PLSCR1在苦参碱逆转APL细胞维甲酸耐药中的意义

目的 观察磷脂爬行酶1（phospholipid scramblase 1, PLSCR1）在苦参碱（matrine, MAT）诱导维甲酸（all-trans retinoic acid, ATRA）耐药急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia, APL）细胞分化的表达,并探讨其与环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate, cAMP）/蛋白激酶A（protein kinase A, PKA）途径的相关性。 方法 以ATRA敏感的APL细胞系NB4以及ATRA耐药株NB4-R1为研究对象。通过NBT还原实验以及流式细胞仪（CD11b）检测0.1 mmol/L MAT联合 1 μmol/L ATRA对两细胞株分化标记的影响;〖JP〗采用Western blot、实时荧光定量PCR技术测定细胞PML/RARα、PLSCR1蛋白及基因表达;同时应用PKA拮抗剂H89联合作用,观察细胞分化抗原及上述蛋白/基因表达的变化。 结果 MAT联用ATRA能明显提高NB4-R1细胞NBT及CD11b阳性率,并显著下调PML/RARα融合蛋白/基因的表达（ P <0.05, P<0.01）。单用ATRA能使NB4细胞PLSCR1在蛋白及mRNA水平表达均得到明显增强（ P <0.01）,而在NB4-R1细胞内同样表达上调,但仅蛋白水平差异有统计学意义（ P <0.01）。在联用MAT后,两细胞株PLSCR1蛋白表达进一步上升（ P <0.01）,并且NB4-R1细胞mRNA表达水平差异有有统计学意义（ P <0.05）。上述作用均能被10 μmol/L H89 逆转（ P <0.05, P <0.01）。 结论 MAT联合ATRA能显著诱导NB4-R1细胞获得再分化,同时抑制PML/RARα融合基因/蛋白的表达,这可能与其上调PLSCR1表达有关