补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症肾阳虚血瘀证模型大鼠HIF-1α、PHD2、VHL表达的影响

目的观察补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症(endometriosis,EM)肾阳虚血瘀证模型大鼠缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)、脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)、希佩尔-林道抑癌基因(von Hippel Lindau disease,VHL)表达的影响,探讨EM发病机制及补肾温阳化瘀方治疗EM的作用机制。方法将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、中药组、西药组,每组10只。其中正常组、假手术组常规饲养,模型组、中药组、西药组采用"延长冰箱冷冻加冰水浸泡"30天,再结合"自体移植法"创建EM肾阳虚血瘀证模型。术后中药组给予补肾温阳化瘀方(3.33 g/mL)1mL灌胃,西药组予以孕三烯酮0.5 mg/(kg·d)灌胃,模型组、正常组、假手术组灌服等体积的生理盐水,共给药4周。观察大鼠异位灶大小及形态,放免法检测血清CA125、血浆环磷酸腺苷(cAMP)、血浆环磷酸鸟苷(cGMP)的表达,HE染色光镜观察子宫在位内膜及异位组织形态学的变化,免疫组化SABC法、Western blot法检测HIF-1α、PHD2、VHL蛋白表达及含量,RT-PCR方法检测HIF-1α、PHD2、VHL mRNA表达。结果模型组大鼠异位灶生长明显,中药组、西药组治疗后,异位灶体积明显缩小。与正常组及假手术组比较,模型组CA125及cGMP水平明显升高,cAMP水平明显降低(P0.05);HIF-1αmRNA、蛋白表达及含量均升高(P0.05),PHD2、VHL mRNA、蛋白表达及含量均降低(P0.05)。与模型组比较,中药组及西药组CA125及cGMP水平明显降低,cAMP水平明显升高,HIF-1αmRNA、蛋白表达及含量均降低,PHD2、VHL mRNA、蛋白表达及含量均升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与中药组比较,西药组PHD2蛋白含量更高(P0.05)。HIF-1α与PHD2呈负相关(r=-0.799,P=0.00),HIF-1α与VHL呈负相关(r=-0.625,P=0.003)。结论补肾温阳化瘀方可有效治疗EM,其作用机制可能与降低HIF-1α、CA125、cGMP含量,上调PHD2、VHL、cAMP表达有关。     

补肾调经方对人卵泡壁颗粒细胞BMP/Smads表达的影响

目的 研究补肾调经方对人卵泡壁颗粒细胞Smad1（drosophila mothers against decapentaplegic protein 1）、Smad5、 Smad8及 Smad4表达的影响。方法 将66例接受体外受精－胚胎移植（in vitro fertilization embryo transfer,IVF ET）不孕症患者按1∶2的比例分为中药加长方案控制性超排卵组（简称治疗组, 23例）和长方案控制性超排卵组（简称对照组, 43例）。应用实时荧光定量PCR（real time PCR）法测定取卵日成熟卵泡壁颗粒细胞Smad1、Smad5、Smad8、 Smad4 mRNA的表达;应用细胞免疫荧光方法观察两组颗粒细胞Smad1、Smad5、 Smad8和 Smad4蛋白的表达。结果 治疗组颗粒细胞Smad1 mRNA及蛋白表达显著高于对照组（P<0.05）; 两组Smad5、Smad8和 Smad4 mRNA及蛋白表达差异无统计学意义。结论 补肾调经方提高妊娠率、改善卵巢功能的机制可能与上调壁颗粒细胞Smad1 mRNA和蛋白的表达有关。