基于HPLC指纹图谱、多指标成分含量测定结合化学计量学的怀牛膝质量评价＊

目的 本实验采用HPLC方法建立来自3个产地15批怀牛膝药材的指纹图谱，并对β-蜕皮甾酮，25R-牛膝甾酮，25S-牛膝甾酮进行含量测定，同时通过化学计量学的方法对15批怀牛膝进行质量评价。方法 选用Waters SunFire C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，检测波长280 nm，以乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱，流速为1.0 mL·min^-1，柱温25℃，进样量10 μL。以β-蜕皮甾酮峰为参照峰，运用软件《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》对15批怀牛膝药材进行相似度分析，使用Metabo Analyst 5.0网站进行聚类热图分析，使用SIMCA 14.1软件进行PCA和PLS-DA分析。结果 标定了31个共有指纹峰，指认了3个已知成分，并对其进行含量测定，化学计量学分析结果将15批怀牛膝药材样品分为3类，并且筛选了不同产地间潜在的差异性成分。结论 该方法具有良好的精密度、重复性以及稳定性，可为怀牛膝的质量评价与控制提供科学依据及参考。     

祖卡木颗粒和罂粟壳提取液对小鼠行为学的影响

目的探讨祖卡木颗粒(ZKM)和罂粟壳提取液(YSK)对小鼠行为学的影响。方法 ZKM2.7、5.4、10.8 g/kg,YSK 0.22、0.44、0.89 g生药/kg,连续给予昆明小鼠14 d,采用转棒试验观察祖卡木颗粒对小鼠运动、协调能力的影响;采用戊巴比妥钠催眠协同作用和自发活动试验,观察其对中枢神经系统的影响。结果与对照组比较,ZKM三组和YSK 0.22、0.44 g生药/kg组对小鼠睡眠持续时间无明显改变;给药组均对小鼠转棒试验动物潜伏期无明显改变;YSK 0.89 g生药/kg组小鼠睡眠持续时间明显降低(P 0.05),并可延长自主活动反应箱中心区域活动潜伏期(P 0.05);ZKM 10.8g/kg组自主活动反应箱四周活动持续时间明显降低(P 0.05)。结论临床等效剂量的祖卡木颗粒和罂粟壳提取液对小鼠运动、协调能力及中枢神经系统未见明显影响;高剂量祖卡木颗粒和罂粟壳提取液对小鼠自主活动有一定影响。     

不同规格怀牛膝不同极性部位HPLC指纹图谱

目的研究并比较不同规格怀牛膝不同极性部位的HPLC指纹图谱,探索其内部质量差异,为该药材的规格标准完善及临床用药提供参考。方法将怀牛膝用体积分数75%乙醇水浴回流提取,得体积分数75%乙醇回流提取物,用40 mL水溶解后,依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,得到各萃取相及萃取后的水相,浓缩至浸膏,采集各部位HPLC指纹图谱;运用相似度、综合聚类法进行数据分析,同时对其不同部位的指纹图谱进行比对分析。结果石油醚、氯仿部位均标定了11个共有峰,乙酸乙酯部位标定了10个共有峰,正丁醇部位标定了19个共有峰,水部位标定8个共有峰;氯仿部位指纹图谱相似度差异较大,其他部位指纹图谱相似度差异较小,均在0.9以上;石油醚部位指纹图谱差异主要体现在峰高,乙酸乙酯部位、氯仿部位、水部位的化学成分种类及峰高均存在差异;综合聚类分析能将不同规格怀牛膝区分开。结论不同规格怀牛膝内部质量存在差异;实验中所建立的HPLC指纹图谱可以全面反映不同规格怀牛膝的化学成分分布,为不同规格怀牛膝的整体质量评价提供参考。     

糖尿病肛漏创面应用美洲大蠊提取液的lncRNA高通量测序及维恩图分析＊

目的 基于高通量测序及维恩图预测美洲大蠊提取液促进糖尿病肛漏创面愈合的顺、反式lncRNA及Pathway。方法 选取湖南中医药大学第二附属医院收治的糖尿病肛漏患者术后创面12例，利用高通量测序技术检测6例术后创面组（A组）和6例术后创面应用美洲大蠊提取液创面组（B组）中lncRNAs和mRNAs表达，进行GO分析和KEGG通路分析，构建lncRNA-mRNA的共表达网络图，并通过Cis-及Trans-预测与创面愈合相关lncRNA。结果 实验组差异表达的lncRNAs2242个（上调649个，下调1593个），mRNAs有13186个（上调5162个，下调8024个）。GO分析发现差异表达的lncRNA-cis主要富集在表皮细胞分化、上皮细胞分化、细胞代谢过程的调节等；差异表达的lncRNA-trans主要富集在细胞代谢过程、蛋白质结合、细胞内部分等。通过KEGG通路分析，筛选出与本研究相关的3条通路：IBD、MAPK signaling pathway、AMPK signaling pathway；lncRNA靶标基因预测中最终筛选出3个lncRNA（ENST00000443364、ENST00000576797、ENST00000620167），进行PCR验证，lncRNAENST00000443364、ENST00000576797与芯片结果一致。结论 美洲大蠊提取液可能通过lncRNAENST00000443364、ENST00000576797顺式及反式调控靶标基因，影响表皮细胞分化、上皮细胞分化、细胞代谢过程的调节等功能以及影响IBD、MAPK signaling pathway、AMPK signaling pathway促进糖尿病肛漏创面愈合。     

对宠物过敏患者的诊断及防治

对宠物过敏已成为全球性的问题,越来越引起各国变态反应学家的重视.对美国3431例7～8岁患过敏性疾病的儿童的研究发现,哮喘、鼻炎、湿疹患儿对猫过敏的比例分别为40%、49%和29%,对狗过敏的比例分别为34%、33%和21%[1].对1010例来我院变态反应科就诊的患者进行皮肤点刺试验,结果显示,对猫毛提取液呈阳性反应者为11.3%,对狗毛提取液呈阳性反应者为4.9%.     

月季花提取液对小鼠离体子宫平滑肌收缩性能的影响

目的探讨不同剂量的月季花提取液对小白鼠离体子宫平滑肌收缩性能的影响。方法采用小白鼠离体子宫实验法,观察不同剂量的月季花提取液对小鼠正常子宫以及缩宫素干预下小鼠离体子宫的收缩幅度、收缩张力、收缩曲线下面积和收缩频率的影响。结果与对照组比较,月季花低剂量组离体子宫收缩频率明显降低(P<0.01),月季花中、高剂量组均能明显降低收缩幅度、收缩张力、收缩面积和收缩频率(P<0.05);与缩宫素组比较,除缩宫素+月季花低剂量组对收缩幅度抑制不明显外,各组均能明显降低收缩幅度、收缩张力、收缩面积和收缩频率(P<0.05),而且随着剂量的增大,收缩性能降低越显著。结论月季花提取液明显抑制小鼠正常离体子宫收缩性能和拮抗缩宫素引起的子宫兴奋效应,具有一定的量效关系。     

怀牛膝抗衰老作用的实验研究

目的：从分子生物学水平探讨怀牛膝的抗衰老作用及作用机理。方法：以DNA甲基酶活力为观察指标，将大鼠分为青年组、成年组、老年组、老年药组、老年对照组、测定其DNA甲基化酶活力变化情况。结果：老年组小鼠DNA甲基化酶活力较青年组、成年组明显降低；老年药物组（应用怀牛膝药物）NDA甲基化酶活力较老年对照组增高。结论：怀牛膝能明显提高DNA甲基化酶的活力，具有延缓衰老的作用。     

川渝产黄连提取液颜色与有效成分相关性研究

目的探讨四川、重庆所产黄连的提取液颜色值与其有效成分的相关性。方法依据CIE L^*a^*b^*数字化系统,采用分光测色计测定色度值,HPLC测定有效成分含量。结果黄连的亮度与盐酸小檗碱、黄连碱呈显著负相关,红色方向与盐酸小檗碱、黄连碱呈显著正相关,且其黄色方向与盐酸小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱的含量均呈显著正相关。结论黄连提取液的色度值与有效成分具有相关性,黄连提取液的色度值可以反映黄连的成分含量,为黄连建立简捷、快速质量评价技术方法奠定基础。     

急性肺损伤早期抗凝疗法的研究

采用骨髓提取液（BME）静脉注射建立家兔急性肺损伤的动物模型。实验组在实验过程中使用肝素进行抗凝治疗，对照组不进行抗凝治疗。两组动物同时观察生命体征、血液气体分析、X线胸片、及肺病理学检查，分析早期抗凝疗法对急性肺损伤以及由此继发的全身脏器损害的影响。实验结果表明：早期抗凝对肺局部病变影响不大（P＞0．05），但能明显提高致伤动物的7h存活率（P＜0．01）。表明：1）ARDS的死亡原因不完全取决于肺脏局部的病变程度，可能与肺外脏器的继发性损害有关。2）早期使用肝素抗凝可以减轻全身的损害，提高生存率。     

黑木耳深层发酵提取液与二甲基丙烯酰配伍湿敷治疗老年人Ⅱ～Ⅲ期压疮的护理研究

目的 探讨黑木耳深层发酵提取液与二甲基丙烯酰配伍湿敷治疗老年人Ⅱ～Ⅲ期压疮的疗效.方法 将60例符合Ⅱ～Ⅲ期压疮表现的老年患者,随机分成实验组和对照组各30例,实验组30例(50处压疮)采用黑木耳深层发酵提取液与二甲基丙烯酰配伍湿敷治疗.对照组30例(46处压疮)采用常规换药方法,0.5%碘伏消毒创面,再用无菌凡士林纱及敷料包扎治疗.通过观察指标进行疗效比较.结果 实验组有效率为100.0%,平均愈合时间为10.33 d.对照组有效率78.3%,平均愈合时问为24.27 d.2组有效率和平均愈合时间比较差异有统计学意义,P<0.01.结论 黑木耳深层发酵提取液与二甲基丙烯酰配伍湿敷治疗老年人Ⅱ～Ⅲ期压疮取材方便,安全经济,疗效显著,适合新农村合作医疗及社区医疗人群.