肝阴虚证证候特点及辨证用药规律的文献研究

目的:为进一步深入研究和探讨肝阴虚证候的本质,本文分析和整理肝阴虚证的病因病机、证候表征、证候属性疾病及遣方选药的规律。方法:运用检索文献并进行频数统计的方法,检索查阅1960年9月1日至2019年1月10日中国知网中医临床研究文献。结果:肝阴虚证的病因病机为肝失疏泄,气机郁滞,化火伤阴,阴液亏虚,失于濡养;证候辨证要点主要为脉弦细数,舌红少津,头晕目眩,五心烦热,口咽干燥,两目干涩;证候临床属性疾病有肝炎、肝硬化、肝纤维化、肝癌;临床上治疗肝阴虚证使用处方主要为一贯煎、补肝汤、四物汤、芍药甘草汤,临床高频使用中药为生地黄、白芍、枸杞、当归、麦冬。结论:本文对于肝阴虚证的证候特点以及辨证用药规律做出系统的总结与归纳,将有关肝阴虚证的论述联系起来,形成统一的整体,为揭示肝阴虚证的本质与临床上形成较为成熟的肝阴虚证治疗方案提供参考。     

白芍对酒精性肝损伤肝阴虚证的保护功效和机制

目的研究白芍对小鼠酒精性肝损伤肝阴虚证的保护功效和机制。方法将ICR小鼠随机分为空白组、模型组、一贯煎组、白芍组,每组10只,除空白组外,用Lieber-DeCarli酒精液体饲料加甲状腺激素灌胃制备小鼠酒精性肝损伤肝阴虚证模型。造模期第1天开始给药,一贯煎组灌胃一贯煎水提液9.07 g/kg,白芍组灌胃白芍水提液4.3 g/kg,空白组和模型组灌胃等量生理盐水。28 d后观察各组小鼠状态,测定体重、体温、心率,测定血清及肝组织转氨酶活性、细胞因子水平、乙醇及脂肪代谢相关酶活性、抗氧化酶活性并取肝脏进行冰冻油红、HE病理切片检查。结果与空白组相比,模型组小鼠体重明显减轻,体温升高,心率加快,且出现毛发无光泽、疲倦易困、烦躁易怒等症状;血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、环磷酸腺苷(cAMP)水平及肝组织丙二醛(MDA)、细胞色素P450同工酶E1(CYP2E1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)水平明显升高;血清中环磷酸鸟苷(cGMP)水平及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶2(ALDH2)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素1Ra(IL-1Ra)水平明显降低;肝脏出现脂质沉积及肝细胞坏死情况。与模型组相比,白芍组小鼠血清中ALT、AST、TG、TC、cAMP水平均明显降低(P<0.05),cGMP水平明显升高(P<0.05);肝组织中CYP2E1、TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低(P<0.05),SOD、CAT、ADH、ALDH2、IL-10、IL-1Ra水平明显升高(P<0.05);肝组织脂质占比显著降低(P<0.05),肝细胞坏死程度改善。结论白芍具有明显的保护酒精性肝损伤肝阴虚证的作用,其机制与调节cAMP/cGMP水平及细胞因子水平、使肝细胞功能与代谢恢复平衡、增强肝组织中乙醇代谢关键酶及抗氧化酶活性、同时抑制脂质过氧化反应、减少脂质沉积有关。     

青钱柳对T2D胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激、炎症反应及FAS/IRS1的影响

目的研究青钱柳叶水提物(Cyclocarya paliurus aqueous extract,CPAE)对2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激、炎症反应及FAS/IRS1的影响。方法将高脂饲料喂养8周结合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ) 30 mg/kg诱导的成模大鼠(空腹血糖11.1 mmol/L),随机分为模型组,二甲双胍组(0. 3 g/kg),CPAE低、中、高剂量组(0. 25、0. 5、1 g/kg)。连续灌胃4周,给药期间尾静脉取血测大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)。治疗4周后,测空腹胰岛素(fasting insulin,FINS),计算胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,HOMAIR)、胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI);检测血清中甘油三脂(total triglyceride,TC)、总胆固醇(total cholesterol,TG)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(highdensity lipoprotein,HDL)的含量;比色法检测肝脏中过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)的含量;放免法测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6 (interleukin-6,IL-6)的含量;酶免法测脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS1)、磷酸化胰岛素受体底物1(phosphorylated insulin receptor substrate 1,P-IRS1)的含量; RT-qPCR检测肝脏FAS、IRS1 mRNA的表达量。结果与模型组比较:(1) CPAE低、中、高剂量组FPG、HOMA-IR,TC、TG、LDL、HDL显著降低(P0.05);(2)肝脏CAT、SOD、GSH-PX显著升高(P0.05),TNFα、IL1β、IL-6,MDA显著降低(P0.05);(3)肝脏P-IRS1/IRS1蛋白比值和IRS1 mRNA含量显著升高,FAS蛋白表达量及mRNA的含量显著降低(P0.05)。结论 CPAE提高T2D胰岛素抵抗大鼠肝脏中抗氧化酶的含量,调节氧化应激和炎症反应,缓解胰岛素抵抗,改善T2D大鼠糖脂代谢紊乱,其机制可能与CPAE可提高P-IRS1含量,抑制FAS表达有关。     

青钱柳叶对2型糖尿病大鼠骨骼肌炎症反应、胰岛素通路蛋白及糖原合成的影响

目的研究青钱柳叶水提物对2型糖尿病(T2DM)大鼠骨骼肌炎症反应、胰岛素通路蛋白及糖原合成的影响。方法高脂饲料喂养8周加单次腹腔注射小剂量链脲佐菌素(30 mg/kg)建立T2DM大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,二甲双胍组,青钱柳叶水提物低、中、高剂量组,每组10只;正常组和模型组给予0. 9%氯化钠溶液,二甲双胍组给予二甲双胍混悬液(0. 3 g/kg),青钱柳叶水提物低、中、高剂量组分别给予青钱柳叶水提物(0. 25、0. 5、1 g/kg),连续给药4周。处死大鼠,骨骼肌匀浆比色法检测游离脂肪酸(FFA)、糖原;放射性免疫法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6),白介素1β(IL-1β);酶联免疫吸附法检测IκB激酶(IKK)、核转录因子κB(NF-κB)、c-Jun氨基端激酶1(JNK1)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷酸化胰岛素受体底物1(P-IRS1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、糖原合成酶(GS)含量。结果与模型组比较,青钱柳叶水提物低、中、高剂量组FFA、TNF-α、IL-6、IL-1β显著降低(P 0. 05,P 0. 01);炎症通路蛋白IKK、NF-κB、JNK1含量显著降低(P 0. 05,P 0. 01); IRS1、P-IRS1、PI3K、GLUT4、GS的蛋白表达量和糖原含量显著提高(P 0. 05,P 0. 01)。结论青钱柳叶水提物提高T2DM大鼠骨骼肌中胰岛素通路及糖原合成蛋白的含量,增加肌糖原的合成,其机制可能与青钱柳叶水提物可降低骨骼肌中促炎症因子的含量、抑制炎症通路蛋白的表达、缓解代谢性炎症反应有关。     

草乌的安全性评价与风险控制措施的探讨

该文通过全面系统的国内外文献和信息研究,对草乌进行本草溯源及考证、追溯古今文献关于草乌的毒性记载、分析与草乌用药相关的临床不良事件案例报道以及近年来草乌相关的毒性实验研究,从而对草乌及其相关制剂的安全性进行了系统分析,初步总结了与草乌的安全性相关病例的临床特点及潜在风险因素;研究发现,76例草乌临床不良事件病例报道的患者,以心肌损害(占53.9%)、肾损害(占42.1%)为主,提示草乌可能存在心脏毒性和肝肾毒性的安全性问题;草乌成分复杂,研究证明其毒性成分主要取决于双脂型乌头碱的水解或分解程度,实验证明生草乌水煎剂在2 h时毒性最大,约4 h时毒性显著下降。毒性试验研究发现,草乌可能存在心血管系统、神经系统、肾脏、胚胎、生殖毒性等,孕妇应禁用。乌头碱中毒目前还缺乏特效的解毒药,治疗的关键是及时、有效地纠正心律失常,维持生命体征平稳,同时予以洗胃、静脉补液等治疗措施。建议加强草乌毒理相关基础研究,进一步明确其毒性的物质基础、毒性机制和炮制配伍的增效减毒机制,明确量-效关系,充分发挥药物疗效的同时有效消除其安全隐患。     

青钱柳对2型糖尿病大鼠早期肾损伤标志物以及氧化应激的影响

目的探究青钱柳对2型糖尿病大鼠的中性粒明胶酶脂质运载蛋白(neutral gelatinase lipoprotein,NGAL)、肾损伤因子1(kidney damage factor 1,KIM-1)、铜蓝蛋白(ceruloplasmin,CP)以及氧化应激的影响。方法雄性SD大鼠100只,适应性喂养1周,将大鼠随机分为空白组10只和造模组90只。其中空白组给予普通饲料,造模组给予高脂饲料喂养8周。第10周,以30 mg/kg的剂量一次性腹腔注射2%链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(现配现用,避光取适量STZ,在0.1 mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液冰浴中配置,pH=4.5)。72小时后选择空腹血糖>11.1 mmol/L的成模大鼠随机分为模型组,二甲双胍组,青钱柳水提物(Cyclocarya paliurus water extract,CPE)低、中、高剂量组,每组10只。空白组和模型组给予0.9%氯化钠溶液,二甲双胍组给予二甲双胍混悬液(0.3 g/kg),CPE低、中、高剂量组分别给予青钱柳叶水提取物[CPE(0.25、0.5、1 g/kg)]。连续给药4周,期间检测空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)。给药4周后,检测肌酐(creatinine,CRE)、尿素氮(urea nitrogen,UREA)、NGAL、KIM-1、CP、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量。结果与模型组比:(1)CPE低、中、高剂量组FBG显著降低(P<0.05);(2)CPE低、中、高剂量组CRE、UREA、NGAL、KIM-1、CP显著降低(P<0.05);(3)CPE低、中、高剂量组MDA、ROS显著降低,GSG-PX、CAT、SOD显著升高(P<0.05)。结论青钱柳可有效缓解氧化应激损伤,从而防治2型糖尿病早期肾损伤。     

山豆根的安全性评价与风险控制措施的探讨

该文从本草溯源及考证、现代文献毒性记载及近年来相关毒性实验研究等方面对山豆根的安全性文献进行了系统回顾和分析。研究提示,山豆根的毒性主要累及神经系统、消化系统和呼吸系统,且呼吸衰竭可能是致死的直接原因。主要症状为:头痛、头晕、呕吐、恶心、腹痛、四肢无力、心悸、胸闷;重者表现为面色苍白、四肢颤抖、抽搐、发冷、心跳加快、血压下降、休克、呼吸衰竭而死亡。若患者大量、长时间服用,可能造成严重的脑损害,尤其是青少年及儿童病例较多。笔者提出规范临床用药,避免患者轻信偏方、验方随意用于预防感冒和治疗咽喉疼痛,临床医师严格按照药典推荐用法用量处方,是充分发挥疗效规避用药风险的重要措施。并建议今后应注重山豆根中毒后常规救治方法的探讨,同时加强毒性物质基础、毒性机制和增效减毒等研究,以期使山豆根充分发挥疗效的同时减少临床不良反应。     

青钱柳叶水提物对2型糖尿病大鼠胰腺β细胞凋亡的影响

目的探讨青钱柳叶水提物对2型糖尿病(T2D)大鼠胰腺β细胞凋亡的影响。方法采用高脂饲料喂养8周,并单次腹腔注射链脲佐菌素建立T2D大鼠模型。造模成功后,将模型大鼠随机分为模型组,二甲双胍组,青钱柳叶水提物低、中、高剂量组。连续灌胃给药28 d,正常组、模型组(生理盐水),二甲双胍组(0.30 g/kg),青钱柳叶水提物低、中、高剂量组(0.18、0.36、1.08 g/kg),末次给药时检测大鼠糖耐量。处死大鼠,摘取胰腺,比色法测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(FFA)含量;放免法测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)含量;免疫酶联吸附法(ELISA)测可溶性细胞凋亡因子(Fas)、可溶性细胞凋亡因子配体(Fasl)、活化半胱氨酸蛋白酶8(Caspase8)含量;Western bolt法检测总c-Jun氨基末端激酶1(T-JNK1)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶1(P-JNK1)、胰腺十二指肠同源盒子1(PDX-1)蛋白表达水平;TUNEL染色观察胰腺细胞凋亡情况。结果青钱柳叶水提物可提高模型大鼠胰腺SOD、CAT、GSH-PX含量及PDX-1蛋白表达量;降低模型大鼠空腹血糖、曲线下面积,胰腺MDA、FFA,TNF-α、IL-6、Fas、Fasl、Caspase8的含量,T-JNK1、p-JNK1的表达量,胰腺细胞凋亡率。结论青钱柳叶水提物能提高胰腺抗氧化性,缓解氧化应激,抑制胰腺β细胞凋亡;其机制可能与抑制T-JNK1、P-JNK1蛋白的表达,提高PDX-1蛋白的表达,降低Fas、Fasl、Caspase8含量有关。     

沙苑子总黄酮对肾阳虚高脂血症模型大鼠ERα介导的调脂作用机制研究

绝经期妇女随着卵巢功能衰退,体内雌激素水平下降明显,出现脂代谢紊乱。现代临床上多采用雌激素替代疗法,长期使用该疗法,易出现多种严重并发症,中医常采用温补肾阳,化浊降脂的治法。课题组前期研究亦表明中药传统温阳药物沙苑子具有良好的调节血脂的作用,而肝脏是体内调节脂肪代谢最主要的器官,在脂代谢紊乱中发挥重要作用。故该实验以观察沙苑子总黄酮(TFS)对肾阳虚高脂血症模型大鼠肝脂以及对肝脏雌激素受体的影响为切入点,探讨沙苑子调脂作用的物质基础及机制,阐明中药调脂的优势和特色。该实验采用双侧卵巢切除术联合6周喂养高脂饲料制备肾阳虚高脂血症大鼠模型,假手术组和模型组灌胃浓度0.9%生理盐水;雌激素组灌胃戊酸雌二醇(0.2 mg·kg~(-1));沙苑子低、中、高剂量组灌胃剂量分别为28.5,57,114 mg·kg~(-1)(相当于正常成人沙苑子生药量的7.5,15,30 g),用药体积按每100 g体质量灌胃1 m L计算,持续给药8周后取材。检测肝脏TG,TC,LDL-C,HDL-C水平、肝脏质量、肝脏指数、子宫质量、子宫指数、血清雌激素水平、FSH水平以及肝脏病理切片、肝脏雌激素受体表达水平。与模型组相比,沙苑子总黄酮高剂量组大鼠肝脏TG,TC,LDL-C水平显著降低(P0.001,P0.05),肝脏HDL-C水平显著升高(P0.05)。与模型组相比,雌激素组大鼠血清激素水平显著升高(P0.001),血清FSH水平显著降低(P0.001)。与假手术组相比,PCR结果显示模型组大鼠ERαmRNA表达量显著减少(P0.01);与模型组相比,雌激素组大鼠ERαmRNA表达量显著增加(P0.001),沙苑子总黄酮中、高剂量组大鼠ERαmRNA表达量均增加(P0.01,P0.001)。该实验研究结果表明,沙苑子总黄酮是沙苑子发挥调脂作用的主要有效成分,其调脂作用机制可能是通过增强雌激素受体的敏感性或增加雌激素受体的数量,放大雌激素受体后传导的信号,产生调脂作用。     

沙苑子总黄酮对肾阳虚高脂血症模型大鼠血脂、甘油三酯合成途径的影响

目的探讨沙苑子总黄酮(TFS)对肾阳虚高脂血症的治疗作用及其对肝脏甘油三酯(TG)合成途径的影响。方法 10周龄雌性SD大鼠,按体重随机区组法分为6组,即假手术组,模型组,雌激素组和TFS高、中、低剂量组,每组10只。双侧卵巢切除手术并连续给予6周高脂饲料复制肾阳虚高脂血症大鼠模型。假手术组和模型组灌胃生理盐水(10 m L/kg),雌激素组灌胃戊酸雌二醇(0.2 mg/kg),其余分别灌胃TFS 28.5、57、114 mg/kg,持续给药8周。检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),酶免法检测肝脏脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性和甘油三磷酸酰基转移酶(GPAT)、肉毒碱棕榈酰转移酶-1α(CPT-1α)、乙酰辅酶A氧化酶(ACO)水平,免疫组化法检测肝脏固醇调控元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)蛋白表达。结果与模型组相比,TFS高剂量组大鼠血清TG、TC、LDL-C水平显著降低(P0.05,P0.01),血清HDL-C水平显著升高(P0.05);肝脏ACC活性和GPAT水平显著降低(P0.01,P0.01),ACO、CPT-1α水平显著升高(P0.01,P0.05);肝细胞膜SREBP-1c蛋白表达量显著降低,肝细胞核PPARα蛋白表达量显著增加。结论实验结果表明TFS具有良好的调节血脂代谢的作用,其作用机制可能是通过抑制肝脏SREBP-1c表达,降低TG合成途径中限速酶FAS、ACC、GPAT的活性及水平;上调PPARα蛋白表达,提高脂肪酸β氧化途径中ACO、CPT-1α的表达水平,两者共同发挥作用抑制肝脏中TG的合成,达到调脂作用。