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1.
目的:对比研究淫羊藿苷( icariin,I)与染料木黄酮(genistein,G)对体外培养大鼠成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖与分化成熟的影响及其药理活性的强弱.方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养子含10% FBS的MEM培养液中,3d后首次换液,铺满90%皿底后传代培养;I与G的作用终浓度为1×10-5 mol·L-1,增殖分析采用96孔板,MTT法分析;分化成熟分析采用24孔板,于成骨性诱导培养第3,6,9,12天分别测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素,第12天进行ALP组织化学染色、茜素红染色和钙化结节计数;于成骨性诱导培养0,6,12,24,48,72 h提取总RNA,Real-time RT-PCR法检测Runx-2,bFGF,IGF-I,Osterix( OSX)等成骨性相关因子的表达情况.结果:终浓度为1×10-5 mol·L-1的I与G均不促进ROB的增殖,均能显著提高细胞ALP活性、增加钙含量、促进骨钙素分泌,并增加钙化结节数量;同时上调Runx-2,bFGF,IGF-I和Osterix等成骨性相关因子的表达量;在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性明显强于G的活性.结论:1×10-5 mol·L-1的I与G均能促进ROB矿化成熟,均有抗骨质疏松的作用,但在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性显著强于G.  相似文献
2.
鲜地黄与干地黄止血和免疫作用比较研究   总被引:4,自引:4,他引:29  
目的:从止血和免疫作用方面,比较鲜地黄与干地黄的部分药理作用。方法:①采用阿司匹林造成小鼠凝血时间延长的模型,鲜、干地黄灌胃给药,用毛细玻管法测定凝血时间;②鲜地黄汁或鲜地黄煎液及干地黄煎液给小鼠灌胃给药10d ,观察对醋酸强的松龙诱导的免疫低下小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬功能;③用甲状腺素造成小鼠类阴虚模型,鲜、干地黄灌胃给药,用MTT 法测定Con A 诱导的脾脏淋巴细胞转化;并测定LPS 诱导的脾脏淋巴细胞碱性磷酸酶表达活性。结果:鲜地黄汁、鲜地黄煎液和干地黄煎液均在一定程度上拮抗阿司匹林诱导的小鼠凝血时间延长,但鲜地黄汁的作用明显强于干地黄;鲜地黄汁、鲜地黄水煎液能使类阴虚小鼠的脾脏淋巴细胞碱性磷酸酶的表达能力明显增强。鲜地黄汁还可增强ConA 诱导的脾脏淋巴细胞转化功能。干地黄水煎液对类阴虚小鼠的脾脏B 淋巴细胞功能也有明显的增强作用,但其作用弱于鲜地黄汁。结论:历史上用鲜地黄汁或鲜地黄水煎液治疗某些疾病( 如出血性疾病) 有其科学道理,在临床应用上最好遵循之。  相似文献
3.
4.
目的:研究左归丸含药血清对间充质干细胞骨向分化过程中碱性磷酸酶含量变化的影响。方法:采用全骨髓贴壁法培养间充质干细胞,连续进行3次差速贴壁法纯化间充质干细胞。常规诱导组以β-甘油磷酸钠、地塞米松、维生素C诱导间充质干细胞骨向分化,实验组在常规诱导组基础上加以左归丸含药血清。使用茜素红染色钙结节、碱性磷酸酶染色鉴定诱导成功。分别在0,7,14,21 d用比色法检测细胞中碱性磷酸酶含量。结果:全骨髓贴壁法和差速贴壁法联合使用可得到较为均一间充质干细胞。用比色法测得碱性磷酸酶含量随着诱导时间延长而增加。结论:大鼠间充质干细胞经药物诱导后可以分化为成骨细胞。左归丸含药血清能够促使诱导过程中碱性磷酸酶含量表达增加。  相似文献
5.
肠上皮细胞模型不同培养条件的优化及适应性研究   总被引:2,自引:1,他引:1       下载免费PDF全文
目的:建立肠上皮(Caco-2)细胞单层模型,探讨不同培养条件对细胞单层模型的影响,优化适宜的条件,提供稳定、重复性好的Caco-2细胞模型。方法:将细胞接种Transwell培养板上进行体外培养,并比较3种Transwell培养板及包被鼠尾胶原蛋白对细胞单层的影响,通过透射电镜和倒置显微镜观察细胞单层的形态学特征,通过测定细胞单层的电阻值、细胞两侧碱性磷酸酶含量、荧光素钠的透过量验证细胞单层的完整性、极性、通透性。结果:经过21 d培养,24孔Transwell培养的细胞单层的完整性、极性高于12孔Transwell培养的细胞单层,而透过性低于12孔Transwell培养的细胞单层;包被鼠尾胶原蛋白的Transwell于细胞单层生长前期跨上皮细胞电阻值(transepithelium electrical resistance,TEER)迅速升高,对细胞单层生长的中后期无显著性影响。结论:3种Transwell均可成功培养Caco-2细胞单层,24孔站立式Transwell适用于样品需求量少、检测灵敏度高的物质,可应用于大量样品的高通量筛选;12孔悬挂式Transwell提供检测的样品量和透过率较大,适于实验室的常规操作和常用仪器的样品需求。  相似文献
6.
目的:观察不同产区苍术的不同提取部位体外对成骨细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响。方法:分别以苍术生药量1×10-4,1×10-6 g.mL-1 2个质量浓度进行新生大鼠成骨细胞、MG-63成骨细胞株增殖和碱性磷酸酶活性测定。结果:茅苍术对大鼠成骨细胞、MG-63成骨细胞株增殖的效果比北苍术好;在挥发油、水煎液、醇提液3个不同提取部位比较中,发现水煎液的效果较好,且道地产区茅苍术的效果最佳,对成骨细胞、MG-63细胞株增殖率分别是11.27%,13.57%;大鼠成骨细胞的ALP活性测定,以茅苍术的水煎液和挥发油的碱性磷酸酶活性最高,均为5.22 U.L-1。结论:苍术类药材对骨质疏松症的治疗有一定的疗效,且茅山地区产茅苍术水煎液对MG-63细胞株、成骨细胞增殖效果最佳。  相似文献
7.
目的:观察舒肝健骨方对成骨样细胞增殖分化的影响,并检测舒肝健骨方是否有雌激素活性.方法:培养成骨样细胞MG-63,给予不同浓度的舒肝健骨方处理后,MTT法检测复方对MG-63细胞增殖的影响;对硝基苯酚法检测复方对MG-63细胞碱性磷酸酶(Alkaline phosphataae,ALP)活性的影响.培养MCF-7细胞,转染萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶质粒,双荧光素酶报告基因检测试剂检测复方雌激素活性.结果:舒肝健骨方在处理MG-63细胞48,72 h时,0.75~12 g·L-1的剂量能促进成骨样细胞增殖,并且呈现剂量依赖性;在作用24,48,72 h时,促进成骨样细胞碱性磷酸酶活性,呈剂量依赖性.舒肝健骨方的雌激素活性与阴性对照相比无统计学差异,与阳性对照雌二醇相比有显著性差异(P<0.05).结论:舒肝健骨方能够促进成骨样细胞的增殖分化,并且无雌激素活性.  相似文献
8.
中药复方对模拟失重大鼠骨代谢的影响   总被引:1,自引:1,他引:5  
目的:观察中药复方对尾部悬吊模拟失重大鼠骨代谢的影响。方法:50只Wistar大鼠按随机区组实验设计法分成正常组、模型组、悬吊中药低(3.52g·kg-1)、中(7.04g·kg-1)、高剂量(14.08g·kg-1)组,每组10只,实验周期21d。造模前7d悬吊中药3个剂量组给予中药复方,空白与模型组给予蒸馏水灌胃,每日1次。第8天灌胃1h后,模型组与悬吊中药3个剂量组尾部悬吊,正常组大鼠笼中自由活动,继续饲养14d。实验结束,检测各组动物血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、股骨羟脯氨酸(HOP)含量及股骨、腰椎骨密度(BMD)的变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠血清ALP显著降低(P<0.05),BGP,TRAP含量无明显变化,股骨、腰椎BMD明显降低(P<0.05);与模型组相比中药各剂量组血清ALP含量无显著变化,中药中剂量组血清BGP显著增高(P<0.05),中药中、高剂量组血清TRAP显著降低(P<0.05),中药中剂量组股骨BMD显著增加(P<0.05)。结论:中药复方能明显促进骨形成作用,有效抑制骨吸收作用,减弱溶骨过程从而促进骨矿盐的沉积和矿化,增强BMD而达到防治骨丢失的作用;有效的防护和治疗失重性骨丢失采取联合措施很有必要。  相似文献
9.
电针对急性心肌缺血的微血管酶和儿茶酚胺荧光的作用   总被引:1,自引:1,他引:4  
文琛  曹庆淑 《针刺研究》1993,18(3):223-227
以碱性磷酸酶(ALP)、镁激活的腺苷三磷酸酶(Mg~(2+)-ALP_(ase))和儿茶酚胺(CA)荧光组化方法观察了电针对急性心肌缺血作用的机理。结扎左冠状动脉心室支30分钟后,缺血心肌中以 ATP 显示的毛细血管大为减少,长度缩短;而缺血电针组则有显著意义增加,说明电针对缺血心肌微循环和转运功能的改善。Mg~(2+)-ATP_(ase)可显示心肌微血管的质膜和基膜;经显微分光光度计测量,Mg~(2+)-ATP_(ase)在缺血电针组比缺血对照组光密度增加,这可加强缺血心肌 Na~+K~+离子跨膜转动功能。心肌儿茶酚胺荧光所显示的交感肾上腺素能膨体神经末梢;缺血后减少或耗竭,电针组则较多而亮,这有益于加强缺血心肌的收缩力。  相似文献
10.
成骨活跃指标—骨特异性碱性磷酸酶   总被引:1,自引:1,他引:0  
许多病理情况都可表现为体内成骨活跃,如骨肿瘤、骨折愈合过程等。血浆碱性磷酸酶是成骨活跃的生化指标之一,但其可来源于多种组织,而缺乏特异性。用血浆骨特异性碱性磷酸酶(BSAP)的测定作为成骨活跃的指标则更为可靠。本文对其应用价值进行了临床观察。  相似文献
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