降糖消脂片对KK-Ay转基因小鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察降糖消脂片对KK-A~y转基因小鼠稳态模型评估胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment for insulin resistance index,HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI)、胰腺组织胰岛素(insulin,INS)及胰岛素受体(insulin receptor,InsR)蛋白表达的影响。方法采用高脂饲料喂养KKAy转基因小鼠,制备糖尿病肥胖小鼠模型。同时选取11只同龄C57小鼠作为正常对照。将成模的55只KK-A~y小鼠采用随机数字表法分为模型组、吡格列酮组(8 mg/kg)、降糖消脂片高、中、低剂量组(分别给予降糖消脂片10、5、2.5 g生药/kg),每组11只。以上各组均灌胃给药,正常对照组及模型组灌胃等体积灭菌水,每日1次,连续8周。给药8周后,称体重并测随机血糖(random blood glucose,RBG);眼静脉丛取血,测定INS、TC及TG水平,计算HOMA-IR及ISI;取胰腺进行形态学观察;采用免疫组化方法检测胰腺组织INS及InsR表达;采用免疫印迹(Western blot)法检测胰腺胰岛素受体β(insulin receptorβ,InsRβ)及胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,造模后各组小鼠出现肥胖,血糖及血脂明显升高(P0.01)。给药8周后模型组小鼠体重增加(P0.01),血糖及血脂稳定在高位水平;与模型组比较,降糖消脂片各剂量组小鼠体重、TG、INS及HOMA-IR水平明显降低(P0.05,P0.01);且高剂量组RBG降低更明显(P0.01);降糖消脂片高、低剂量组小鼠ISI明显升高(P0.05,P0.01)。胰腺病理HE染色结果显示,模型组胰岛萎缩,胰岛数目明显减少,分布稀疏,胰岛密度减低,胰岛细胞代偿性肥大,空泡变性,并可见凋亡细胞,表现为胞浆肿胀,核固缩。降糖消脂片高、中剂量组胰岛细胞数目明显增多,变性及凋亡细胞减少。免疫组化结果显示,与正常对照组比较,模型组INS及InsR累积光密度(IOD)值明显降低(P0.01);与模型组比较,降糖消脂片各剂量组胰腺INS及InsR IOD值明显增加(P0.05,P0.01)。Western blot结果显示,与正常对照组比较,模型组InsRβ及IRS-1蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,降糖消脂片各剂量组InsRβ及IRS-1蛋白表达水平升高(P0.01),与吡格列酮组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论降糖消脂片对KK-A~y糖尿病肥胖小鼠有明显的降糖、降脂及改善胰岛素抵抗的作用,其机理可能是通过增加胰岛细胞InsRβ及IRS-1表达,促进INS与受体的结合,从而改善糖、脂代谢和IR状态。     

延胡索叔胺碱和季胺碱对豚鼠心室肌细胞动作电位和HERG通道电流的影响

目的:观察延胡索叔胺碱和季胺碱对动作电位和HERG通道的影响,探讨2种生物碱抗心律失常的作用机制。方法:采用全细胞膜片钳技术记录急性分离的豚鼠心室肌细胞动作电位和培养的稳定转染HERG通道蛋白的HEK293细胞的HERG通道电流。结果:叔胺碱(30,100 mg/L)可延长APD90(90%复极化时程);1 mg/L和3 mg/L季胺碱可缩短APD90,加深静息电位;30 mg/L和100 mg/L季胺碱可延长APD90;叔胺碱(3~300 mg/L)可浓度依赖性抑制HERG尾电流幅度,IC50为55μmol/L;1 mg/L和3 mg/L季胺碱可明显升高HERG尾电流电流幅度,而30 mg/L和100 mg/L季胺碱可明显降低尾电流幅度。结论:延胡索叔胺碱可浓度依赖性延长动作电位时程和抑制HERG通道电流,而季胺碱高浓度与叔胺碱作用相同,低浓度则能够缩短动作电位时程和兴奋HERG通道电流,呈现双相性。     

组学技术在现代中药药理研究中的应用与思考

中医药的功效在日常临床实践中被不断地展现出来，它在改善人类健康状况以及预防和治疗疾病方面也越来越受到全世界的认可和欢迎。然而，中医药理念与现代药理学存在根本的差异，极大地阻碍了中 药现代化的发展。近年来，组学技术在中药研究中的应用备受关注，包括基因组学、转录组学、蛋白组学和代谢 组学等组学技术开始被应用于中药的研究。组学的研究不仅要强调一般水平或仅限于单一方面，多组学间应 该结合起来，合理整合、科学分析将更有助于系统深入地揭示中药功效的物质基础和作用机制。目前，多组学 联合应用对中药作用机制的研究正处于起步阶段，研究深度不够，仅仅是表面结果和现象的结合，还未达到真 正的融合。如何把多组学技术进行合理的融合和恰当的对接，共同为揭示中医药的科学含义服务，是一项值得 深入思考的课题。多组学技术联合网络药理学和生物信息学的方法来阐释中药多组分在分子水平的协同作 用，再结合整体水平中药作用机制的研究，能够帮助我们更精确地揭示中药的药理学机制。     

基于网络药理学方法研究补阳还五汤治疗脑梗死的作用机制

该研究采用网络药理学的方法,对补阳还五汤治疗脑梗死的作用机制进行探讨和研究。首先,通过TCMSP数据库、Drug Bank数据库和Pharm Mapper服务器,以口服生物利用度和类药性为限定条件对补阳还五汤所含化学成分进行筛选并预测作用靶点;然后,利用Cytoscape 3.5.1软件构建成分-靶点网络、成分靶蛋白相互作用网络和脑梗死相关靶点蛋白相互作用网络,以及进行网络合并获取补阳还五汤治疗脑梗死的作用靶标;最后,通过DAVID在线分析工具和KOBAS 3.0软件对靶标进行基因本体(GO)功能富集分析和KEGG通路分析。虚拟实验预测得到补阳还五汤150个化合物和232个靶点;通过网络合并最终确定了208个补阳还五汤治疗脑梗死的候选靶标。结果表明,补阳还五汤可能通过药物的反应、老化、对缺氧的反应、血液凝固等生物过程,并涉及蛋白质结合、酶结合和丝氨酸型内肽酶活性等分子功能发挥治疗脑梗死的作用;其作用机制可能与PI3K-Akt,TNF,HIF-1,c AMP等信号通路有关,其中PI3K-Akt信号通路的调控可能是关键机制之一。     

芪龙胶囊对犬急性心肌缺血的影响

目的:观察芪龙胶囊对犬急性心肌缺血缺血、心肌梗死的保护作用。方法:采用犬冠脉前降支结扎的方法建立犬急性心肌缺血模型。36只犬随机分为6组,每组6只动物,分别为:模型对照组,合心爽组(0.5 mg/kg),复方丹参片(0.24片/kg)组,芪龙胶囊256、128及64 mg/kg剂量组;采用心外膜电图标测心肌缺血范围及程度,定量组织学(N-BT染色法)测定心肌梗死范围,超声多普勒血流计测定心脏冠脉血流量,血气分析仪测定心肌耗氧量,全自动生化分析仪测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的变化。结果:芪龙胶囊经十二指肠给药可明显减少N-BT所示的犬心肌梗死面积/心室面积的比率;明显减轻由心外膜电图标测的心肌缺血程度(药后15 min~180 min),与模型组比较均有显著差异;可减小由心外膜电图标测的心肌缺血范围(药后15 min~180 min);增加冠脉流量(药后30 min~45 min);对心肌缺血及心肌梗死引起的血清CK、LDH活性升高有明显抑制作用,对急性心肌缺血后动脉、静脉血氧含量未见明显影响。结论:芪龙胶囊对犬急性心肌缺血模型表现出较好的心肌保护作用,可能与增加冠脉血流量,改善心肌供血有关。     

益气活血法在缺血性中风后神经修复中的生物学基础研究进展

中风是全球死亡和残疾的主要原因，开发增强中风后恢复和增强神经修复的方法至关重要。中风后的恢复涉及复杂的相互关联的神经修复系统。神经修复整个过程需要神经元胞体对伤害性刺激作出应答，通过神经干细胞增殖与迁移、轴浆运输信号分子、细胞骨架结构构建以及轴突末端生长锥形成等一系列协调的相互作用，才能实现再生生长。神经功能重塑作为神经功能缺损治疗潜在的新靶点，无论是神经功能重塑的具体机制，还是神经功能缺损临床治疗方案，均具有重要研究意义。脑损伤后，由于其内在修复机制十分复杂，单一的治疗措施时常难以奏效，综合治疗将是提高脑内再修复功能的发展方向。益气活血法具有神经保护、血管再生、神经发生及环路重建等多方面生物效应，可共同促进损伤后的神经功能重塑；其作用机制与细胞自噬、免疫调节及微小RNA调控密切相关，充分体现了益气活血法的多途径、多靶点、整体调节的治疗特点以及对中风后的神经修复发挥重要的治疗作用。因此，进行益气活血法对中风后脑功能康复的研究具有十分重要的理论和指导意义。     

HPLC法测定石见穿中丹酚酸B的含量

目的:建立测定石见穿中丹酚酸B含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Thermo C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(21∶79,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为286 nm,柱温为23℃。结果:丹酚酸B的进样量在0.153³.060μg范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<1%;平均加样回收率为97.70%,RSD=0.56%(n=6)。结论:该方法操作简便、准确可靠、重复性好,可作为石见穿药材的质量控制方法。     

AS炎性信号通路与中医药干预

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是血管内皮损伤导致的慢性炎症反应性血管疾病,该文就AS炎性信号通路相关因子,如细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、核因子-κB(NF-κB)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ),以及中医药在抗AS中调节这些炎性信号通路方面研究进展做一综述。     

核医学方法在心肌缺血后心肌存活性无创伤评价中的应用

近年来,随着挽救缺血心肌的介入性治疗及冠状动脉旁路移植术(CABG)的广泛开展,以及在对于抗心肌缺血的药物疗效评价方面,慢性动物实验技术的发展,心肌缺血后心肌存活性的无创伤评价问题日渐引起人们的关注。目前,国内外关于此方面研究进展的报道很多,其中大部分是核医学方法,本文对该方面内容作了综述。