海藻硫酸多糖的制备及其性质研究

目的 建立一套从褐藻中提取海藻硫酸多糖(SP)简单可行的工艺流程。方法 采用乙醇分级提取和Sevage去除蛋白的方法分离、纯化SP，并用Molish反应、Fehling反应、茚三酮法和硫酸基法等鉴定SP产品，用苯酚硫酸法测定SP产品中的糖含量，硫酸基法测定SP产品中的硫酸基含量。结果 从褐藻中得到了SP产品，其得率为3％，SP产品的总糖含量高达85．4％，硫酸基含量为5．3％。结论 我们建立的SP制备工艺流程简单可行，所得产品确系硫酸酯化的海藻多糖。     

海藻硫酸多糖辐射防护机理的ESR研究

利用ＥＳＲ技术在室温下研究了海藻硫酸多糖对５’－ＴＭＰ的辐射防护作用，讨论了海藻硫酸多糖对电离辐射间接作用的防护机制。     

基于系统发育与模拟mRNA结构设计的靶向蛋白激酶C-α的反义药物

目的:系统发育比较分析与二级结构模拟结合用于反义药物优化设计。方法:靶向自由能低的完全保守区域设计反义脱氧寡核苷酸(ODN)。体外评价ODN对人A549细胞和鼠B16-BL6细胞的增殖抑制效应。细胞原位杂交与RT-PCR方法检测靶mRNA表达。用裸鼠荷A549肿瘤和小鼠荷B16肿瘤模型评价ODN的体内活性。结果:3个ODN体外对A549细胞的IC_(50)值显著低于阳性对照ISIS3521。效果最佳的ODN AP1261可剂量依赖地抑制PKC-α mRNA的表达。AP1261在0.005-0.5mg·kg~(-1)·d~(-1)的剂量范围内可抑制A549和B16肿瘤的体内生长。相同剂量下AP1261对A549肿瘤体内生长的抑制率显著高于ISIS3521,而ISIS3521对鼠B16肿瘤的体内外生长无影响。结论:AP1261可能成为有效的抗癌药物或佐剂,系统发育比较分析与二级结构模拟相结合有助于反义药物设计。     

弱视猫视觉系统三级神经元及其突触的超微结构研究

以２～４周龄幼猫制作单眼剥夺弱视模型，对比制作术前及饲养１２周后的图形视觉诱发电位（ＰＶＥＰ）改变，证实产生弱视后，灌注固定幼猫。在透射电镜下观察剥夺眼视网膜中央区神经节细胞、外侧膝状体和视皮质神经元及其突触的超微结构，发现三级神经元及突触均有不同程度的退变和萎缩。主要表现为神经元核皱缩、变形，线粒体皱缩、嵴紊乱，基质电子密度增高，高尔基体减少、不发达，粗面内质网解聚，可见吞噬体、脂褐素及指纹状结     

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的研究

目的 进行重组人粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）的临床前研究和Ⅰ期临床试验。方法在动物模型上进行ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的药理、毒理、药代和药效研究，并在人体上进行安全性评价和初步疗效观察。结果体外实验证明ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对骨髓造血祖细胞有促增殖作用；在６０Ｃｏｒ射线照射造成的白细胞低下动物（狗和猴），显示了明显的升白细胞作用；急性毒性试验显示，ＬＤ５０大于５０００μｇ／ｋｇ；小鼠的药代动力学研究表明，注入的ＧＭ－ＣＳＦ主要从尿中排出，并不在体内蓄积；狗的慢性毒性试验表明在高于临床用量３倍时，无明显毒性反应。Ⅰ期临床试验证明，每天在２．５－７．５μｇ／ｋｇ的剂量下使用是安全的，并能升高白细胞。结论ｒｈＧＭ－ＣＳＦ可用于治疗放疗与化疗引起的白细胞减少症。     

阿托伐他汀对老年大鼠心肌凋亡和过氧化物体增殖物激活型受体α蛋白表达的影响

目的 通过在体动物实验的方法,观察老年大鼠心肌凋亡和过氧化体增殖物激活型受体α蛋白表达水平的变化及阿托伐他汀干预对上述因素的影响.方法 30只20月龄的wistar大鼠,随机分为老年对照组、大剂量阿托伐他汀处理组[10 mg/(kg·d)]和小剂量阿托伐他汀处理组[1 mg/(kg·d)].10只3月龄的wistar大鼠作为青年对照组.阿托伐他汀组每天给予相应剂量的药物灌胃处理,共4个月.对照组给予相同体积的生理盐水灌胃.采用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)检测心肌细胞凋亡;用western blot方法检测各组大鼠心肌的过氧化体增殖物激活型受体α蛋白表达水平.结果 ①与青年对照组相比,老年对照组大鼠的心肌过氧化体增殖物激活型受体α蛋白表达显著降低(P<0.01),阿托伐他汀可显著增加过氧化体增殖物激活型受体α的表达(P<0.01);②老年对照组大鼠的心肌细胞凋亡水平较青年对照组大鼠显著增高(P<0.01),阿托伐他汀干预组的心肌细胞凋亡水平较老年对照组明显降低(P<0.01).结论 阿托伐他汀干预可显著抑制老年大鼠心肌心肌细胞凋亡的发生,其作用可能与其上调过氧化体增殖物激活型受体α的表达有关.     

可诱导型及Bak基因过度表达对多柔比星诱导HCC-9204细胞凋亡的增敏作用(英文)

目的:研究Bak基因过度表达在HCC-9204细胞凋亡途径中的作用以及对多柔比星和长春瑞滨的可能的增敏作用.方法:采用MT-Ⅱ可调控性表达载体系统,通过外加ZnSO_4(100 μmol/L)诱导Bak基因表达,并获得稳定转染子.以形态学标准并结合TUNEL或流式细胞仪检测细胞凋亡.克隆形成实验反映克隆细胞存活率,MTF法检测细胞活力.结果:Bak基因过度表达的细胞出现显著的细胞死亡,TUNEL证实为一种凋亡性细胞死亡.流式细胞仪的结果显示Bak能够显著地诱导细胞在G_1期聚积并在阿霉素诱导后24 h 19.26％的细胞发生凋亡.Bak基因过度表达只能显著降低阿霉素处理组的克隆存活率,而对长春花碱组没有显著效果.MTT实验的结果类似,提示Bak基因能够选择性对阿霉素诱导的细胞死亡具有增敏作用,而对长春花碱没有这种作用.结论:Bak基因的过度表达使HCC-9204细胞的细胞周期在G_1延长,导致细胞凋亡并选择性对化疗药物具有增敏作用.     

TLR4基因多态性在中国人群中的初步研究

目的检测中国人Toll样受体4(Toll—like receptor 4．TLR4)基因调控区和编码区的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)．寻找TLR4基因的遗传标记。方法采用直接测序的方法检测基因的5′区、编码区、部分内含子区和3′区，以确定中国人群中TLR4基因SNP的位置和类型，并用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性对重庆汉族样本进行了抽样调查。结果在4．98kb的测序范围内，发现5个新的SNP，3个位于5′区．2个位于3′非翻译区。在重庆地区汉族样本中．两个高频分布SNP的等位基因频率分别是0．266和0．404。结论在TLR4基因新发现的两个高频多态性位点在我国人群中比较常见，可以作为关联分析的遗传标记。     

DNA体外扩增诊断乙肝病毒X基因的研究

应用本室建立的聚合酶链反应（PCR）系统，利用20bp与21bp的一对特异寡核苷酸引物介导，扩增HBV-X基因区400bp片断，经凝胶电泳，紫外分析以及Southern印迹杂交表明，扩增产物正确，效果满意。     

无毛小鼠骨髓细胞染色体核型分析

目的了解无毛小鼠染色体遗传表型。方法以健康昆明小鼠做对照，制备染色体标本，分析常规染色体G-显带核型。结果常规染色体分析对照组可见染色体数目异常占9.5%，结构畸变占3%；实验组可见染色体数目异常占9.3%，结构畸变占6%。G-显带核型分析除对照组发现一个细胞有结构异常外其余细胞全部为正常核型。结论无毛小鼠的染色体数目和结构未见明显异常与正常对照小鼠无明显差别。