痔瘘熏洗剂治疗痔疮的作用机制研究

目的 探讨痔瘘熏洗剂治疗痔疮的作用机制。方法 通过TCMSP平台收集痔瘘熏洗剂的活性成分,利用Swiss Target Prediction平台预测活性成分靶点,OMIM数据库、GeneCards数据库和TTD数据库检索疾病靶点。药物靶点与疾病靶点交集后,利用String数据库和Cytoscape软件构建蛋白互作网络及“成分-潜在靶点”网络筛选核心靶点与核心成分,采用Metascape数据库进行GO分析及KEGG通路分析筛选治疗相关通路,预测痔瘘熏洗剂治疗痔疮的作用机制,并采用AutoDock Vina软件进行分子对接验证,构建大鼠肛周肿胀模型,给予痔瘘熏洗剂或金玄痔科熏洗散进行治疗,以大鼠肛周肿胀面积及HE染色综合评价药效,免疫组化法检测疾病相关靶点TNF-α、MMP9的表达。结果 痔瘘熏洗剂筛选出大黄酚、没食子酸、高车前素等7种核心成分,以TNF-α、MMP9、IL-6、VEGFA为主的13种核心靶点以及5条相关信号通路涉及PI3K-Akt、TNF、IL-17、HIF-1、MAPK通路。分子对接结果显示,痔瘘熏洗剂5种核心成分与TNF-α、MMP9、IL-6、VEGFA靶点均具有较...     

基于网络药理学和动物实验探究黄芩茎叶总黄酮对溃疡性结肠炎的治疗作用及机制

目的 基于网络药理学和动物实验探究黄芩茎叶总黄酮治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法 通过文献查阅黄芩茎叶中总黄酮成分,并根据中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索黄芩茎叶总黄酮成分对应靶点,通过GeneCards数据库收集溃疡性结肠炎相关靶点。使用Venny 2.1绘图软件获取药物和疾病相关靶点的交集靶点,将其上传至STRING数据平台进行蛋白质-蛋白质相互作用网络构建,再采用DAVID数据平台进行基因本体(gene ontology,GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclo pedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。采用3% DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型对网络药理学结果进行验证。结果 网络药理学结果表明,黄芩茎叶总黄酮7个成分对应69个相关靶点,溃疡性结肠炎相关靶点1383个,交集靶点24个。GO和KEGG通路富集分析获得黄芩茎叶总黄酮治疗溃疡性的潜在通路,包括芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)、Th17细胞分化、T细胞受体等。3% DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型结果显示,与模型组相比,黄芩茎叶总黄酮显著降低MPO、TNF-α、IL-1β、IL-17水平,增加IL-10和IL-22水平,且具有统计学差异,恢复小鼠结肠长度。激活AhR通路及其中CYP1A1和CYP1B1靶点,从而促进抗炎因子IL-22因子的水平,通过激活ZO-1蛋白表达修复肠道屏障。结论 黄芩茎叶总黄酮能够基于多成分、多靶点、多通路的特点相互协同治疗溃疡性结肠炎。     

野黄芩素纳米晶体的制备及治疗慢性瘙痒模型药效评价

目的 制备野黄芩素纳米晶体（scutellarein nanocrystals,Scu-NCs）,进行药剂学性质研究,并考察其对小鼠皮肤干燥瘙痒模型的治疗效果。方法 采用反溶剂沉淀技术制备Scu-NCs,并通过冷冻干燥技术将其固化成固体粉末;测定Scu-NCs的平均粒径、分散系数、ζ电位并观察其微观结构;差示扫描量热法（differential scanning calorimetry,DSC）及傅里叶变换红外光谱法（Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR）分析其晶型及化学结构的变化;测试其体外药物溶出速率和其凝胶剂的体外释放度;评价野黄芩素及Scu-NCs凝胶剂经皮给药对丙酮/乙醚和水（acetone-ether-water,AEW）诱导的小鼠干皮瘙痒模型的止痒作用。结果 制备得到的Scu-NCs平均粒径为（379.1±1.7）nm,多分散系数（polydispersity index,PDI）值为0.238±0.081,ζ电位为（25.50±0.25）mV;野黄芩素纳米化后野黄芩素的晶型和化学结构未发生明显变化;Scu-NCs冷冻干燥后粒径无明显变化;野黄芩素纳米化后提高了药物2 h内的溶出速率、溶出度及Scu-NCs凝胶剂6 h内的体外释放度;与AEW模型组相比,野黄芩素、Scu-NCs凝胶剂给药组可明显降低小鼠1 h内抓挠次数,抑制颈背部表皮增厚及皮肤中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的表达,且Scu-NCs对AEW模型抑制效果更明显。结论 Scu-NCs粒径较小且均匀,其纳米化后晶型和化学结构没有发生明显改变;将野黄芩素制备成纳米晶体后,可明显改善药物的溶出度与体外释放度,对皮肤局部慢性瘙痒具有更好的治疗效果。     

黄蜀葵花总黄酮抑制糖尿病肾脏疾病足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化的作用和机制北大核心CSCD

研究表明,高血糖介导的“慢性微炎症”可以导致糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者出现“炎症性足细胞损伤”。其中,“坏死性凋亡”是新的足细胞死亡形式,与肾脏纤维化密切相关。为了探究传统治肾中药黄蜀葵花的提取物——黄蜀葵花总黄酮(total flavones of Abelmoschus manihot,TFA)在体内改善DKD足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化的作用和机制,并进一步揭示其“多途径、多靶点”的科学内涵,笔者将全部大鼠随机分为4组,即正常组、模型组、TFA组以及雷帕霉素(rapamycin,RAP)组。在改良型DKD大鼠模型成功建立后,每天经灌胃分别给予4组大鼠双蒸水、TFA混悬液以及RAP混悬液。在药物干预的第4周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液以及肾组织等标本,进而针对模型鼠足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化各项指标进行观察、检测和分析。结果显示,对于改良型DKD模型鼠,TFA和RAP改善了一般情况、体质量、血清肌酐、尿白蛋白以及肾脏肥大指数;改善了肾脏纤维化指标,包括肾小球组织形态特征、肾小球内纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,collagenⅠ)染色程度以及肾组织FN、collagenⅠ、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和Smad2/3蛋白表达水平;改善了足细胞损伤,包括足突形态以及肾组织中podocin、CD2AP蛋白表达水平;改善了肾脏中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)介导的足细胞坏死性凋亡,包括足细胞坏死性凋亡形态特征以及肾组织中TNF-α、磷酸化底物混合谱系激酶样蛋白(phosphorylated mixed lineage kinase domain like pseudokinase,p-MLKL)表达程度和蛋白表达水平,其中,对于p-MLKL,RAP的作用更强;改善了肾脏中受体相互作用蛋白激酶(receptor interacting serine/threonine protein kinase,RIPK)1/RIPK3/MLKL信号轴活性,包括其关键信号分子蛋白表达水平,如磷酸化受体相互作用蛋白激酶(phosphorylated receptor interacting serine/threonine protein kinase,p-RIPK)1、p-RIPK3、p-MLKL和半胱氨酸蛋白水解酶-8(cysteinyl aspartate specific proteinase-8,caspase-8),其中,对于p-RIPK1,TFA的作用更强。总之,该研究阐明:TFA通过抑制TNF-α介导的RIPK1/RIPK3/MLKL信号轴活性而减轻DKD足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化。笔者的发现为深入揭示TFA治疗DKD肾脏纤维化的科学内涵提供了新的药理学证据。     

基于网络药理学与药理实验验证探讨黄葵胶囊治疗慢性肾炎的作用机制

目的：基于网络药理学和药理实验探索黄葵胶囊治疗慢性肾炎的药效及作用机制。方法：通过文献挖掘并结合PubChem数据库收集黄葵胶囊成分及相关信息，使用SwissTargetPrediction和GeneCards数据库分别预测药物靶点与慢性肾炎疾病靶点，利用STRING数据库和Cytoscape 3.8. 0软件进行蛋白互作和拓扑分析并筛选核心靶点，Metescape平台对核心靶点进行京都基因和基因组百科全书（KEGG）富集分析和基因本体（GO）富集分析。32只SD大鼠建立慢性肾小球肾炎大鼠模型，随机分为模型组、氯沙坦钾组以及黄葵胶囊中剂量组（HKJ-M）、黄葵胶囊高剂量组（HKJ-H），每组8只；另取8只SD大鼠为正常组。各组分别给予相应药物灌胃4周，观察各组大鼠肾组织病理学变化，检测24 h尿蛋白含量、血肌酐、血尿素氮、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、血清丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平。结果：通过网络药理学收集整理得到57个黄葵胶囊治疗慢性肾炎潜在作用靶点，筛选出TNF、MMP9和IL2等炎症相关核心靶点及MAPK、TNF和IL-17等炎症信号...