OATP1B1基因多态性与利福平临床肝毒性的相关性研究

目的考察有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)基因多态性、利福平稳态谷浓度及肝毒性之间的相关性。方法入选90例结核病患者,连续多次服用同等剂量的利福平,34例患者出现肝损伤,56例患者未出现肝损伤,用液质联用法测定利福平稳态谷浓度,用限制性片段长度多态性聚合酶链反应方法(RFLPPCR)对OATP1B1 388A>G进行基因分型,对OATP1B1 388A>G不同基因型与利福平血药浓度、肝毒性的相关性进行分析。结果 90例患者中,OATP1B1388A>G总野生型68例,总突变型22例,总突变率为24.44%,其中肝损伤组突变型3例,肝功能正常组突变型19例。突变型个体利福平谷浓度为(5.63±4.16)ng·mL^-1,野生型个体利福平谷浓度为(1.64±4.81)ng·mL^-1,前者约为后者的3.43倍;肝功能正常组利福平谷浓度为(3.82±5.80)ng·mL^-1,肝损伤组利福平谷浓度为(0.64±1.85)ng·mL^-1,前者相当于后者的5.97倍;肝功能正常组OATP1B1 388A>G突变率为33.93%,为肝损伤组的3.85倍;野生型患者肝损伤发生率为45.59%,相当于突变型患者的3.34倍。结论 OATP1B1 388A>G基因位点突变对中国人体内利福平的稳态谷浓度、肝毒性的发生有显著影响。     

卡介苗免疫小鼠T淋巴细胞亚群表达穿孔素与抗结核作用的相关性

目的 探讨卡介苗免疫小鼠抗结核作用和T细胞亚群表达穿孔素的相关性.方法 120只清洁级KM雄性小鼠分为2个对照组(各20只)、2个卡介苗组(各20只)、攻毒组(20只)和结核病组(20只).2个卡介苗组与攻毒组小鼠腹部皮内接种卡介苗,接种3个月后攻毒组和结核病组小鼠接受MTB攻击,同时对照1组和卡介苗1组小鼠取血后处死.攻毒组和结核病组小鼠于接受MTB攻毒1个月后与对照2组和卡介苗2组小鼠取血后处死.观察所有小鼠的肺、肝和脾组织病理学改变,并经组织匀浆涂片查找抗酸杆菌和MTB培养.流式细胞仪检测分析血液标本中表达穿孔素的T细胞亚群计数及其占总淋巴细胞百分率.多组间免疫学指标的比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验.结果 结核病组小鼠的肺、肝和脾组织均有结核病表现,1个月内死亡11只,其他3组小鼠均未发现结核病表现,也无死亡鼠.卡介苗组小鼠表达穿孔素的CD8+T细胞数[(5.9±0.9)×103]明显高于对照组[(4.8±0.8)×103],差异有统计学意义(F=42.24,P＜0.01);结核病组小鼠表达穿孔素的CD+百分率[(5.6±0.9)%]明显低于卡介苗组[(7.3±1.1)%],差异有统计学意义(F=35.51,P＜0.05);攻毒组小鼠获得卡介苗免疫后,在致病量MTB攻击下表达穿孔素的CD3+、CD8+和CD4+ CD8+ T细胞数[(20.1±5.5)×103、(8.7±0.4)×103和72±19]及其占总淋巴细胞百分率[(23.3±3.3)%、(10.7±1.6)%和(0.084±0.015)%]均明显高于对照组[(11.1 ±3.0)×103、(4.8±0.8)×103和30±7及(14.9±1.7)%、(6.7±0.9)%和(0.040±0.006)%]、卡介苗组[(13.0±3.2)×103、(5.9±0.9)× 103和36±5及(15.5±1.7)%、(7.3±1.1)%和(0.044±0.007)%]及结核病组[(12.6±1.6)×103、(5.0±0.1)×103和31±3及(14.0±1.7)%、(5.6±0.9)%和(0.035±0.005)%],CD4+/CD8+比值(0.54±0.17)明显低于对照组(0.76±0.22),差异均有统计学意义(F值为4.54～74.98,均P＜0.05或P＜0.01).结论 卡介苗免疫主要诱导表达穿孔素的CD8+ T细胞水平升高,在致病量MTB攻击下卡介苗免疫小鼠不发生结核病,可能与表达穿孔素的CD3+、CD8+和CD4+ CD8+ T细胞水平升高相关;穿孔素表达水平高低可能是判断宿主抗结核免疫力强弱的重要标志之一.     

β-环糊精-聚乙二醇-α-常春藤皂苷自组装胶束的制备和抗肿瘤活性研究

目的研究β-环糊精-聚乙二醇-α-常春藤皂苷自组装胶束的制备、溶血性和体内外抗肿瘤活性。方法采用自组装方法制备了β-环糊精-聚乙二醇-α-常春藤皂苷的纳米胶束,考察了胶束在大鼠全血中的溶血性,研究了胶束在不同细胞上的体外活性,以荷HT29肿瘤细胞的小鼠为模型,研究了胶束的体内抗肿瘤活性。结果β-环糊精-聚乙二醇-α-常春藤皂苷在水性介质中能自组装成粒径较小的纳米胶束。该胶束能显著降低α-常春藤皂苷的溶血性;在体外细胞实验中,胶束的抗肿瘤活性明显低于α-常春藤皂苷,这可能与在体外环境中α-常春藤皂苷不能从胶束中释放出来有关。β-环糊精-聚乙二醇-α-常春藤皂苷自组装胶束在HT29荷瘤小鼠体内显示非常好的抗肿瘤活性。结论β-环糊精-聚乙二醇-α-常春藤皂苷自组装胶束为皂苷的减毒增效提供了一个非常好的研究模式。     

HPLC法测定栀子超微速溶饮片中栀子苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定栀子超微速溶饮片中栀子苷含量。方法采用Hypersil ODS2 C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流速:1.0mL/min,流动相:乙腈-水(15︰85);检测波长:238nm,柱温30℃。结果栀子苷进样量在0.2026～2.0260μg(r2=0.9999,n=6)范围内与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率为99.94%(RSD=1.28%,n=6)。结论该测定方法简便、准确、灵敏度高,可作为质量控制方法。     

护肝药对抗结核药物性肝损害患者的预防作用评价

目的:评价护肝药对抗结核药物性肝损害(ATDH)患者的预防作用。方法:选取2014年9月—2015年10月接受异烟肼、利福平、吡嗪酰胺和乙胺丁醇抗结核药物治疗的结核患者300例,随访3月,并检测其实验室肝功能各指标。结果:其中287例患者占95.67%的结核患者预防性使用护肝药物,预防性护肝药物主要有益肝灵、水飞蓟宾、甘草酸制剂、双环醇、葡醛内酯和还原性谷胱甘肽等;预防性使用护肝药的患者肝损害发生率为3.83%(11/287),与文献报道的抗结核药物性肝损害的发生率为3%~10%,经比较两者之间的差异无统计学意义(χ~2=0.419,P>0.05)。结论:护肝药物对抗结核药物性肝损害的预防意义不大,应根据患者基础情况确定是否需要预防性使用护肝药。     

抗结核药过敏反应与人类白细胞抗原-DRB基因多态性的相关性

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)DRB基因多态性与中国汉族人群服用抗结核药出现过敏反应的相关性。方法用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法,对35例使用抗结核药物后出现过敏反应患者和42例未出现过敏反应的患者血样进行HLA-DRB等位基因分析。结果发生过敏组和未发生过敏反应组的DR7基因频率分别为10.0%和1.2%,差异有统计学意义(RR=10.25,P<0.05)。结论 DR7可能为抗结核药过敏反应的易感基因。     

依达拉奉治疗３０例急性脑梗死的临床观察

目的：探讨急性脑梗死应用依达拉奉治疗的临床疗效。方法：选取急性脑梗死患者60例,随机分为观察组和对照组,每组各30例。观察组给予依达拉奉治疗,对照组给予等剂量安慰剂治疗,并比较两组疗效。结果：观察组治疗后神经功能缺损程度评分为（9.8＆#177;2.3）分,明显小于对照组（P＜0.05）;共28例患者治疗有效,明显大于对照组（P＜0.05）;两组不良反应发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：依达拉奉在急性脑梗死的治疗中安全、有效,值得临床推广应用。     

HPLC法测定吴茱萸超微速溶饮片中吴茱萸碱、吴茱萸次碱及柠檬苦素的含量

目的建立一种同步测定吴茱萸超微速溶饮片中吴茱萸碱,吴茱萸次碱及柠檬苦素含量的高效液相色谱方法。方法采用Hypersil ODS2C18柱(4.6mm×250mm,5μm),岛津LC-20AD高效液相色谱仪,流动相为乙腈-水-四氢呋喃-冰醋酸(34:64.7:1.1:0.2),流速:1.0mL/min,检测波长:225nm,柱温:30℃。结果吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素进样量分别在0.1016～2.032μg(r2=0.9999,n=6)、0.0974～1.948μg(r2=0.9999,n=6)、0.7010～14.02μg(r2=0.9999,n=6)范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率分别为100.37%(RSD=1.29%,n=6)、99.11%(RSD=0.83%,n=6)、99.30%(RSD=0.52%,n=6)。结论该测定方法简便,测定结果准确,重复性好,可作为质量控制方法。     

噻托嗅胺治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病临床分析

目的探讨吸入噻托嗅胺对慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者的治疗效果。方法将30例COPD患者随机分成2组,治疗组给予噻托嗅铵吸入,对照组给予常规治疗,比较2组治疗前后肺功能、6min步行距离并评价临床症状积分。结果治疗组FEV1／FVC以及FEV1占预计值百分比明显增加,6min步行距离、临床症状明显改善,而对照组无明显改善。2组治疗后各项指标比较,差异具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论吸入长效M受体阻滞剂噻托溴胺可有效改善肺功能并缓解临床症症状,提高患者的生活质量。