骨肉瘤差异表达基因的生物信息学分析及关键基因筛选

目的筛选成骨型骨肉瘤与正常成骨细胞的差异表达基因, 寻找成骨型骨肉瘤发生、发展的关键基因。方法从Gene Expression Omnibus(GEO)数据库获得正常成骨细胞和骨肉瘤组织的基因表达数据集GSE33382, 采用R语言的limma包筛选正常成骨细胞和成骨型骨肉瘤的差异表达基因, 对差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。采用String数据库构建蛋白交互网络, 应用Cytoscape软件的分子复合物检测(MCODE)插件筛选互作网络中的网络模块, 应用Cytoscape软件中的BiNGO模块对MCODE筛选得到的前3个主要模块所包含的差异表达基因进行基因本体(GO)富集分析。采用MCC算法筛选蛋白互作网络中前10个关键基因。从GEO数据库获得骨肉瘤的基因表达和生存数据集GSE39055, 采用Kaplan-Meier法进行生存分析。选取2005年1月至2015年12月福建医科大学附属第一医院收治的48例成骨型骨肉瘤患者的资料进行验证, 采用免疫组化法测定骨肉瘤组织中STC2蛋白的表达, 结合患者的临床资料进行生存分析。结果从GSE33382数据集...     

四肢骨肉瘤保肢治疗与预后影响因素分析

目的探究四肢骨肉瘤保肢治疗与预后的危险因素。方法 89例四肢骨肉瘤患者行保肢治疗后随访3年,依据3年预后结局分为生存组(71例)与死亡组(18例),比较两组患者临床特征,分析死亡的相关因素,将相关因素代入Cox比例风险模型分析危险因素。结果生存组及死亡组四肢骨肉瘤患者Enneking分期及是否术后肺转移、治疗后病理性骨折、术前乳酸脱氢酶升高、完成化疗情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。术后出现肺转移、未完成化疗及Enneking分期为Ⅱ期或Ⅲ期为四肢骨肉瘤保肢治疗后3年内死亡的危险因素(P﹤0.05)。结论尽早确诊、尽早治疗、积极预防病理性骨折、完成规范化疗及预防肺转移的发生能够辅助提高四肢骨肉瘤患者保肢治疗后的生存率。     

Wnt/β-catenin信号转导通路对骨肉瘤癌干细胞的调节作用

部分骨肉瘤患者对化疗缺乏有效反应,其耐药机理目前尚不明确。骨肉瘤的难治性、复发转移和抗药性与癌干细胞有关。癌干细胞可通过细胞表面特异性标记物、侧群细胞、细胞球形成等进行辨别。多项研究发现,骨肉瘤中存在Wnt/β-catenin信号转导通路的异常表达。通过调控该信号转导通路可改变骨肉瘤癌干细胞的特性,抑制骨肉瘤的增殖、复发和远处转移。该文对Wnt/β-catenin信号转导通路对骨肉瘤癌干细胞的调节作用及治疗前景作一综述。     

外泌体在骨肉瘤侵袭转移及耐药性中的研究进展

骨肉瘤(osteosarcoma)是一种具有高度侵袭性的恶性肿瘤，已成为青少年人群中导致癌相关死亡的首要疾病。但由于其早期高发的肺转移率以及广泛的对化疗药物耐药性问题，骨肉瘤在临床上的治疗仍存在巨大挑战。目前，骨肉瘤的早期诊断及基因治疗已经在国内外的基础研究和临床应用中取得了一定的进展，其中外泌体(exosomes)在骨肉瘤中的诊断治疗具有极大的应用前景。外泌体是一种可由多种活细胞分泌的纳米级(40~100 nm)微囊泡，它具有传递mRNA、miRNA、DNA和蛋白质等各种信息和功能性物质的功能。它可由多种活性细胞产生和分泌，存在于多种体液和细胞间液中。由于其特殊的存在和传递形式以及所搭载的信息和物质，因此，骨肉瘤来源的外泌体可通过多种途径和方式促进骨肉瘤的发生、侵袭转移、耐药性及免疫逃逸。利用这些特点，外泌体可被人为搭载靶向药物或治疗性基因等物质，或通过多种方式对其分泌和释放进行调控来治疗多种肿瘤。近年来，关于外泌体在骨肉瘤方面作用和应用的研究成为热点，但仍停留在基础研究且尚未在临床的诊断及治疗中进行应用。本文旨在对外泌体在骨肉瘤侵袭转移及耐药性上的作用机理、临床诊断、治疗方面的研究进展进行总结，望有助于为利用外泌体诊断、治疗和改善骨肉瘤预后提供参考。      

围术期心理护理干预对骨肉瘤手术患者应激状态的影响

目的探讨围术期心理护理干预对骨肉瘤手术患者应激状态的影响。方法选取2017年1月至2018年6月间陕西省安康市中心医院收治的72例拟进行手术治疗的骨肉瘤患者进行回顾性分析,将采用常规围术期护理干预的36例患者纳入对照组,采用常规围术期护理干预基础上强化开展心理护理干预的36例患者纳入干预组。比较两组患者生理应激、心理应激状态及手术治疗情况。结果干预后,干预组患者的血压控制水平和心率水平均优于对照组患者,且干预组患者的抑郁评分量表(SAS)、焦虑自评量表(SDS)和症状自评量表(SCL-90)评分均低于对照组患者,干预组患者卡氏功能状态评分高于对照组患者,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论开展围术期心理护理干预能有效降低骨肉瘤手术患者的生理和心理应激状态,提升治疗依从性,改善预后。     

HSP90β干扰和过表达慢病毒载体的构建及其在骨肉瘤细胞Saos-2中的表达

目的:获得热休克蛋白90β(HSP90β)基因干扰和过表达慢病毒表达系统，并检测其在人骨肉瘤细胞株Saos-2中的表达水平。方法:设计合成shRNA，以慢病毒表达质粒构建HSP90β干扰和过表达载体，酶切电泳、测序技术鉴定载体构建是否成功。重组病毒转染H1299细胞，以嘌呤霉素筛选稳定转染的Saos-2细胞，通过荧光显微镜观察计数获得转染效率。将感染好的细胞分为干扰NC组（NEG-shRNA）、干扰组（shRNA-HSP90β）、过表达NC对照组（NEG-pEZ）及过表达组（pEZ-HSP90β）。通过qRT-PCR 与Western blotting 分别从mRNA 和蛋白表达水平验证目的基因的干扰和过表达水平。结果:插入慢病毒表达载体的基因片段与目的基因的碱基序列完全一致。病毒包装成功后，嘌呤霉素最小致死浓度1 μg/ml，感染复数200，感染人Saos-2的感染效率达80%，其中shRNA-HSP90β组干扰效率为86.35%，pEZ-HSP90β组的mRNA相对表达量增加2.8倍。进一步研究发现，shRNA-HSP90β组较NEG-shRNA组中HSP90β蛋白表达明显降低，pEZ-HSP90β组较NEG-pEZ组HSP90β蛋白表达增加。结论:HSP90β基因干扰和过表达慢病毒载体构建成功，并能够在Saos-2中稳定表达。     

Wnt/β-catenin信号通路在骨肉瘤防治中的研究进展

Wnt/β-catenin信号通路是调节细胞发育和生长的一个关键途径[1]。在正常情况下对胚胎发育和器官的形成和功能起着重要的调节作用,此通路的失调参与人类多种肿瘤的发病过程[2]。骨肉瘤是儿童和青少年长骨干骺端常见的原发性恶性骨肿瘤,以产生骨样基质为病理特征,具有高度异质性、高复发率、多药耐药性、早期易肺转移等特点[3]。以外科手术联合甲氨蝶呤、顺铂等新辅助化疗的应用,使骨肉瘤患者的5年生存率提高到75%左右[4],但却不能有效地降低总病死率和改善整体预后,出现转移或复发的患者5年生存率<20%[5]。研究表明Wnt/β-catenin信号通路参与骨肉瘤细胞的生长、侵袭和转移,并有效诱导骨肉瘤的耐药和再生,是介导骨肉瘤发生和发展的一个重要因素[6]。