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1.
丹参毛状根培养的建立和丹参酮的产生   总被引:43,自引:8,他引:35       下载免费PDF全文
丹参毛状根培养的建立和丹参酮的产生张荫麟,宋经元,吕桂兰,刘惠灵(中国医学科学院药用植物研究所北京100094)丹参SalviamiltiorrhizaBunge是治疗心血管系统疾病的重要中革药,主要成分如丹参酮具有活血、抗菌等活性,同时也是一种红色色素。利用细胞培养方法来生产这些活性成分,不仅对满足临床用药需要有重要意义,作为一种具有生理活性的色素开发也有良好前景。植物毛状根培养是80年代发展起来的植物基因工程和细胞工程相结合的?...  相似文献
2.
Ri质粒人参转化系统的建立及鉴定   总被引:32,自引:2,他引:30       下载免费PDF全文
目的 :建立人参毛状根转化体系。方法 :利用含有Ri质粒的发根农杆菌Agrobacterium rhizogenes感染人参Panax ginseng进行毛状根诱导 ,利用PCR技术及TLC分析方法对毛状根进行鉴定。 结果 :首次从人参带叶幼茎处诱导出毛状根 ,用激素和AS(乙酰丁香酮 )处理可提高转化率并缩短转化时间。毛状根在无激素B5培养基上生长并失去向地性 ,月增长倍数可达 50倍 (鲜重 )。PCR分析证实农杆菌Ri质粒含有rolC序列 (564bp)的T DNA已整合到人参转化株的染色体组中 ,TLC分析证明T DNA特异的表达产物冠瘿碱在转化细胞中合成。人参毛状根中人参总皂苷含量为 2.486% (干重 ) ,而人参原药材总皂苷含量为 1.403% (干重 )。结论 :人参毛状根生长迅速 ,皂苷含量高于原药材 ,该体系的建立为利用生物技术工业化生产人参活性成分奠定了基础。  相似文献
3.
人参毛状根生物合成熊果苷的研究   总被引:20,自引:0,他引:20       下载免费PDF全文
目的 :研究人参毛状根生物合成熊果苷的基本条件。方法 :以熊果苷的含量、氢醌 (1,4-对苯二酚 )的转化率为指标 ,找出适于生物合成的培养条件、持续时间和底物浓度。结果 :培养 22d的人参毛状根更换含底物的B5培养基后 ,对浓度为 2mmol·L-1的氢醌持续转化 24h ,所合成的熊果苷占干重的 13.0% ,转化率达 89.0%。结论 :本文首次以人参毛状根为反应器 ,人工合成出人参属植物所不具有的熊果苷。  相似文献
4.
黄芪毛状根药理作用的研究   总被引:20,自引:0,他引:20       下载免费PDF全文
目的 :了解黄芪毛状根的药理作用。方法 :口服给药 ,观察黄芪毛状根对D 半乳糖所致衰老小鼠记忆力的影响及抗氧化作用 ;制备大鼠肾缺血再灌注模型 ,测定黄芪毛状根对肾组织超氧化物歧化酶 (SOD)活性及丙二醛 (MDA)含量的影响 ;测定环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠口服黄芪毛状根后NK细胞活性。结果 :黄芪毛状根能改善衰老小鼠记忆力 ,提高脑、肝组织SOD活性 ,降低肝脏MDA含量 ;能降低缺血再灌注大鼠肾MDA含量及血肌酐浓度 ;能提高免疫功能低下小鼠NK细胞活性。结论 :与天然黄芪相似 ,黄芪毛状根具有抗衰老、抗过氧化及免疫调节作用。  相似文献
5.
单俊杰  王易  翁颖琦  谢长宜  刘涤  胡之璧 《中草药》2002,33(12):1096-1099
目的 比较生物技术培养的黄芪毛状根中多糖与栽培黄芪中多糖的化学组成和免疫活性。方法 采用乙醇分级沉淀和凝胶渗透柱层析分离纯化多糖;硫酸-苯酚法测定多糖含量;完全酸水解、乙酰化、气相色谱测定单糖组成;采用免疫器官重量,腹腔巨噬细胞吞噬细胞吞噬功能,溶血素生成,[^3H]-TdR掺入,诱生IFN-γ的含量测定等方法研究免疫活性。结果 黄芪毛状根中多糖为1.85%,黄芪中多糖为2.61%。黄芪毛状根多糖(HAPS)由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,摩尔比为1:2.26:0.21:0.74:2.49:19.47。黄芪多糖(APS)组成与HAPS相同,摩尔比为1:4.34:3.92:1.95:11.41:20.52。采用乙醇分级沉淀各自获得3个部分多糖,经DEAE-Sepharose FF柱层析表明:HAPSI和APSI,HAPSⅡ和APSⅡ图谱相似,HAPSⅢ与APSⅢ有一定的差异。HAPS和APS均能显著增加小鼠脾脏重量;HPAS能提高小鼠胸腺重量;二者均增加小鼠腹腔巨噬细胞数量;APS显著促进小鼠腹腔巨大噬细胞巨噬功能;HAPS和APS均抑制小鼠溶血素生成;促进小鼠脾淋巴细胞增殖;APS使脾淋巴细胞诱生IFN-γ的作用高于HAPS。结论 HAPS和APS化学组成相似,二者具有相同的免疫活性,只是强度略有差异。  相似文献
6.
目的:研究茉莉酸甲酯(methy jasmonat,MJ)对丹参酮类成分的积累和向培养基中的释放的影响。方法:6-7V 悬浮振荡培养ATCC15834 农杆菌诱导的丹参毛状根培养18 d后,液体培养基中加入化学诱导子——茉莉酸甲酯,采用HPLC 的方法,测定MJ处理后不同时间段(2,6,9 d)丹参毛状根中隐丹参酮、丹参酮IIA 的含量以及其在培养基中的含量。结果:毛状根经MJ处理后2,6,9 d隐丹参酮的含量分别达0.039,0.204,0.572 mg·g-1,分别是同时期未经MJ处理的2.2,8.5,23.8倍;丹参酮IIA的含量达0.251,0.601,1.563 mg·g-1,分别是同时间期未经MJ处理丹参毛状根的1.9,4.1,6.2倍。结论:MJ能显著促进丹参毛状根中丹参酮类成分的积累并向培养基中释放。  相似文献
7.
长春花毛状根培养及抗癌生物碱产生的研究   总被引:15,自引:3,他引:12       下载免费PDF全文
孙敏  曾建军 《中国中药杂志》2005,30(10):741-743
目的:建立长春花毛状根转化体系,从毛状根中获得生物碱。方法:用发根农杆菌A4和R1000菌株分别感染长春花的不同外植体获得毛状根,并对毛状根的培养条件进行优化。结果:采用A4感染叶片,分别预、共培养2d及添加100mg·L-1的乙酰丁香酮(As)可得到最佳转化效果,毛状根的诱导率达86.25%。以蔗糖为碳源及以水解乳蛋白为氮源的1/2MS培养基为毛状根的最佳生长条件。检测结果表明,毛状根中的总生物碱含量高于长春花的原植株和愈伤组织。结论:可通过毛状根的培养来获得抗癌生物碱长春碱和长春新碱等。  相似文献
8.
用RP-HPLC法测定黄芪毛状根中黄芪甲苷的含量   总被引:14,自引:0,他引:14       下载免费PDF全文
RP-HPLC法对黄芪毛状根中黄芪甲苷进行定量分析,在实验条件下,黄芪甲苷标准品在10.64~53.20μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率为92.66%,精密度试验相对标准偏差为4.20%和2.40%测得黄芪毛状根中黄芪甲苷的含量为0.14%(干重)。  相似文献
9.
农杆菌介导的药用植物的转化   总被引:12,自引:0,他引:12       下载免费PDF全文
目的 :介绍农杆菌转化药用植物的概况。方法 :从外植体选择、转化的证实、转基因组织和器官培养生产次生物质、转基因植物的获得等方面棕述了农杆菌转化药用植物的概况 ,重点论述毛状根和冠瘿组织培养生产次生物质的研究进展。结果 :利用转基因组织和器官培养能生产多种次生物质 ,通过农杆菌介导的转化可获得转基因药用植物。结论 :农杆菌介导的转化在药用植物基因工程方面应用广泛 ,意义重大。  相似文献
10.
野葛毛状根的诱导及离体培养   总被引:11,自引:0,他引:11       下载免费PDF全文
目的; 野葛毛状根的诱导和无激素离体培养。 方法:用含超强毒性基因的发根农杆菌R1601与野葛离体叶片共培养。 结果:经感染的野葛叶片表面直接形成大量生长快、分枝多、负向地性的毛状根,毛状根离体培养具有抗卡那霉素特性和激素自给特征。 结论:建立了发根农杆菌诱导野葛毛状根的方法和野葛毛状根的离体培养系统。  相似文献
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