构树总黄酮诱导HepG2细胞凋亡及其机理研究

目的:探讨构树总黄酮诱导HepG2细胞凋亡的机理。方法:采用流式细胞术观察构树总黄酮对HepG2细胞周期、细胞内活性氧(ROS)水平的影响,用qRT-PCR测定c-Myc,p53,bax,bcl-2和caspase-3基因mRNA表达水平的变化。结果:构树总黄酮剂量依赖性抑制HepG2细胞增殖。62.5μg/ml的构树总黄酮作用24 h,显著抑制HepG2细胞增殖,增加凋亡细胞比例,并将HepG2细胞阻滞于G1期;100μg/ml的构树总黄酮作用24 h,显著上调HepG2细胞p53、bax、caspase-3的mRNA水平,显著下调cMyc、bcl-2的mRNA水平;200μg/ml的构树总黄酮作用HepG2细胞6 h,显著增加细胞内ROS含量。结论:构树总黄酮能调节HepG2细胞c-Myc、p53、bax、bcl-2和caspase-3基因表达,并通过氧化应激,诱导HepG2细胞进入线粒体凋亡途径。     

桑白皮的混淆品-构树、柘树根皮生药学鉴定研究

目的通过对桑白皮的混淆品构树和柘树根皮的生药学研究比较,为桑白皮的鉴定提供科学的依据。并通过对混淆品构树、柘树根皮的显微鉴别性状对比,为二者后续鉴别研究提供指导意见。方法采用生药学常用鉴别方法对构树、柘树根皮的性状、显微鉴别特征进行对比研究。结果构树、柘树根皮在性状鉴别特征和显微鉴别的茎横切面、粉末特征方面具有专属性。结论对构树、拓树性状鉴别、显微鉴别的方法真实准确,鉴定结果可以作为桑白皮混淆品区分鉴定的科学依据。     

构树叶的化学成分

目的:对构树Broussonetia papyrifera(L.)Vent.叶的化学成分进行分离和鉴定。方法:采用硅胶柱层析、sephadex LH-20柱层析和重结晶等方法分离纯化,根据理化性质和光谱鉴定化合物的结构。结果:从构树叶乙酸乙酯部位分离得到11个化合物,分别为:芹菜素(apigenin,1)、大波斯菊苷(cosmosiin,2)、牡荆苷(vitexin,3)、木犀草素(luteolin,4)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside,5)、7-甲氧基香豆素(7-methoxycoumarin,6)、东莨菪素(scopoletin,7)、三十一烷醇(1-hentriacontanol,8)、槲皮素(quercetin,9)、7-甲氧基芹菜素(7-methoxyapigenin,10)、β-胡萝卜苷(daucosterol,11)。结论:化合物1~8首次从构树中分离得到。     

构树的本草考证及其药用价值

１　构树的本草考证１１　原植物构树在古籍中称“楮”,亦名毂（谷的异体字）。《山海经·西山经》：“鸟危之山其阳多磐石,其阴多檀楮。”郭璞注：“楮即毂木。”袁珂校注：“即构木。”许慎《说文》：“毂也。从木,者声。”《诗经·小雅·黄鸟》：“黄鸟黄鸟！无集于毂,无啄我粟”此处毂即构树。《诗经·小雅·鹤鸣》：“乐彼之园,爱有树檀,其下维毂。”《齐民要术》：“毂,楮也。”段成式《酉阳杂俎》：“构,楮也,田久废,必生构。”由此可见,楮即构,即今桑科植物构树Ｂｒｏｓｓｏｎｅｔｉａｐａｐｙｒｉｆｅｒａ（Ｌ．）Ｖ…     

桑白皮与伪品构树柘树的薄层层析鉴别

对桑白皮和伪品构树、柘树进行了薄层层析的比较鉴别，为桑白皮的真伪鉴别提供了依据。     

构树叶总黄酮调控Bcl-2与Bax蛋白表达及caspase-3活性诱导HepG-2细胞凋亡的研究

目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)诱导HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用体外细胞培养方法,取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后,应用MTT法检测TFBP对人肝癌细胞HepG-2生长抑制作用;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察各浓度TFBP作用细胞48 h后的细胞的形态变化;通过免疫细胞化学SP法检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;比色法检测半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性。结果:TFBP在体外对人肝癌细胞HepG-2有较强的浓度依赖性和时间依赖性抑制作用,9,12 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞72 h后,细胞增殖抑制率可分别达52.46%,64.72%,与对照组具有显著性差异(P<0.01),可诱导细胞凋亡,质量浓度9,12 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞48 h后就可出现典型的凋亡小体,TFBP可升高caspase-3活性,并具有浓度效应,同时还可下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2/Bax。结论:TFBP在体外对肝癌细胞HepG-2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。其诱导凋亡的机制可能与其下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达,下调Bcl-2/Bax以及增强caspase-3的活性有关。     

构树叶总黄酮诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制探讨

目的：研究构树叶总黄酮（total flavonoids of Broussonetia papyrifera，TFBP）诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法：采用MTT法检测浓度分别为3、6、9和12g／LTFBP作用于Hep02细胞24、48和72h后对细胞生长的影响；Hoechst33342荧光染色法观察3、6、9和12g／LTFBP作用于HepG-2细胞48h后细胞形态学的变化；免疫细胞化学检测3、6、9和12g／LTFBP作用于HepG-2细胞48h后凋亡相关基因Bcb2及Bax蛋白表达；比色法检测3、6、9和12g／LTFBP作用于HepG-2细胞48h后Caspase-3活性。结果：随着药物浓度的增大，TFBP抑制HepG-2细胞增殖的作用逐渐增强，呈剂量依赖性，在3、6、9和12g／L的TFBP作用于HepG2细胞24h后，HepG-2细胞增殖抑制率分别为7．63％、11．86％、19．02％和21．81％，F=5．16，P=0．034；48h后分别为20．20％、29．44％、39．21％和43．96％，F=11．28，P=0．003；72h后分别为27．24％、34．70％、52．46％和64．72％，F=86．78，P〈0．001。Hoechst33342荧光染色法可见，随着药物浓度的增大，细胞的生长变慢，胞质变疏松，细胞核皱缩，深染，出现典型的细胞凋亡形态。免疫细胞化学检测可见，经不同浓度TFBP处理HepG2细胞48h后，HepG-2细胞Bcl-2蛋白表达随着浓度的增加而逐渐变浅，Bax蛋白表达随着浓度的增加而逐渐变深，Bcl和Bax蛋白的阳性表达率与对照组比较差异均有统计学意义，F值分别为6．563和30．883，P值分别为0．012和0．001。比色法检测Caspase-3活性显示，对照组与3、6、9和12g／L的TFBP对Hepp2细胞作用48h后，Caspase-3酶活性分别为（1．38±2．13）、（3．58±2．21）、（4．95±3．61）、（5．25±1．41）和（5．75±2．24）U／mg，随着TFBP浓度的增加，Caspase-3酶活性显著增高，当TFBP浓度为6、9和12g／L时，各实验组与对照组比较差异有统计学意义，F=5．42，P=0．003。结论：TFBP在体外对肝癌HepG-2细胞有明显的增殖抑     

构叶总黄酮甙的提取分离与定性分析

本文报告了构叶总黄酮甙的提取分离方法。用本法提得的构叶总黄酮甙含量约为0.22％。纸层析表明总黄酮式中至少含有两种黄酮化合物。盐酸镁粉、盐酸锌粉、四氢硼钾及其它试验证明,总黄酮甙中不含二氢黄酮类和花色素类,而很可能含有黄酮类、黄酮醇类或查耳酮类化合物。     

构树总黄酮对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的 探讨构树总黄酮（total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP）对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法 用环磷酰胺复制免疫抑制模型并随机分为模型组、构树总黄酮高、中、低剂量组（200,100,50 mg·kg^-1·d^-1）,以正常小鼠为空白对照组。分别于饲喂构树总黄酮后第10天和第30天采样,检测白细胞含量、腹腔巨细胞吞噬功能、T、B淋巴细胞转化率、血清IgG含量及BSA抗体水平。结果 与模型组比较,饲喂TFBP的高、中、低剂量组小鼠的白细胞含量、腹腔巨噬细胞吞噬功能、T、B淋巴细胞转化率、BSA抗体水平和血清IgG均显著升高（P < 0.05或P < 0.01）,随着TFBP剂量的增加,上述免疫指标与空白对照组相近。结论 构树总黄酮能显著改善环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫功能。     

构树的药理与临床作用研究述略

对构树的果实、根皮、叶及乳汁的药理和临床作用进行了综述。构树原果汁具有较高的超氧化歧化酶和过氧化歧化酶活性。这说明构树果汁具有一定的抗脂质过氧化能力。