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目的表达、纯化重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白D9N(rSEB-D9N),了解表达产物rSEB-D9N的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和肿瘤生长抑制作用。方法不同浓度IPTG诱导SEB-D9N突变体原核表达系统pET32a-SEB-D9N-E.coliBL21DE3表达rSEB-D9N,经Ni-NTA亲和层析法纯化rSEB-D9N,10%SDS-PAGE和高效液相色谱检测其纯度。以Vero细胞为靶细胞,进行rSEB-D9N的细胞毒性作用,并计算TCID50值。采用MTT法分别检测不同浓度的rSEB-D9N促人淋巴细胞增殖及抑制KB及MCF-7癌细胞株生长的作用。流式细胞术检测rSEB-D9N刺激人淋巴细胞后CD3、CD4、CD8的表达。结果rSEB-D9N表达产量约占细菌总蛋白30%,纯化后获得纯度为90.48%的rSEB-D9N。rSEB和rSEB-D9N对Vero细胞的TCID50值分别为3.12,8.85μg,10.0,20.0mg·L-1的rSEB-D9N具有显著的促PBMC增殖的作用(P<0.05),且主要上调CD3,CD4和CD8的表达。5.0~20.0mg·L-1rSEB-D9N作用的PBMC上清对KB和MCF-7细胞生长均可产生明显抑制作用(P<0.05)。结论获得并纯化了重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白(rSEB-D9N),其细胞毒性作用有所降低,但促人淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用仍较强,可作为研制升白细胞、抗肿瘤相关药物的候选突变体。 相似文献
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目的:探讨白色念珠菌医院感染的相关因素。方法:对55例住院病人痰、尿、插管等标本中分离出的93株白色念珠菌进行了院内感染分析。结果:白色念珠菌所致医院感染与广谱抗生素的使用、年龄、免疫力、住院时间、季节因素和侵入性操作有较大相关。结论:提示临床合理使用抗生素,针对相关因素加强预防控制管理措施,有效降低白色念珠菌医院感染的发生率。 相似文献
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HBV-DNA核苷酸负链的长度为3.2kb,其基因共有6个开放读码框架(ORF),主要为S、C、P及X区.C区核蛋白由nt1901-2450组成,其前nt1815-191的87bp为前C区,与X区有22bp相重叠.其中C区内含有2个框内转录起始密码子ATG,前C区和C区共同拥有一个终止密码.HBeAg是由C区第一个起始密码子翻译,能合成212或214个氨基酸的前C蛋白,此前C蛋白在肝细胞内转移过程中,经翻译后加工N端切去19个氨基酸,C端去36个氨基酸,最终分泌到肝细胞膜表面成HBeAg;如果翻译起始于第二个密码子,则合成长度为183或185个氨基酸的HBcAg,前C区的功能是在肝内合成和分泌HBeAg. 相似文献
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目的探讨不同试验条件下流式细胞仪测定CD62P的标本影响因素。方法采用不同的试管收集静脉血,在采血后不同时间检测CD62P,观察其变化规律。结果枸橼酸钠抗凝管采血后10min内、30min内和1h内测定的结果差异无显著性(P>0.05)。采血后2h测定与10min内测定的结果有显著差异(P<0.01)。EDTA抗凝管与枸橼酸钠抗凝管在10min内测定的结果差异无显著性(P>0.05),但在30min内,1h内和2h内测定的结果有显著差异(P<0.01)。结论血液标本宜用枸橼酸钠抗凝,严格控制在1h内检测完毕。时间延长CD62P的测定结果升高。 相似文献
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脓毒症(sepsis)是指由感染引发的全身炎症反应综合征。可能并不像以往的“过度炎症反应”,更多的是由于“过度抑制”参与其中;有学者认为在初期炎症反应之后会导致单核细胞失活所致的免疫功能不全,称之为免疫麻痹。 相似文献
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我院自1986年以来,应用自制的钛合金固定带,配合髓内针、钢片固定粉碎性骨折,取得了良好效果,报导如下: 固定带制作 固定带选用钛合金钢薄板,厚度0.2mm。根据四肢骨的粗细制成大、中、小、特四型。长7~12cm,宽1.5~2.5cm(附图)。通过模具制成后,刨光、去污、灭菌备用。此固定带形状分头、体、尾三部分:头部有一个扁长的穿通孔和两个园形的拉紧孔;体部较宽,有6~7个垂直孔,固定骨碎片时通过此孔一般不影响骨片的血液供应,以利于骨痂形成,且还可对骨碎片起束缚加压作用; 相似文献