基于TCA循环关键酶测定研究督灸治疗早期强直性脊柱炎患者关节活动度的疗效及机制＊

目的 基于TCA循环（三羧酸循环，tricarboxylic acid cycle）关键酶测定研究督灸治疗早期强直性脊柱炎（AS）肾虚督寒证患者关节活动度的疗效及生物学机制。方法 110例早期AS肾虚督寒证患者随机分为观察组和对照组，各55例。对照组口服甲氨蝶呤+洛索洛芬钠，观察组在对照组治疗基础上给予督灸，疗程均为12周。观察治疗前后患者的病情活动指数（bath ankylosing spondylitis disease activity index，BASDAI）、功能指数（bath ankylosing spondylitis fundation index，BASFI）、活动度衡量指数（bath ankylosing measure index activity index，BASMI）、总和指数（bath ankylosing spondylitis patient slobal，BAS-G）、指-地距、枕-墙距、胸廓活动度、Schober试验水平和早期AS肾虚督寒证中医辨证（肾虚督寒证）评分；检测血清炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-18（IL-18）、血沉（ESR）和C-反应蛋白（CRP）含量；检测TCA循环关键酶柠檬酸合成酶（citrate synthase，CS）、异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase，IDH）及α-酮戊二酸脱氢酶（α-ketoglutarate dehydrogenase，α-KGDHC）的水平；比较治疗12周患者的临床疗效及随访6个月复发率。结果 临床研究过程脱落6例。观察组总有效率96.2%，明显高于观察组的82.4%（P<0.05）；观察组随访6个月复发率5.7%，明显低于对照组的21.6%（P<0.05）。治疗12周后，观察组患者BASDAI、BASFI、BASMI、BAS-G、指-地距、枕-墙距和肾虚督寒证评分较对照组明显下降（P<0.05），胸廓活动度和Schober试验较对照组明显升高（P<0.05）；观察组患者TNF-α、IL-18、ESR、CRP、CS和IDH水平较对照组明显下降（P<0.05），α-KGDHC水平较对照组明显升高（P<0.05）。结论 督灸可以有效改善早期AS肾虚督寒证患者的临床症状，复发率低，值得临床推广应用。     

表面等离子共振技术在中医药研究中应用进展

利用表面等离子共振现象制备的生物传感技术具有无标记、灵敏度高、通量大、特异性强，样品耗损少等优点，在生命科学等众多学科中得到了广泛的关注和应用。近年来该技术也被运用在不少中医药研究的重要领域。本文简要介绍了表面等离子共振原理，总结并评述了在中医药新靶标发现、优效小分子寻找等方向的研究进展和前景。     

基于TCGA数据库探究肾透明细胞癌关键基因的表达及预后作用

目的:探究肾透明细胞癌中关键基因的表达及预后作用，寻找潜在治疗靶点。方法:从TCGA数据库下载肾透明细胞癌mRNA的表达数据，通过Rstudio软件分析肿瘤与正常组织间差异表达基因，对差异表达基因进行富集分析、蛋白-蛋白相互作用网络构建，并分析出关键基因，最后对关键基因进行预后分析。结果:得到1 855个差异表达基因，其中有1 207个是上调的，648个是下调的，富集分析发现差异基因主要与信号转导、物质代谢、免疫反应等信号通路相关。筛选出10个关键基因中有6个存在预后价值。结论:筛选出的差异基因及信号通路可以帮助我们探索肾透明细胞癌发病的分子机制，同时为靶向治疗的研究提供潜在的理论依据。     

替米沙坦关键中间体的新合成路线

本研究设计了替米沙坦关键中间体2-正丙基-4-甲基-6-(1-甲基苯并咪唑-2-基)苯并咪唑(1)的新合成路线。正丁腈(2)与甲醇或乙醇在氯化氢作用下反应得到正丁基亚胺酯(3)的盐酸盐,经碱化得到游离的3,再与4-氨基-3-甲基苯甲酸(4)反应得到4-丁脒基-3-甲基苯甲酸(5)。5与次氯酸钠反应生成中间过渡产物,然后直接在氢氧化钠作用下关环生成2-正丙基-4-甲基苯并咪唑-6-羧酸(6)。6与N-甲基邻苯二胺盐酸盐(7)脱水缩合生成1。该路线采用了2次叠缩工艺,简化了生产操作,总收率高达79%(以4计)。     

芪玉三龙汤调节Beclin1,Atg5,LC3B表达以抑制肺癌肿瘤生长机制

目的:研究芪玉三龙汤对肺癌小鼠皮下移植瘤生长及对自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1),自噬相关基因5(autophagy related genes,Atg5)及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein1light chain3,LC3B)表达的影响。方法:采用Lewis肺癌细胞(lewis lung cancer cell,LLC)构建肺癌移植瘤小鼠模型,造模成功后随机分为模型组、芪玉三龙汤组、顺铂组及联合组,每组18只移植瘤小鼠。模型组每日按照生理盐水20 mL·kg~(-1)灌胃;芪玉三龙汤组每日按照80. 48 g·kg~(-1)灌胃;顺铂组在第1,3,5天腹腔注射顺铂溶液(DDP)0. 4 mL;联合组每日按80. 48 g·kg~(-1)灌胃给药,并分别在第1,3,5天腹腔注射顺铂溶液0. 4 mL;连续治疗21 d剥离瘤组织,称取瘤重,计算抑瘤率。苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤组织形态学改变。免疫组化检测肿瘤组织中Beclin1,LC3B蛋白表达和定位。蛋白免疫印迹法(Western blot)测定Beclin1,Atg5,微管相关蛋白1轻链3-I(LC3B-Ⅰ)及微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)蛋白表达,并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织Beclin1,Atg5 mRNA转录水平。结果:芪玉三龙汤具有温和的移植瘤抑制作用,抑瘤率为31. 2%;镜下观察芪玉三龙汤组肿瘤组织可见片状坏死的肿瘤细胞;免疫组化及Western blot实验表明,与模型组比较,芪玉三龙汤能够上调Beclin1,Atg5,LC3B蛋白的表达(P 0. 01),并且能促进LC3B-Ⅰ转化为LC3B-Ⅱ;Real-time PCR结果表明,与模型组比较,芪玉三龙汤能够促进Beclin1,Atg5 mRNA的转录(P 0. 01)。结论:芪玉三龙汤对肺肿瘤生长具有温和地抑制作用,其作用机制可能与上调自噬关键分子Beclin1,Atg5,LC3B表达,促进LC3B-Ⅰ向LC3B-Ⅱ转化有关。     

LncRNAs在细胞衰老中的作用和治疗靶标

长链非编码RNA(long non-coding RNAs,LncRNAs)是一类转录本长度超过200 bp的非编码RNA。细胞衰老是一种稳定的增殖性停滞状态,这种不可逆的细胞停滞状态可能由多种因素引起,如端粒缩短、癌基因诱导或氧化应激。多因素参与细胞衰老,但p53/p21和p16/Rb是不同细胞类型中细胞衰老的主要调节途径。细胞衰老作为一种强大的肿瘤抑制机制已经被广泛研究,以抵抗致癌基因的出现。该文将深入探讨LncRNAs在细胞衰老中的作用机制和治疗靶标。     

公立医院收支管理风险量化评价的两种方法比较分析

目的:构建科学合理的收支管理风险量化评价指标体系,为识别公立医院收支管理环节存在的风险提供依据。方法:分别采用传统描述性统计方法和熵值法对收支风险指标进行赋权。结果:"备用金年底是否及时收回""支出申请与内部审批是否分离"等风险点在两种方法下其权重排序差异较大。结论:在传统医院收支风险管理领域,实务界关注收入支出的数量真实性、合法合规性,而以差异化为导向的熵值法更关注的是不同被试之间的差异性,即易被忽视的风险点,这与近几年审计实务中发现的问题基本吻合,医院财务管理人员应予以重点关注。     

环状RNA在急性髓系白血病中的研究进展

环状RNA是一种内源性非编码RNA(ncRNAs),近年来随着高通量测序和转录组谱分析技术的发展使得人们能够鉴定出与许多生物过程以及疾病的发生和发展有关的环状RNA(circRNAs)。其结构稳定、序列保守、功能多样、具有组织细胞特异性。环状RNA已被证明不仅与胃癌、结肠癌、乳腺癌等实体肿瘤的发生与发展、转移、预后等显著相关,在血液系统肿瘤尤其是白血病发挥重要作用。目前研究发现,白血病中circRNAs可以作为诊断的新生物标记,并为白血病提供有希望的治疗方法和新颖的药物筛选策略。对白血病中circRNAs的全面了解是开展临床应用研究的前提。     

铜胁迫对茅苍术3种药效成分积累及其生物合成2种关键酶基因表达的影响

目的研究铜胁迫对茅苍术药效成分β-桉叶醇、苍术酮和苍术素积累及其生物合成关键酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)、法呢基焦磷酸合酶(FPPS)基因表达的影响。方法在铜胁迫下,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定茅苍术HMGR、FPPS的表达量;采用高效液相色谱法测定茅苍术3种药效成分的含量;采用SPSS软件对两者进行相关性分析,DPS软件进行灰色关联度分析。结果当铜胁迫在100 mg/kg以内时,茅苍术根茎内FPPS表达量与苍术酮含量略有增加;但铜浓度继续增加时,HMGR、FPPS表达量与3种药效成分含量呈不同程度的下降趋势。铜胁迫下HMGR、FPPS的表达量与β-桉叶醇、苍术酮和苍术素的含量呈显著正相关(P0.05)。灰色关联度分析发现铜胁迫下茅苍术根茎中β-桉叶醇、苍术酮的含量与HMGR、FPPS的表达量关联较大,FPPS基因的表达对β-桉叶醇和苍术酮合成贡献较大,但苍术素含量与这2种关键酶基因的表达关联度较小。结论阐明了铜胁迫下茅苍术2种关键酶基因表达量与3种药效成分含量的变化规律,揭示了铜胁迫下茅苍术药效成分β-桉叶醇、苍术酮与萜类生物合成关键酶HMGR、FPPS的关系,有助于进一步深入研究铜胁迫下茅苍术药效成分合成的分子调控机制,为提高茅苍术药材的品质提供理论基础。     

药用植物甾体皂苷生物合成途径研究进展

甾体皂苷是药用植物中普遍存在的一类功效物质,由糖基和甾体皂苷元缩合而成,甾体皂苷的生物合成途径主要包括细胞质甲羟戊酸(MVA)途径和质体2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸(MEP)两条途径,并以MVA途径为主。在生物合成途径中涉及一系列关键酶,包括3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR),1-脱氧-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS),1-脱氧-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR),法尼基焦磷酸合酶(FPS),鲨烯合酶(SS),鲨烯环氧酶(SE),环阿屯醇合酶(CAS),细胞色素P450酶(CYP450),糖基转移酶(SGTase)等。在综合前人研究的基础上,该文对甾体皂苷生物合成途径路线图进行了补充和细化,而对近5年来有关药用植物甾体皂苷生物合成关键酶(基因)生物学信息研究报道整理发现,药用植物中HMGR,SS,CYP450,UGT基因研究相对较多,而对FPS,SE,CAS的报道则较少。整体来看,目前对甾体皂苷生物合成途径研究尚处于初级阶段,对于关键酶功能研究缺乏强有力的直接证据。可为甾体皂苷的后续研究提供参考和理论支撑。