质电泳法、红外光谱分析法、气相色谱质谱联用技术、指纹图谱技术等。结论 分子鉴别是水蛭目前最准确的鉴别方法,在中药材及中成药中均可适用;由于药效物质并不十分明确,因此以抗凝血酶评价法的生物评价技术和宏观评价的指纹图谱技术在质量评价中更具优势。     

水蛭素通过上调VEGF/Notch1信号通路促进人骨髓间充质干细胞成骨分化

摘要：目的 观察水蛭素对人骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC）成骨分化的影响。方法 BMSCs细胞分为正常培养的对照组、成骨诱导的诱导组以及加入不同浓度（1、10、20 ATU/mL）处理的水蛭素组。MTT检测细胞增值并筛选水蛭素最适作用浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡。RT-PCR和Western blot分别检测成骨基因Runx2、Osterix、COL1A1的mRNA和蛋白表达。BCIP/NBT染色法检测细胞中的碱性磷酸酶水平。茜素红染色检测矿化结节。检测VEGF、Notch1、Jagged1和CBF1的mRNA和蛋白表达。结果 骨髓间充质干细胞经成骨诱导细胞增殖显著增加,中高浓度的水蛭素可以不同程度促进成骨诱导的BMSCs细胞增殖（P＜0.05）,并筛选出20 ATU/mL作为水蛭素的使用浓度。水蛭素抑制成骨诱导的BMSCs细胞凋亡,上调Runx2、Osterix、COL1A1的mRNA和蛋白表达,增加碱性磷酸酶水平,促进细胞中矿化结节的生成,并提升BMSCs细胞中VEGF、Notch1、Jagged1和CBF1的表达（P＜0.05）。结论 水蛭素可能通过上调VEGF/Notch1信号通路促进人骨髓间充质干细胞成骨分化。     

应用环节动物抗原进行日本血吸虫病免疫诊断

目的 通过制备水蛭可溶性抗原，找到与日本血吸虫的共同抗原成分，从而应用水蛭动物抗原进行日本血吸虫病的免疫诊断。方法 ①冻存虫体研磨，考马斯亮蓝染色测定蛋白浓度；②SDS-聚丙酰胺凝胶电泳分析蛋白成分；③WESTERN印迹法和间接ELISA试验观察抗原抗体反应。结果 水蛭动物蛋白至少含有20种以上的蛋白组分，其中有8种组分含量较高；水蛭蛋白同血吸虫患者的血清反映明显，其敏感度和特异性较高。结论 水蛭与日本血吸虫具有相同的抗原成分，以此用于日本血吸虫病的免疫学诊断。     

张锡纯妇科用药特色浅析

张锡纯治疗妇科疾病善将妇女生理、病理特点及药性特点相结合,重视气血,以调冲任为中心。总结了其善用鸡内金化瘀消癥通经,水蛭活血逐瘀,龙骨、牡蛎固崩摄血以调冲任等用药经验。     

水蛭地龙提取液治疗急性脑梗死的作用机制及疗效

目的探讨水蛭地龙提取液(extractliquorfromhirudoandearthworm,ELHE)治疗急性脑梗死的作用机制及疗效。方法78例急性脑梗死患者被随机分为2组:对照组38例,进行基础治疗;治疗组40例,在基础治疗的同时静脉给予ELHE(20ml+等渗盐水250ml,静脉滴注,1次/d,连续2周)。观察2组脑梗死患者治疗前、后神经功能评分、Barthel指数及活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆凝血酶原时间(PT)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)、纤溶酶原激活物的抑制剂(PAI1),以及血栓烷B2(TXB2)、6酮前列腺素(6KetoPG)Flα的变化。结果ELHE组患者经过14d治疗,其神经功能缺失评分由9.4±4.0下降为3.3±1.2,Barthel指数由25.9±4.6升高为67.4±2.8,APTT、PT分别由(28.2±3.8)s、(12.2±3.5)s延长为(42.0±5.2)s、(19.5±2.1)s,血浆tPA含量及活性分别由(10.1±1.2)μg/L、(0.27±0.03)KIU/L升高为(15.3±2.1)μg/L、(0.57±0.12)KIU/L,血浆PAI1含量及活性由(47.8±4.6)μg/L和(0.77±0.12)KAU/L下降为(44.2±3.0)μg/L和(0.68±0.11)KAU/L,血栓烷B2由(228.4±48.9)ng/L降低为(152.7±44.4)ng/L,6KetoPGF1a由(21.9±6.3)ng/L升高为(33.8±6.4)ng/L,与对照组比较差异均有显著意义(P<0.05)。结论ELHE具有明显抗凝、促纤溶、抑制血小板聚集,改善血液循     

水蛭素对肾病综合征患者凝血酶激活的纤溶抑制物的影响及疗效观察

目的探讨水蛭素对肾病综合征患者凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)的影响及疗效观察。方法确诊肾病综合征的患者53例,随机分为两组,常规组23例:应用标准剂量的激素[强的松,1 mg/(kg·d)]治疗;水蛭素组30例:标准激素治疗+水蛭素(0.5g/次,tid)抗凝治疗,两组均治疗4周。测定治疗前后TAFI、凝血指标、24 h尿蛋白定量、血生化指标。选取健康体检者20例为对照组测定TAFI浓度。结果常规组、水蛭素组治疗前与对照组比较,TAFI浓度均高,具有统计学意义(P<0.05)。常规组、水蛭素组治疗后与同组治疗前比较,血浆TAFI、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FIB)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、24 h尿蛋白定量均下降,白蛋白(ALB)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)均升高,均有统计学意义(P<0.05)。常规组与水蛭素组治疗后两组间比较,水蛭素组以上指标改变更明显,另外,抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)活性明显升高,活化部分凝血活酶时间(APTT)显著延长,具有统计学意义(P<0.05)。结论水蛭素可显著改善肾病综合征患者的高凝状态,改善纤溶系统的功能,促进肾病综合征的缓解并改善其预后。