透明质酸寡糖软膏的制备及药效学研究

目的 制备透明质酸寡糖软膏,观察透明质酸寡糖软膏对兔耳伤口愈合的影响.方法 取一定量的软膏基质,将其制成含主药量分别为0.2％、0.8％、1.3％3种浓度的透明质酸寡糖软膏.然后将12只体质量相近的新西兰兔制备成兔耳皮肤缺损模型,每个兔耳3个创面,分别涂以3种不同浓度的透明质酸寡糖软膏、基质、阳性药以及空白对照.造模后第4、7、14天计算创面愈合率,组织学观察创面愈合情况,免疫组化检测创面组织TGF-β表达.结果 透明质酸寡糖软膏组、阳性药组的创面愈合率均高于空白组(P<0.05).病理学结果显示:透明质酸高浓度组较其他组肉芽组织形成明显,新生血管较多.免疫组化结果显示,透明质酸寡糖软膏组TGF-β蛋白表达含量均高于空白组和基质组.结论 透明质酸寡糖软膏能显著促进兔耳伤口愈合.     

壳寡糖促进岩黄连总碱提取物中原小檗碱型生物碱成分肠道吸收的研究

目的 :考察壳寡糖对岩黄连总碱提取物中原小檗碱型生物碱活性成分肠道吸收的促进作用. 方法 :采用大鼠在体肠单向灌流模型,研究添加不同浓度壳寡糖后岩黄连总碱中脱氢卡维丁、盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的吸收动力学参数变化,评价壳寡糖对药物成分肠道吸收的促进作用. 结果 :壳寡糖的浓度对3个活性指标成分在大鼠肠道的吸收速率常数(K_a)和有效渗透系数(P_eff)具有不同程度的影响,在0.5%壳寡糖溶液中活性指标成分的K_a和P_eff增加明显,呈现较强的吸收促进作用. 结论 :壳寡糖对岩黄连生物碱中原小檗碱型生物碱活性成分的肠道吸收有一定促进作用.     

远志不同炮制品中3种寡糖酯类成分含量比较

目的:比较远志不同炮制品中3种寡糖酯类成分(tenuifoliose J、tenuifoliose H、tenuifoliose A)的含量差异。方法:采用HPLC法测定远志不同炮制品中tenuifoliose J、tenuifoliose H、tenuifoliose A的含量,流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B),梯度洗脱,检测波长310 nm。结果:远志木心中3种寡糖酯类成分含量明显低于远志根皮。在20 h内,甘草汁煮远志中3种成分含量随着煮制时间的延长而显著降低。与生远志比较,甘草汁煮远志、清水煮远志、蜜远志中3种寡糖酯类成分含量均降低,甘草汁煮制法及清水煮制法降低量相近,蜜炙法与其它炮制方法相比降低程度小。结论:远志不同炮制品中3种寡糖酯类成分的性质不稳定,经甘草汁煮制、清水煮制、蜜炙后含量皆减少,存在向其他物质转化的可能。     

新型抗阿尔茨海默病药物甘露寡糖二酸

目的阿尔茨海默病(AD),是一种由多因素引起的神经系统退行性疾病,严重危害人类健康。目前临床治疗药物主要为胆碱酯酶抑制剂等疾病症状改善药物,存在疗效不确切、毒副作用大等缺点,无法有效防止AD的进展。因此开发能够改变疾病进程的抗AD药物是目前医药界共同关注的焦点。方法采用基于SPR的芯片筛选方法,针对糖库进行筛选;采用一系列的生物化学和物理方法,观察对amyloidβ(Aβ)聚集以及神经毒性的影响;采用转基因动物模型,观察对转基因动物行为学的影响。结果我们通过筛选获得国际首个靶向Aβ的寡糖分子——971。核磁共振技术直接证明971能够与Aβ多位点结合;通过其独特的结合方式,971能够抑制Aβ聚集,并且能够促进已经聚集的Aβ解聚,同时抑制Aβ的神经毒性。体内研究表明971能够明显改善转基因小鼠的学习记忆能力以及日常生活能力。Ⅱ期临床研究表明,971安全性好、能明显改善轻中度AD患者认知功能障碍。临床Ⅲ期正在进行中。结论 971有望成为近十几年来首个靶向Aβ的抗AD新药。     

壳寡糖及其衍生物对实验性糖尿病大鼠抗氧化能力及肾功能的影响

背景：壳寡糖和N-乙酰氨基单糖是高分子不溶性壳聚糖经水解的产物,具有水溶性。由于分子结构相似,壳寡糖和N-乙酰氨基单糖壳聚糖同样具有抗氧化等功效,同时由于其小分子可溶性和易被人体吸收的特性,在糖尿病及其并发症预防与治疗方面有更广阔的应用前景。目的：观察不同剂量的壳寡糖,N-乙酰氨基单糖对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠抗氧化能力的影响及对肾脏的保护作用。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-07/09在中国海洋大学生物化学实验室完成。材料：壳寡糖,N-乙酰氨基单糖由中国海洋大学生物化学实验室制备。81只Wistar大鼠随机分为9组：正常对照组,阴性对照组,二甲双胍组,壳寡糖和N-乙酰氨基单糖低、中、高剂量组,每组9只。方法：正常对照组腹腔内注射柠檬酸缓冲液,其余各组按65mg/kg体质量一次性腹腔内注射链脲佐菌素溶液制备糖尿病大鼠模型。壳寡糖和N-乙酰氨基单糖低、中、高剂量组分别按每日250,500,1500mg/kg灌胃壳寡糖和N-乙酰氨基单糖水溶液,正常对照组,阴性对照组按体质量灌胃等体积凉白开水（10mL/kg）,二甲双胍组按每日200mg/kg灌胃二甲双胍水溶液,连续60d。主要观察指标：①测定血清中谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、丙二醛浓度、总抗氧化能力和肾功能指标。②肾脏病理组织学检查。结果：壳寡糖,N-乙酰氨基单糖可以增加糖尿病大鼠血清中总抗氧化能力及超氧化物歧化酶浓度,显著降低血清中丙二醛、尿素氮、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶及尿液中总蛋白/肌酐、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶/肌酐的水平。其中以壳寡糖中剂量组（500mg/kg）和N-乙酰氨基单糖低剂量组（250mg/kg）作用效果较好。结论：适量壳寡糖及N-乙酰氨基单糖能够有效的降低链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的抗氧化能力,从而对肾脏起到了保护作用。     

地黄寡糖对谷氨酸诱导海马神经元损伤的影响

目的观察地黄寡糖对谷氨酸诱导海马神经元损伤的影响。方法将培养7～9d的SD大鼠海马细胞进行NSE鉴定,然后随机分为:正常组(control);单纯地黄寡糖用药组(ROS);谷氨酸损伤组(Glu);谷氨酸损伤前地黄寡糖预处理组(ROS+Glu)。采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,比色法测定培养液中的乳酸脱氢酶(LDH)含量,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果0.1mmol·L-1谷氨酸作用于海马神经元24h,出现明显细胞损伤,细胞存活率下降,培养液中LDH含量明显增加,细胞凋亡率增高(P<0.01);4、20、100mg·L-1的地黄寡糖可不同程度的改善谷氨酸损伤引起的神经细胞形态的改变,提高细胞存活力,减少LDH的漏出,降低细胞凋亡率,并呈一定的剂量依赖性。4、20、100mg·L-1单纯地黄寡糖组与正常组间各指标差异没有显著性(P>0.05)。结论谷氨酸能诱导海马原代细胞的凋亡,地黄寡糖能有效保护海马神经细胞免受谷氨酸诱导的细胞损伤。     

巴戟天寡糖促治疗性血管新生机制的探讨

目的：通过观察巴戟天寡糖（Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO）对AMI后大鼠心室重构（Ventricular Remodeling）的干预及缺血心肌组织局部血小板源性生长因子-B（Platelet Derived Endothelial Growfla Factor-B．PDGF-B）及血管内皮细胞生长因子受体1（Fins-like Tyrosine Ki2nase-1,Flt-1）的蛋白表达变化,进一步探讨MOO促进治疗性血管新生作用的机制,为心脏组织工程学的临床应用提供实验依据。方法：60只雄性Wistar大鼠,除假结扎组10只开胸分离冠脉后只穿线不结扎外,其余50只均结扎冠状动脉左前降支,制成AMI模型,随机分为模型组,麝香能心丸（30mg&#183;kg^-1&#183;d^-1）阳性药对照组,MOO小、中、大（0．7g&#183;kg^-1&#183;d^-1、1．4g&#183;kg^-1&#183;d^-1、2．8g&#183;kg^-1&#183;d^-1）剂量组,每组10只。各组均于手术后24h内开始给药,模型组及假结扎组每d用与药物组等容积的蒸馏水灌胃,给药6w后处死。心肌取材进行心脏大体及一般组织形态学观察,测定大鼠左心室质量指数（Left Ventricular MassIndex,LVMI）,观察药物干预后各组大鼠心率变化（Changing Rate of HeartRate,CROHR）,应用免疫组织化学SP法检测各组大鼠缺血心肌细胞PDGF-B、Fit-1蛋白表达的情况,用病理图像分析系统测定生长因子蛋白表达光密度值（Optical Density Value,ODV）,并进行半定量分析。     

巴戟天寡糖对成肌细胞增殖及分化的影响

目的：观察巴戟天寡糖（Morinda Officinalis How Oligosacchalide,MOO）对成肌细胞增殖分化的影响。方法：采用离体纯化培养乳鼠双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法,制成浓度为1&#215;10^5／mm3的成肌细胞悬液,接种到25ml培养瓶中培养。实验分为5组：空白对照组5．氮杂胞苷（5-Aza）（10μmol／mL）对照组;MOO小、中、大剂量（100μg／ml、300μg／ml、500μg／m1）组;并检测以下指标：1．成肌细胞形态学变化。2．免疫细胞化学法鉴定结蛋白（Desmin）。3．免疫细胞化学法测定转化生长因子β1（TGF—β1）和增殖细胞核抗原（PCNA）。4．四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测巴戟天寡糖对成肌细胞增殖的影响。5．绘制生长曲线。结果：1．倒置显微镜下,成肌细胞培养24h后,可见大量折光率强的圆形细胞贴壁,且有极少量细胞有小突起;48h后,细胞呈梭形并出现单个细胞核;72h后,成肌细胞变得细长,并相互拉网,从单核期进入合体细胞阶段;继续培养,成肌细胞相互融合,形成多核性长管状初生肌管;培养第5天后,可观察到分化状态较好的肌管有自发性搏动的收缩;用desmin抗体对分裂增殖4～5天的成肌细胞进行间接免疫酶染色,细胞核外周及胞浆呈棕黄色的desmin阳性反应,表明培养的细胞为成肌细胞;成肌细胞生长曲线显示原代成肌细胞生长培养48h后开始增生,早期增殖较快,倍增时间为5d,6～7d进入平稳期。     

壳寡糖(OLIGOCHITOSAN奥利奇善)-人类健康的金钥匙

作为糖生物学研究对象的糖,早在一个世纪前就为人们所认识,但科学家对它的研究,却远远滞后于对蛋白质和核酸的研究.很长时间内,糖仅作为生物体内的能量和结构物质被认识,60年代,科学家发现细胞表面密布着糖缀合物的糖链.糖链不仅决定了细胞的类型,而且负责细胞间的信息传递,     

致病性奈瑟菌脂寡糖研究进展

脂寡糖是致病性奈瑟菌的毒力因子 ,它可介导细菌粘附和侵入宿主细胞 ,并诱导宿主产生杀菌性抗体。近年来各国学者对脂寡糖的分子生物学和致病机理的研究取得很大进展 ,这对脂寡糖疫苗的研制具有重要参考价值