新化合物Elixir-X对肝切及辐射所致衰老小鼠的抗衰老作用

目的 探讨蜂巢提取物Elixir-X对自然衰老及辐射衰老小鼠的影响，为Elixir-X的进一步研发提供药理学基础。方法 采用小鼠肝脏切除术建立自然衰老小鼠模型，将其分为空白对照组、Elixir-X组、白藜芦醇组及模型组，连续给药7 d后，检测小鼠70%肝脏切除后的再生过程中，衰老细胞、肝脏功能恢复与肝脏再生的变化，观察Elixir-X对自然衰老的影响；采用60CO辐射法建立辐射衰老小鼠模型，将其分为模型组、空白对照组、白藜芦醇组、Elixir-X高、低剂量组，通过检测小鼠肠隐窝干细胞再生、小肠绒毛结构以及衰老细胞的变化，对比不同剂量Elixir-X对辐射后衰老的影响。结果 在肝脏切除术的小鼠模型中，Elixir-X组的肝功能水平明显低于模型组的肝脏自然再生小鼠，显著促进了肝功能恢复（P＜0.05）；同时与模型组相比，Elixir-X组清除了肝脏切除后再生过程中产生的衰老细胞（P＜0.05），Ki-67的着色斑块明显增加，促进肝脏的再生，且肝血窦的扫描电镜影像结果中Elixir-X组肝血窦再生加快。60CO辐照小鼠模型中，与模型组相比，Elixir-X组有效促进辐照后肝脏功能恢复（P＜0.05），Elixir-X高剂量组体重也恢复到正常水平，与空白对照组无显著差异；与模型组相比，Elixir-X低剂量组小肠的β-Gal着色细胞减少，Elixir-X高剂量组甚至能更有效地减少衰老细胞（P＜0.05）；小肠HE染色的结果中，Elixir-X组小肠绒毛结构得到恢复；Ki-67的IHC染色中，与模型组相比，Elixir-X组着色板块更多，且着色区域都在肠隐窝干细胞位置。结论 Elixir-X能有效清除肝脏切除术引起的自然衰老与辐射引起的损伤性衰老细胞，对衰老具有显著地抑制作用。     

真假性左束支阻滞心电图的鉴别

左束支阻滞(left bundle branch block,LBBB)是不良心脏事件的独立预测因素,与不良预后密切相关.然而,心电图呈LBBB样并不意味着左束支传导功能完全阻断(真性LBBB),尚存在左束支传导延缓、室内阻滞等假性LBBB样图形(假性LBBB).由于真假性LBBB的病理生理学、治疗方式及预后明显不同,因此准确鉴别二者尤为重要.本文总结了真假性LBBB的心电图特征、临床意义及如何识别真性LBBB.     

淫羊藿总黄酮改善自然衰老大鼠睾丸支持细胞分泌功能衰退的作用

目的研究淫羊藿总黄酮(TFE)对衰老睾丸支持细胞(Sertoli细胞)分泌功能衰退的影响,并从肌醇需酶1α(IRE1α)/X盒结合蛋白1(XBP1)信号通路探讨其分子机制。方法将36只SPF级18月龄SD雄性大鼠随机分为自然衰老组和TFE 10及40 mg·kg~(-1)组,每组12只;另取10只2月龄大鼠作为壮龄对照组。每天定时ig给TFE 1次,每5 d间隔2 d再继续ig给药,给药共计4个月。计算睾丸指数;HE染色观察睾丸组织形态;实时定量PCR和Western印迹法检测睾丸组织中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、骨形态形成蛋白4(BMP4)及干细胞因子(SCF)mRNA和蛋白表达水平;检测睾丸组织中磷酸化IRE1α(p-IRE1α)和XBP1蛋白表达水平;免疫荧光法检测睾丸组织内Sertoli细胞数量和p-IRE1α定位。结果与壮龄对照组比较,自然衰老组大鼠睾丸指数显著降低(P<0.01);与自然衰老组相比,TFE 40 mg·kg~(-1)组睾丸指数显著升高(P<0.05)。HE结果显示,自然衰老组睾丸曲细精管的形态结构紊乱,部分生精细胞发生脱落;TFE给药组能改善睾丸曲细精管的形态结构。实时定量PCR结果显示,与壮龄对照组比较,自然衰老组Sertoli细胞分泌因子GDNF和SCF mRNA表达水平均显著下调(P<0.01);Western印迹结果显示,GDNF,BMP4和SCF蛋白显著下调(P<0.01)。与自然衰老组相比,TFE给药组分泌因子mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05,P<0.01)。Western印迹结果显示,与壮龄对照组比较,自然衰老组睾丸组织中p-IRE1α和XBP1蛋白表达均显著下调(P<0.01);与自然衰老组相比,TFE给药组p-IRE1α和XBP1蛋白表达显著上调(P<0.01)。免疫荧光结果显示,壮龄对照组、自然衰老组和TFE给药组Sertoli细胞数量无显著差异。不仅在生精细胞胞质广泛表达,在Sertoli细胞胞质亦有表达。结论 TFE可显著改善自然衰老所致大鼠睾丸Sertoli细胞分泌功能衰退,其机制可能与调节IRE1α/XBP1信号通路有关。     

竹节参总皂苷对自然衰老大鼠脂肪组织炎症的改善作用

目的探讨竹节参总皂苷对自然衰老大鼠脂肪组织炎症的改善作用。方法 48只2月龄大鼠随机分成自然衰老组及竹节参总皂苷低、中、高剂量组(10、30、60 mg/kg),每组12只,待大鼠长至18月龄后,再取12只2月龄大鼠作为正常对照组,竹节参总皂苷组大鼠从18月龄开始灌胃给药,连续4个月,每星期停药1 d。HE染色观察脂肪组织形态学变化,RT-PCR法检测脂肪组织白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA表达,Western blot检测脂肪组织IL-1β、TNF-α、Toll样受体4 (TLR4)、NF-κB、p NF-κB蛋白表达。结果自然衰老组大鼠脂肪细胞排列紊乱,炎症细胞浸润明显增加,坏死及变大的脂肪细胞增多,经竹节参总皂苷处理后上述病理变化得到明显改善。与自然衰老组比较,竹节参总皂苷组IL-6、IL-1β、MCP-1、TNF-αmRNA表达,以及IL-1β、TNF-α、TLR4、NF-κB、p NF-κB蛋白表达均有一定程度下调,以中、高剂量组更显著(P0. 05)。结论竹节参总皂苷可改善自然衰老大鼠脂肪组织炎症,其机制可能涉及TLR4/NF-κB信号通路。     

皮肤衰老进程中大鼠角质形成细胞P53,Sirt1表达差异及松花粉的干预作用

目的:研究皮肤衰老进程中各年龄段大鼠角质形成细胞P53、Sirt1表达差异及松花粉对其表达的干预作用。方法:选用SD大鼠背部皮肤的角质形成细胞为研究对象,比较幼年组、成年组、老年组及松花粉喂养老年组P53、Sirt1表达差异。结果:幼年组、成年组、老年组、松花粉喂养老年组P53表达阳性率(%)分别为(72.99±5.461)%、(58.72±3.515)%、(87.51±5.303)%、(59.63±3.976)%;Sirt1表达阳性率(%)分别为(76.30±3.570)%、(81.81±4.740)%、(61.69±3.904)%、(72.54±5.254)%,差异均有统计学意义(P0.01)。幼年组P53、Sirt1表达阳性率介于成年组与老年组之间,老年组P53表达阳性率最高,Sirt1表达阳性率最低(P0.01)。松花粉干预后,松花粉喂养老年组P53表达阳性率降低,Sirt1表达阳性率升高。结论:在皮肤衰老过程中,各年龄段大鼠角质形成细胞P53、Sirt1表达有差异且松花粉有抗皮肤衰老作用。     

艾炷灸命门穴对衰老模型大鼠脑组织中AGEs、RAGE表达影响

目的:观察艾炷灸命门穴对D-半乳糖致衰老大鼠脑组织中AGEs及其受体RAGE表达的影响,探讨艾炷灸命门穴延缓衰老的作用机制。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为空白组10只、模型制备组30只,空白组腹腔注射生理盐水,模型制备组进行腹腔注射D-半乳糖500 mg/kg,每日1次,连续60天,模型制备成功后随机选取20只分为模型对照组、命门穴治疗组,艾炷灸治疗4周。酶联免疫吸附测定法(Elisa)观察各组大鼠脑组织匀浆中AGES、RAGE表达水平,RT-PCR观察RAGE mRNA的表达水平。结果:模型对照组大鼠脑组织中AGES、RAGE及RAGE mRNA表达水平比空白组明显增加(P<0.01);命门穴治疗组脑组织中AGES、RAGE及RAGE mRNA表达水平明显低于模型对照组(P<0.01)。结论:艾炷灸命门穴可以延缓衰老,其机制可能是AGEs的水平下调减少了对蛋白的直接修饰及抑制AGEs与特异性配体RAGE结合而引发一系列的生物学效应而达到延缓衰老的目的。     

补益营卫方对衰老表皮结构蛋白K17的影响

目的:观察补益营卫方对衰老表皮结构蛋白K17的基因和蛋白水平的影响。方法:将3个月龄小鼠(年轻组)与14个月龄小鼠(老年组)表皮细胞消化分离出来,然后进行传代培养,其中14个月龄小鼠(老年组)的表皮细胞分为2组,一组用常规方法培养细胞,另一组用含2.5%的补益营卫方培养基进行培养,采用荧光定量RT-PCR法和Western Blotting法分别检测细胞K17mRNA表达和细胞K17蛋白表达。结果:与年轻组比较,老年组的K17mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05);经药物干预后小鼠表皮细胞中K17mRNA和蛋白水平较老年组明显降低(P<0.05)。结论:补益营卫方可通过抑制衰老表皮结构蛋白K17的表达,起到延缓皮肤衰老作用。     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺p16/Rb细胞转导通路相关蛋白的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺p16/Rb细胞信号转导通路相关蛋白的影响。方法选用8周龄SD雌性大鼠50只,随机分为何首乌饮干预预防和治疗性实验两大部分,分为五组,每组5只,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,Western印迹法检测p16、非磷酸化Rb蛋白含量。结果预防各组间p16和非磷酸化Rb蛋白表达均以模型组最高,正常组最低,各预防组处于中间水平,其中以预防中剂量组(Pm)最低(P0.01)。治疗各组间p16和非磷酸化Rb蛋白表达均以自然恢复组(S-R)最高,阴性对照组最低,各治疗组中以治疗中剂量组(Tm)最低(P0.01)。结论何首乌饮延缓下颌下腺细胞衰老的作用可能与激活Rb/p16通路有关。