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1.
  目的  建立超高效液相色谱-质谱联用(UFLC-MS/MS)法分析蜈蚣中3种酶解多肽成分TD1(LEEDLERSEERL)、TD2(EEKDKALQNAEGEVAAL)、TD3(MILPTGASSF), 比较不同品种蜈蚣中肽类成分的差异, 寻找蜈蚣特异性多肽, 用于蜈蚣的鉴别。  方法  3种肽类成分的UFLC-MS/MS法, 色谱柱为XSelect HSS T3(4.6 mm×150 mm, 3.5 μm); 流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱。采用三重四极杆质谱检测器, 电喷雾离子化(ESI), 正离子模式下多反应监测(MRM)进行信号采集。样品采用正交试验方法, 对蛋白提取方法进行优化, 最终确定提取方法为蛋白裂解液超声处理60 min。得到的蜈蚣蛋白提取溶液经胃蛋白酶酶解并脱盐后, 注入液质联用仪分析。测定了20批蜈蚣及8批其他动物药中3种肽类成分, 并对结果进行比较。  结果  在地龙、僵蚕、水蛭、土鳖虫和全蝎中未检出TD2和TD3, TD1与TD2在少棘巨蜈蚣与哈氏蜈蚣、墨江蜈蚣中存在较大差异, TD3在少棘巨蜈蚣与黑头蜈蚣、多棘蜈蚣中有较大差异。  结论  该方法可用于区分少棘巨蜈蚣与地龙、僵蚕、水蛭、土鳖虫和全蝎, 同时通过比较3种肽段的差异, 区分药典品种少棘巨蜈蚣和4种常见非药典品种蜈蚣, 为蜈蚣的质量评价和基础研究提供参考。   相似文献   
2.
目的:研究黄芩汤对非酒精性脂肪肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的作用及机制。方法:将大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组(多烯磷脂胆碱,8 mg·kg-1)、黄芩汤低、中、高剂量组(5,10,20 g·kg-1),采用高脂饮食饲喂12周造模。灌胃给药5周后,检测各组大鼠血脂、肝功能及炎性因子水平;HE染色观察肝脏组织病理变化;RT-PCR和Western Blot法检测肝组织Toll样受体2(TLR2)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB p65(NF-κB p65)、白介素6(IL-6)、维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、IL-23IL-17 mRNA和蛋白表达;免疫组化法检测肝组织中NF-κB p65表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠血脂、肝功能和炎性因子水平明显异常(P<0.01)。肝组织出现脂肪变性及炎性浸润;肝组织中TLR2MyD88NF-κB p65IL-6RORγtIL-23IL-17 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01);NF-κB p65阳性细胞表达明显提升(P<0.01)。与模型组比较,黄芩汤组大鼠血脂、肝功能和炎性因子水平得到明显恢复(P<0.05,P<0.01);肝组织脂肪变性和炎性浸润得到纠正;上述蛋白mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01);NF-κB p65阳性细胞表达明显降低(P<0.01)。结论:黄芩汤可能通过抑制TLR2/MyD88/NF-κB信号通路和IL-23/IL-17轴治疗NASH。  相似文献   
3.
目的:观察地榆炭醇提物凝胶治疗穿戴医用防护装备所致血热型皮肤瘙痒症的临床疗效。方法:将57位穿戴医用防护装备后出现血热型皮肤瘙痒症的医护人员随机分为治疗组28例和对照组29例。对照组使用炉甘石洗剂涂擦,治疗组予地榆炭醇提物凝胶外用,均每日使用2次,连续7?d。比较2组患者治疗前后中医证候积分、Dou氏瘙痒评分、瘙痒视觉模拟评分法(VAS)评分、皮肤病生活质量指数(DLQD)得分及血清白介素(IL)-6及IL-31水平变化情况,疗程结束后比较2组患者中医证候疗效。结果:治疗组中医证候总有效率为85.71%,显著高于对照组的55.17%(P< 0.05)。治疗后治疗组患者皮肤瘙痒、口渴身热、寐欠安、遇热瘙痒加重四项证候评分显著低于治疗前及对照组治疗后(P< 0.05),对照组患者皮肤瘙痒、口渴身热、寐欠安三项证候评分显著低于治疗前(P< 0.05)。2组患者Duo氏瘙痒评分、瘙痒VAS评分、DLQD得分及血清IL-6、IL-31水平均显著低于本组治疗前(P< 0.05),治疗组对上述指标的改善程度均显著优于对照组(P< 0.05)。结论:地榆炭醇提物凝胶治疗穿戴医用防护装备所致血热型皮肤瘙痒症疗效确切,其可能通过调节IL-6及IL-31水平,降低炎症反应而缓解瘙痒,值得临床推广。  相似文献   
4.
目的 研究杜仲叶所含4种主要成分体外抗非酒精性脂肪肝(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)活性。方法 首先用UPLC-MS检测杜仲叶提取物中绿原酸、杜仲苷、京尼平苷酸、车叶草苷含量;以HepG2细胞为载体,建立NAFLD细胞模型,设正常组、模型组、绿原酸组、杜仲苷组、京尼平苷酸组、车叶草苷组;油红O染色检测细胞内脂质;微量法检测细胞内甘油三酯(Triglyceride,TG)、胆固醇(Total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量;微量法检测细胞培养液中谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)含量。结果 杜仲叶提取物主要含绿原酸、杜仲苷、京尼平苷酸和车叶草苷,其中京尼平苷酸的含量最高;杜仲叶提取物所含四种主要成分可明显降低细胞内TG、TC、LDL-C含量,其中京尼平苷酸效果最为显著;绿原酸、杜仲苷,京尼平苷酸可显著降低细胞培养液中AST、ALT含量,其中京尼平苷酸效果最好。结论 杜仲叶提取物所含四种主要成分可不同程度降低HepG2细胞内脂质含量,其中京尼平苷酸效果较好。  相似文献   
5.
目的建立衍生化高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱-质谱联用(GC-MS)法测定大黄䗪虫丸7 种动物 药质量标志物的含量。方法选取10 批次市售大黄䗪虫丸,采用酸水解法、正己烷提取法,提取其中的氨基 酸和脂肪酸成分,衍生化HPLC 法测定谷氨酸、缬氨酸、亮氨酸及色氨酸的含量,衍生化GC-MS 法测定油 酸、亚油酸及硬脂酸的含量。结果该方法经线性范围、加样回收率、精密度、稳定性和重复性等考察确证适 合用于大黄䗪虫丸中7 种动物药质量标志物的测定。两种方法的加样回收率分别为99.17%~101.53%,95.18% ~98.07%;精密度的RSD 分别为1.22%~2.72%,1.87%~2.92%;稳定性的RSD 分别为1.17%~2.48%,1.58%~ 2.95%;重复性的RSD 分别为1.12%~1.68%,1.20%~2.65%。结论所建立的方法精密度、稳定性、重复性符 合测定要求,可用于大黄䗪虫丸动物药质量标志物的含量测定。  相似文献   
6.
目的克隆荆芥1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶(1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate synthase,StDXS)基因,并进行生物信息学分析。方法根据荆芥转录组数据获得的StDXS基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR技术获得StDXS基因cDNA的全长序列,并进行生物信息学分析。结果荆芥StDXS基因全长2177 bp,包含一个长度为2157 bp的开放阅读框,编码718个氨基酸,其理论相对分子质量为77240,等电点为6.32,定位于叶绿体,不存在跨膜区及信号肽,为非分泌蛋白。同源系统进化树分析表明,该序列与同科植物鼠尾草的DXS基因进化关系较近,均属于DXS1亚家族。密码子偏性分析表明,该基因偏好使用以A/T结尾的密码子,具有28个偏性密码子,烟草为该基因最适合的外源表达宿主。结论成功克隆荆芥StDXS基因并进行生物信息学分析,为从分子水平调控荆芥的生长发育和改善药材产量和品质提供理论基础。  相似文献   
7.
目的基于传质数学模型,探索丹参-枳实复方中成分存在状态与纳滤分离机制。方法以原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、辛弗林为指标,进行单体成分溶液及丹参-枳实复方溶液纳滤分离,收集膜通量与指标成分截留率,基于传质模型中传质系数与溶质浓度的幂值相关性,以单一成分为参照,拟合复方溶液中成分存在状态,探讨纳滤分离机制。结果分离压力与膜通量呈正性相关,指标成分在单体溶液和复方溶液中传质系数与浓度幂值相关性高,回归系数均大于0.98,纳滤传质模型成立。通过单一成分传质特征构建复方溶液中成分状态解析模式,丹参-枳实复方溶液中指标成分以复合态存在的比例为原儿茶醛26.17%、迷迭香酸79.87%、丹酚酸B89.15%,辛弗林96.92%。结论构建了复方溶液的成分存在状态解析模式,阐明了丹参-枳实复方提取液纳滤分离机制,为中药成分分离精制提供技术支撑。  相似文献   
8.
基于药材性状特征和ISSR分子标记技术对7个地区的黑三棱科植物黑三棱进行测量比较及遗传多样性分析,针对湖南三棱建立分子鉴别方法。通过测量各产地三棱药材的质量、长度、宽度和厚度指标,分析三棱药材产地间差异。通过筛选扩增条带清晰、多态性丰富的ISSR引物,构建各产地三棱聚类树状图,分析不同产地三棱遗传多样性,筛选出目标引物并测序特异性片段。从ISSR引物中筛选出9条扩增条带清晰、多态性丰富的引物,扩增出73条清晰的谱带,平均每个引物扩增出8.0条,其中多态性条带38条,多态性比例为52.8%。聚类树状图显示样品间遗传相似系数为0.54~0.94,其中浙赣皖地区的三棱之间的遗传相似性系数较大,差异较小。湖南三棱药材性状特征相比其他产地三棱具有较明显差异,且遗传距离相对较远。筛选获得湖南三棱中扩增出特异性条带(327 bp)的引物ISSR-857,并对扩增得到的特异性片段进行测序,经BLASTn比对后,与该基因片段相似的序列较少,且与植物性状生长过程相关性不大。ISSR分子标记技术为湖南三棱的鉴别方法提供了新思路和方法参考,也佐证了"荆三棱"的产地特殊性。  相似文献   
9.
目的探讨黄芪莪术配伍联合5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗结肠癌的作用机制。方法采用1只BALB/c雄性小鼠作为种鼠,生成原位瘤体,80只BALB/c雄性小鼠采用移植种鼠瘤体的方法建立CT26.WT原位移植瘤小鼠模型。将80只BALB/c雄性小鼠随机分为模型组、5-FU组(25 mg/kg)、黄芪莪术高剂量组(12 g/kg)、黄芪莪术中剂量组(6 g/kg)、黄芪莪术低剂量组(3 g/kg)、联合高剂量组(12 g/kg+25 mg/kg)、联合中剂量组(6 g/kg+25 mg/kg)、联合低剂量组(3 g/kg+25 mg/kg),每组10只,连续给药3周。处死小鼠取肿瘤组织,计算抑瘤率。采用Western blot和Real-time PCR法分别检测各组小鼠肿瘤组织、淋巴组织和肝脏组织中CXC趋化因子配体10(CXCL10)、CXC趋化因子受体3(CXCR3)、C-C趋化因子配体3(CCL3)、C-C趋化因子受体5(CCR5)蛋白和mRNA表达。结果与模型组比较,各给药组的抑瘤率均升高(P<0.01)。与5-FU组比较,黄芪莪术高、中、低剂量组,联合高、中、低剂量组抑瘤率均降低(P<0.01)。与黄芪莪术高剂量组比较,联合高剂量组抑瘤率升高(P<0.01),黄芪莪术低剂量组抑瘤率降低(P<0.01)。与黄芪莪术中剂量组比较,黄芪莪术低剂量组抑瘤率降低(P<0.01),联合中剂量组抑瘤率升高(P<0.01)。与联合高剂量组比较,联合中剂量抑瘤率升高(P<0.01)。与联合中剂量组比较,联合低剂量组抑瘤率降低(P<0.01)。与联合低剂量组比较,黄芪莪术低剂量组抑瘤率降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组均能下调CXCL10、CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA及蛋白的表达(P<0.01)。与5-FU组比较,黄芪莪术中、低剂量组CXCL10、CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01);联合高、中、低剂量组的CXCL10、CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA及蛋白表达均降低(P<0.01);黄芪莪术高剂量组原位瘤、淋巴结、肝组织中CCL3及肝组织中CCR5的蛋白表达升高(P<0.01),黄芪莪术高剂量组CXCL10、CXCR3的mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。与黄芪莪术高剂量组比较,联合高剂量组趋化因子及受体的mRNA及蛋白的表达降低(P<0.05);黄芪莪术中、低剂量组原位瘤、淋巴结中趋化因子及受体的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织中CXCL10、CXCR3、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05);黄芪莪术低剂量组的趋化因子及受体的mRNA表达升高(P<0.05);黄芪莪术中剂量组CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA表达升高(P<0.05)。与黄芪莪术中剂量组比较,联合中剂量组的趋化因子及受体的mRNA及蛋白的表达降低(P<0.05);黄芪莪术低剂量组原位瘤中趋化因子及受体的蛋白的表达升高(P<0.05),淋巴结中CXCL10、CCL3的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织中CXCL10、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05);黄芪莪术低剂量组CXCL10、CCL3 mRNA表达升高(P<0.05)。与联合高剂量组比较,联合低剂量组趋化因子及受体的mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),联合中剂量组原位瘤CCL3、CXCL10的蛋白表达升高(P<0.05),淋巴结CCR5、CXCL10、CXCR3的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织中CXCL10、CXCR3的蛋白表达升高(P<0.05),联合中剂量组CXCR3 mRNA表达升高(P<0.05)。与联合中剂量组比较,联合低剂量组原位瘤CXCL10、CXCR3、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05),淋巴结CXCL10、CXCR3的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织CXCR3、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05),联合低剂量组中CXCR3、CCL3的mRNA表达升高(P<0.05)。与联合低剂量组比较,黄芪莪术低剂量组趋化因子及受体的mRNA及蛋白表达升高(P<0.05)。结论黄芪、莪术配伍能够抑制CT26.WT原位移植瘤增殖,且联合5-FU具有增效之功,其治疗结肠癌机制可能与下调CXCL10/CXCR3轴、CCL3/CCR5轴mRNA及蛋白的表达有关。  相似文献   
10.
目前儿童中药制剂剂型选择、辅料优选、工艺设计、包装装置等成人化倾向比较普遍, 导致给药剂量不准、患儿用药顺应性差, 药物有效性和安全性难以保证, 药品不良反应事件频发。因此, 研究开发符合儿童用药特点的制剂, 突破儿童制剂关键技术迫在眉睫。分析了口服液、糖浆剂、颗粒剂等常用剂型, 探讨其在儿童中药制剂中的应用情况, 并针对儿童中药制剂中存在的药物溶解度低、服用口感差、给药剂量不准确等问题, 探讨增溶、掩味和定量给药等共性技术的特点及应用, 以期为儿童中药制剂的研发奠定基础并提供依据。   相似文献   
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