肝细胞癌组织ICOS+T细胞的多重免疫组织化学检测及其预后价值研究

背景与目的：诱导共刺激分子（inducible costimulator，ICOS）属于B7-CD28免疫球蛋白超家族成员，表达于活化T细胞表面，在T细胞的激活和免疫应答中发挥重要作用；但目前对于ICOS及ICOS+ T细胞在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）肿瘤组织中的表达及其意义尚不清楚。该研究旨在测定ICOS、ICOS⁺ T细胞在HCC患者肿瘤组织中的表达情况并探讨其预后价值。方法：应用组织芯片（tissue microarrays，TMAs）和多重免疫组织化学技术（multiplex immunohistochemistry，mIHC）检测2006—2007年在复旦大学附属中山医院接受手术治疗的358例原发性HCC患者肿瘤组织和癌旁组织中ICOS⁺细胞、ICOS⁺CD4⁺及ICOS⁺CD8⁺ T细胞的浸润密度和ICOS⁺细胞占CD4⁺、CD8⁺ T细胞的百分比。应用Kaplan-Meier法和多因素COX回归模型分析上述指标对患者预后的影响。结果：与癌旁组织相比，ICOS⁺细胞和ICOS⁺CD4⁺ T细胞在肿瘤组织中浸润数量显著增加（P<0.000 1和P=0.009 1），而ICOS⁺CD8⁺ T细胞则呈相反的降低趋势（P=0.033）；在肿瘤中，ICOS⁺CD4⁺ T细胞的浸润程度显著高于ICOS⁺CD8⁺ T细胞。此外，ICOS⁺CD4⁺和ICOS⁺CD8⁺ T细胞占各自T细胞亚群的百分比在肿瘤组织中均显著增加（P均<0.000 1）。预后分析发现，肿瘤组织中ICOS⁺细胞、ICOS⁺CD4⁺及ICOS⁺CD8⁺ T细胞浸润高的患者总生存期（overall survival，OS）更长，多因素分析证实上述指标是HCC的独立预后良好因素。结论：ICOS在HCC患者的肿瘤组织中高表达，且ICOS⁺细胞、ICOS⁺CD4⁺及ICOS⁺CD8⁺ T细胞是OS的独立预后良好因素，提示上述指标可作为新的HCC预后免疫标志物。     

脑小血管病与步态异常相关性的研究进展

脑小血管病指由多种原因引起的颅内小动脉、微动脉、小静脉和毛细血管等结构和功能改变,目前是老年人已知的、最为常见的脑部疾病。步态功能异常是造成老年人生活质量下降、跌倒、死亡风险增加的主要原因之一。近年来,多项研究表明脑小血管病与步态异常间存在着密切联系。文中对国内外基于大样本人群的脑小血管病与步态异常有关研究进行综述,以期为未来疾病机制的研究、临床诊断干预等提供有益参考。     

青少年特发性脊柱侧凸的遗传机制研究现状及基因关系图

作为青少年特发性脊柱侧凸(AIS)发病的研究热点,遗传机制探索经过候选基因及全基因组关联研究(GWAS)时代后,初步鉴定一些相关基因.综述AIS相关基因研究现状,并初步构建AIS基因关系网络图.在NCBI-Pubmed数据库和Web of Science中检索“adolescent idiopathic scoliosis”和“gene”,分类归纳基因.用String-db构建基因关系图.共识别35个AIS相关基因,将其按病因学假设可分为结缔组织、神经系统活性物质、褪黑素合成与代谢、青春期与生长及功能未知.大部分基因呈现网络关系,其中IL6、ESR1、ESR2、VDR、TGFB1、IGF1可能是AIS遗传机制的重要基因.3个GWAS位点有两个在网络之外,提示新通路.AIS易感基因研究尚初步,需要深入研究,解析机制,鉴定新网络.     

Rspo1通过Wnt/β-catenin信号通路调节成骨细胞分化的研究进展

在成骨细胞的分化增殖中,经典Wnt /β-catenin通路起着重要的调节作用;此通路中的任何一个因子都能影响成骨细胞的分化增殖。近几年里,大量研究证明R-脊椎蛋白家族巳成为Wnt/β-catenin信号通路的重要调节因子。本文就Rspo1通过Wnt/β-catenin信号通路调控影响成骨细胞分化增殖的研究进展作一综述。     

纳米药物药代动力学研究——专栏致辞

<正>纳米载体作为一种创新型递释系统具有很多独特优势,例如靶向性,因此受到广泛研究,其中一些成功范例已经进入临床应用,特别是新冠疫情的爆发,促发了mRNA疫苗的广泛应用,而新冠mRNA疫苗成功的关键因素就是脂质纳米递送系统。虽然纳米药物的应用前景非常被看好,但是其临床转化研究还存在很多巨大的挑战,特别是纳米药物的时空命运研究,因此纳米药物的体内药代动力学评价也一直是纳米药物研究的重要环节。纳米药物进入体内后的处置机制复杂,产生多种形态成分,     

经颅磁刺激及局部直流电刺激对受损周围神经再生的影响

目的 分别从电生理学、组织学方面观察经颅磁刺激及局部直流电刺激对周围神经再生的影响，探讨其促进受损神经功能恢复的相关机制。方法共选取20只SD大鼠，将其制成周围神经损伤模型并随机分为经颅磁刺激组及局部直流电刺激组，分别采用电生理学及组织学方法观察磁刺激对周围神经潜伏期、波幅、神经传导速度及周围神经髓鞘结构、数量的影响，并与局部直流电刺激组进行比较。结果2组大鼠分别经20d相应处理后，发现经颅磁刺激组大鼠受损坐骨神经的波幅明显增高，与局部直流电刺激组间的差异有统计学意义；在组织学方面，可观察到经颅磁刺激组有大量新生神经髓鞘出现，其数量显著多于局部直流电刺激组，差异亦有统计学意义；另外经颅磁刺激组的髓鞘结构也较局部直流电刺激组清晰、完整。结论通过电生理学及组织学观察，发现经颅磁刺激在促进受损周围神经再生、修复方面，其疗效可能优于局部直流电刺激。     

参麦开肺散对NIH/3 T3成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的：探讨参麦开肺散对NIH/3T3成纤维细胞(FB)增殖及体外纤维化细胞模型胶原合成的影响。方法 NIH/3T3 FB常规培养后分为正常对照组、模型组和处理组,正常对照组加入含1%胎牛血清(FBS)的细胞培养液500μl,模型组加入使用含1% FBS细胞培养液配制的5 ng/mlβ型转化生长因子( TGF-β)溶液500μl,处理组加入含5 ng/ml的TGF-β+1 mg/ml的参麦开肺散混合溶液500μl,培养24 h。分别采用实时定量聚合酶链反应( PCR)、蛋白免疫印迹( Western blot)和Sircol assay检测细胞内胶原及细胞外基质( ECM)相关基因表达水平、Ⅰ型胶原表达情况以及分泌到细胞上清中胶原蛋白的含量。结果参麦开肺散显著降低胶原及其相关基因、Ⅰ型胶原蛋白的表达以及分泌到细胞上清中胶原蛋白的含量(P<0．05,P<0．01)。结论参麦开肺散可明显抑制TGF-β诱导的NIH/3T3 FB胶原的合成,其发挥抗纤维化作用可能与其抑制FB增殖及胶原合成相关。     

一年二十四节气中新鲜与阴干黄芩根黄酮类成分含量对比及其相关性

目的：研究山东临朐栽培黄芩在一年二十四节气中,新鲜和阴干黄芩根黄芩苷等四种黄酮类成分的含量对比及其相关性。方法连续一年（2013—2014年）按照二十四节气采收黄芩根,用高效液相色谱法检测新鲜和阴干样品中四种黄酮类成分的含量。结果各节气样品阴干后黄芩苷及总苷、总黄酮含量较新鲜显著增加,而黄芩素和总苷元则显著下降;汉黄芩苷和汉黄芩素变化不明显。此外,阴干根中黄酮苷类成分的含量增加与新鲜根中原有成分的含量无相关性。结论一年各节气黄芩根的黄酮苷类成分主要是在采后干燥胁迫过程中产生的。     

携带GFAP启动子的慢病毒载体介导外源基因在肝星状细胞的特异表达

 目的  旨在构建包含由GFAP启动子介导的荧光素酶的慢病毒载体,检测体内外靶向肝星状细胞的外源基因表达的特异性和效率。方法  通过报告基因实验筛选介导效率较高的GFAP启动子,以CMV 启动子作为阳性对照分别介导荧光素酶在小鼠肝星状细胞(JS1)、人肝星状细胞(LX-2)及人肝细胞(L-02)中的表达。通过尾静脉注射将包装的慢病毒注射到四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠体内,通过活体成像和Western blot检测慢病毒颗粒在小鼠体内的分布,并通过免疫双荧光染色检测肝星状细胞的特异表达。结果  人GFAP启动子比小鼠GFAP启动子驱动基因表达的效率高,而且在LX-2和JS1细胞中,人GFAP启动子介导的荧光素酶的活性及表达显著高于L-02细胞。活体成像显示小鼠腹部有荧光素酶的表达。GFAP启动子介导的荧光素酶可以与肝星状细胞的特异性生物标记蛋白GFAP、Desmin和α Sma共定位。结论  成功构建包含由GFAP启动子介导的荧光素酶的慢病毒载体,在体外细胞系以及小鼠体内肝中均可以实现荧光素酶在肝星状细胞中特异性表达。