"清心通脉饮"对动脉粥样硬化兔模型相关炎症因子的影响研究

目的:观察清心通脉饮对动脉粥样硬化(AS)兔模型的治疗作用,并探索其可能的机制。方法:新西兰兔采用股动脉球囊扩张术建立AS模型,造模成功后随机分为模型组、阿托伐他汀组和清心通脉饮低、中、高剂量[3.33,6.66,13.32g/(kg·d)]组,每组10只,另取10只兔作为正常组。各组均灌胃给予相应药物或生理盐水,每日1次,连续4周。末次给药后麻醉采血,全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,酶联免疫吸附测定(Elisa)法检测血清C反应蛋白(CRP)、白介素-1(IL-1)、干扰素-β(IFN-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。取腹主动脉,苏木精-伊红染色法(HE)观察腹主动脉病理学变化,蛋白免疫印迹法(WB)检测腹主动脉组织中p38丝裂原活化蛋白酶(p38MAPK)、核转录因子kappaBp65(NF-κBp65)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、调节蛋白激酶(ERK)蛋白及磷酸化p38MAPK、NF-κBp65、JNK、ERK(p-p38MAPK、p-NF-κBp65、p-JNK、p-ERK)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组兔血脂水平和TNF-α、IL-1、CRP、IFN-β含量均显著升高(P0.01),腹主动脉p-p38MAPK、p-NF-κB、p-JNK、p-ERK蛋白表达明显升高(P0.01)。与模型组比较,清心通脉饮中、高剂量组和阿托伐他汀组血清TC、TG、LDL-C水平明显降低(P0.01,P0.05);清心通脉饮高剂量组和阿托伐他汀组HDL-C水平明显升高(P0.01,P0.05);清心通脉饮各剂量组和阿托伐他汀组TNF-α、IL-1、CRP、IFN-β含量明显降低(P0.01),腹主动脉p-p38MAPK、p-NF-κBp65、p-JNK、p-ERK蛋白表达明显降低(P0.01,P0.05)。模型组腹主动脉内膜破坏,结缔组织增生,泡沫细胞形成,纤维斑块钙化,坏死;清心通脉饮高剂量组和阿托伐他汀组动脉壁规整,平滑,未见明显脂质沉积,动脉内皮增生不明显。结论:清心通脉饮可改善动脉粥样硬化进展,其治疗动脉粥样硬化的机制可能与调节血脂代谢,下调p-p38MAPK、p-NF-κBp65、p-JNk、p-ERK蛋白表达,抑制炎症反应,降低炎症因子的表达有关。     

高压油漆注射伤新西兰兔血管神经不同时段损伤的病理变化研究

目的研究高压油漆注射伤新西兰大白兔血管神经组织病理变化及肢体血循环变化的规律,为临床治疗该类损伤提供病理学依据。方法取健康雄性新西兰大白兔,耳缘静脉麻醉后用高压油漆喷枪向新西兰大白兔的腹股沟区喷射工业用油漆,注射后8 h内每隔1 h切取新西兰大白兔的股动脉、股神经、股静脉制作切片,HE染色后分别在光学显微镜及扫描电镜下观察组织病理学变化,并肉眼观察各时点新西兰大白兔伤肢肢体血液循环情况。结果随着时间的推移,新西兰大白兔的股动脉搏动逐渐减弱消失,肢体远端毛细血管回流消失。光镜下股静脉出现静脉炎表现;股动脉内膜的连续性发生破坏,内有血栓形成;股神经的外膜连续性发生破坏,外膜周围附着有大量炎性细胞。电镜下发现血管内膜破坏,肌层细胞向血管内膜突入,纤维条索形成,神经髓鞘松弛排列紊乱,线粒体空泡形成。高压油漆喷枪注射伤后8 h,兔的股动脉、股静脉、股神经出现了不可逆性严重损伤。结论对于高压油漆注射伤这类严重的复合性损伤,应尽可能在伤后8 h内进行彻底手术清创,避免重要血管神经出现不可逆性、灾难性损伤,最大限度降低损伤程度。     

丙氨酰-谷氨酰胺双肽对缺血／再灌注肠损伤兔肠黏膜炎性反应的影响

目的：观察丙氨酰—谷氨酰胺双肽对缺血／再灌注损伤兔肠道黏膜损伤后中性粒细胞浸润及黏膜组织中炎性反应水平的影响。方法选择健康成年新西兰兔30只,按随机数字表法分为治疗组与对照组各15只。采用完全夹闭阻断肠系膜上动脉1h后再开放恢复肠系膜上动脉血流方法制作缺血／再灌注肠损伤模型后,治疗组健康成年新西兰兔肠缺血／再灌注肠损伤模型建立前2h及模型建立后2h,通过耳缘静脉分别给予丙氨酰—谷氨酰胺双肽1次,剂量为1．0 g／kg。对照组同期相同时间点分别给予等量的葡萄糖生理盐水静脉注射。缺血／再灌注模型成功后4小时,空气栓塞法处死新西兰兔。苏木素—伊红染色光镜下观察损伤肠组织的病理学变化,依据Chiu 6级评分法计算肠损伤程度评分。测量小肠黏膜组织中肿瘤坏死因子－α（TNF－α）、白介素－6（IL－6）水平变化。取肠系膜上静脉血进行中性粒细胞计数（ PMN）,测定PMN呼吸爆发的强度变化。结果缺血／再灌注损伤兔模型建立后,对照组肠道黏膜肉眼观小肠黏膜充血、肿胀,可见斑点状糜烂,部分见炎性渗出物,光镜下肠壁组织间中性粒细胞浸润,血管内皮肿胀,基底层结构不清。小肠绒毛数量减少,高度降低,形态不规则,肠上皮黏膜细胞大小不一,排列紊乱,黏膜层厚度变薄,隐窝结构不清楚,小肠腺体萎缩。观察组小肠黏膜充血、肿胀明显减轻,未见点状或片状糜乱。光镜下小肠绒毛数量未见明显减少,形态基本正常,黏膜层厚度正常及基底层结构清晰,炎性细胞浸润较少。治疗组的肠损伤程度评分为（2．15±0．93）分低于对照组的（4．98±0．85）分,治疗组TNF－α、IL－6水平明显低于对照组,PMN低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论丙氨酰—谷氨酰胺双肽能减少缺血再灌注损伤后肠黏膜中性粒细胞浸润程度,减轻中性粒细胞活化强度,保护肠黏膜屏障功能。其机制可能与降低了损伤肠壁中TNF－α与IL－6水平,抑制了肠壁氧化应激反应引起的炎性反应损伤,降低了肠壁毛细血管通透性有关。     

线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷的含量动态变化研究

目的:建立同时测定线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷含量的方法,以确定线纹香茶菜的最佳采摘期。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为0.8 ml/min,检测波长为334 nm,柱温为25℃,进样量为15μl。结果:咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷检测的质量浓度线性范围分别为0.23~5.68、0.31~7.76、0.45~11.30μg/ml(r=0.999 9、0.999 8、0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为95.1%~98.9%、97.4%~101.3%、95.5%~98.8%,RSD分别为1.8%、1.7%、1.4%(n=6)。采收于每年4-5月、7-8月的线纹香茶菜中上述3种成分含量最高。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于同时测定线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷的含量;线纹香茶菜的最佳采摘期为每年4-5月、7-8月。     

HPLC法同时测定不同来源溪黄草药材中8个水溶性成分的含量

目的:建立同时测定不同品种溪黄草中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、新西兰牡荆苷3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素-6,8-二-C-α-L-吡喃阿拉伯糖苷和芦丁含量的高效液相色谱法,并比较评价溪黄草各品种药材质量。方法:采用Phenomenex luna C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱,流速0.8 m L·min-1,检测波长334 nm;柱温为室温(25℃)。结果:咖啡酸、新西兰牡荆苷2、新西兰牡荆苷3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素-6,8-二-C-α-L-吡喃阿拉伯糖苷和芦丁线性范围分别为0.09~2.28、0.13~3.11、0.06~1.38、0.18~4.54、0.08~1.97、0.07~1.71、0.06~1.49、0.05~1.31μg;平均回收率(n=6)分别为99.7%、99.5%、100.1%、99.0%、98.4%、98.4%、101.8%、99.4%,RSD分别为0.86%、1.8%、1.8%、1.7%、2.0%、1.2%、1.2%、1.4%。狭基线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、新西兰牡荆苷3、异夏佛塔苷、夏佛塔苷、牡荆苷、芹菜素-6,8-二-C-α-L-吡喃阿拉伯糖苷和芦丁8个水溶性成分含量分别为0.63~0.33、0.88~6.20、0.44~2.41、2.37~11.19、0.75~5.53、0.76~1.83、0.45~1.78、0.00~2.45 mg·g-1,纤花线纹香茶菜中上述8个水溶性成分含量分别为0.86~3.12、0.76~6.35、0.53~1.47、2.44~11.1、1.96~5.29、0.00~1.82、0.90~5.82、0.00~2.34 mg·g-1,线纹香茶菜中上述8个水溶性成分含量分别为0.61~2.17、0.77~1.56、0.47~1.82、1.97~6.48、1.69~6.72、0.00~0.56、0.00~3.30、0.00~0.84 mg·g-1,溪黄草中上述8个水溶性成分含量分别为0.62~1.33、0.00~0.94、0.44~1.33、0.00~2.13、0.18~1.81、0.00~0.50、0.00~1.11、0.00~0.22 mg·g-1。结论:本研究所建立的方法能鉴别不同来源的溪黄草药材,可用于溪黄草药材的质量控制。     

主动脉瓣关闭不全法建立新西兰兔心衰模型

目的 用主动脉瓣关闭不全法致新西兰兔心衰模型。方法 运用导管术造成新西兰兔主动脉瓣膜关闭不全, 制作超容量负荷型心衰模型。观察动物的毛色、精神状态、活动情况、饲料消耗指数、体重增加指数、呼吸频率等指标对该模型进行评价;检测血清SOD活力和MDA含量, 判断模型组动物机体抗氧化能力;利用酶联免疫法检测血清中cAMP、cGMP的变化情况;利用基因芯片技术分析该模型基因表达差异。结果 模型动物SBP、DBP和LVSP著性下降, LV+dp/dt和LV±dp/dt明显下降, LVDP显著上升。模型组与正常组比较, 毛发枯槁, 活动减少, 进食减少, 反应迟钝, 精神萎靡, 抓起时反抗减轻。模型组呼吸频率加快;模型组血清SOD活性低于正常组, MDA含量高于正常组;模型组血清cAMP明显低于正常组, cGMP明显高于正常组;利用基因芯片共检测出665个差异基因, 其中与心功能较密切相关的基因主要与离子通道、肌收缩、信号转导等功能有关。结论 采用主动脉瓣关闭不全法建立兔心衰模型方法可靠。主动脉关闭不全, 使心脏前负荷增加, 造成左心室舒张末期容积增加, 导致左心室扩大肥厚及心力衰竭。心肌组织基因芯片检测结果显示, 该模型基因表达出现了一定的变化。     

SPF级新西兰兔脏器参数、血液指标、颈动脉血压、心率、心室压的测定与比较

目的 准确测定SPF新西兰兔生物学特性尤其是疾病相关的指标,并进行性别间比较。 方法 取70-80日龄左右SPF新西兰兔30只,饲养一周后,精确称量体重及主要脏器重量;采集动脉血测定血液生理、生化、血气指标;颈动脉插管测定动脉压,呼吸支持情况下进行开胸测定心室压。 结果 雄性与雌性新西兰兔比较： 甲状腺、肾上腺、肝的质量差异有显著性意义（P＜0.05或P＜0.01）;脑、脑垂体、甲状腺的脏器系数差异有显著性意义（P＜0.05或P＜0.01）;甲状腺、肾上腺、肝的脏脑比系数差异有显著性意义（P＜0.05或P＜0.01）。红细胞平均体积、平均血红蛋白量的差异有显著性意义（P＜0.05或P＜0.01）;谷氨酰转肽酶、淀粉酶的差异有显著性意义（P＜0.05或P＜0.01）;血气分析、心率、颈动脉收缩/舒张压,左心室收缩/舒张压,右心室收缩/舒张压不存在性别间差异。 结论 性别对新西兰兔脏器重量及血液生理生化指标有一定影响,而血气、血压、心率及心室压等不存在性别间差异。     

体验新西兰医疗

改革开放以后,断断续续、零零碎碎地从各种媒体和一些去过国外的人士那里,获得了一些关于在国外就医看病的大概情况,从只言片语的介绍中,留下的只是＂好＂的印象,至于有多＂好＂,实在是想象不出来。俗话说,＂耳听为虚,眼见为实＂。初来乍到新西兰,一次貌似严重,其实是＂虚惊＂一场的小＂插曲＂,却使我切切实实地体验了在新西兰,如何从急救到医疗、康复的全过程,验证了＂百闻不如一见,一见胜过百闻”之说的经典性。     

利用CRISPR/Cas9技术制备ApoE－/－兔

目的制作载脂蛋白E(ApoE)基因敲除(ApoE~(-/-))兔,为研究动脉粥样硬化提供优良动物模型。方法应用CRISPR/Cas9系统编辑新西兰兔的Apo E基因,制作F0代ApoE~(-/-)兔,利用PCR、TA克隆、Sanger测序、Western blot和血脂检测鉴定Apo E靶向敲除的效率和效果,并通过传代获得ApoE~(+/-)兔。结果 Sanger测序结果显示成功靶向敲除兔ApoE基因,血清脂蛋白含量在正常饮食状态下相对于野生型兔有升高,且可稳定遗传。结论成功建立了ApoE~(-/-)兔,为进一步研究动脉粥样硬化和其他相关疾病提供了良好的动物模型。     

快讯

继新西兰、澳大利亚限制销售含高浓度过氧化氢的牙齿美白产品后，香港政府近日亦提出了新的立法，视美容师进行牙齿关白及一些高风险医疗措施等为非法。食物和卫生局宣布，只有正式注册的牙医和医师才可以进行此类操作：