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1.
目的:利用IgG promoter-HepG2细胞对复方苦参注射液生产过程中可能产生致敏原的生产节点进行研究。方法:构建IgG启动子调控绿色荧光蛋白表达质粒,转染入HepG2细胞,与常见致敏性物质(葛根素,卵白蛋白,LPS和伤寒菌疫苗)、复方苦参注射剂中使用到的辅料(NaOH,醋酸,聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯即吐温80和乙醇)和生产过程中关键节点样品(S1~S8)进行孵育,30 m in后拍照,图像分析软件统计细胞荧光强度变化。结果:IgG promoter-HepG2细胞对常见致敏性物质呈阳性反应。注射剂辅料中醋酸和吐温80有致敏性,生产过程8个样品中,2个样品有显著致敏性。结论:IgG promoter-HepG2细胞对常见致敏原反应敏感,特异性高,适用于中药注射剂中致敏原快速筛选,可实现对中药注射剂生产过程中致敏原的实时监控。  相似文献
2.
目的:利用分子生物技术构建免疫球蛋白G(IgG)启动子调控绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转基因细胞,尝试以IgG基因表达起始为标准在临床前对中药注射剂进行其诱导Ⅱ型变态反应的可能性预测.方法:构建IgG启动子调控绿色荧光蛋白表达的转基因细胞系,用葛根素,KCl,聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温80)对该系统进行测试,并尝试用该系统对不同批次鱼腥草注射液进行筛选评价,观察统计各给药组中发光细胞数量的变化.结果:非离子表面活性剂吐温80对IgG表达启动过程有抑制作用,葛根素能显著激活IgG基因的表达,KCl对IgG表达无作用.所测批次鱼腥草注射液对IgG表达没有激活作用.结论:IgG启动子调控绿色荧光蛋白表达细胞模型能在IgG表达层次评价药物致敏性,吐温80能在转录水平上抑制IgG的表达,所测批次鱼腥草注射液在IgG转录层次上无诱导Ⅱ型变态反应活性.  相似文献
3.
利用"分层法"综合评价中药复杂体系药效   总被引:3,自引:0,他引:3  
对综合评价中药复杂体系药效的数学方法进行了理论分析,在此基础上提出了一种较全面客观地反映中药抗病能力的量化结果的数学方法——分层法,并建立了相应的数学模型。对中药药效多因素的评价决策问题进行理论探讨。用此方法综合比较9种不同配比的银杏叶(EGb)提取物有效成分治疗心脑血管疾病的疗效,比较结果符合实际情况。实例实验的结果验证了此方法的相对合理性和实用性。  相似文献
4.
吴茱萸汤及其各组分对TPH2启动子活性的影响   总被引:2,自引:1,他引:1       下载免费PDF全文
目的:利用分子生物技术构建色氨酸羟化酶(TPH2)启动子调控红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)转基因细胞,以筛选吴茱萸汤及其各组成药物对TPH2启动子的调控活性,探讨其治疗偏头痛可能的分子靶点.方法:构建TPH2启动子调控红色荧光蛋白表达的转基因细胞系,观察统计不同给药组中细胞荧光强度的变化及发光细胞数量的变化.结果:通过荧光细胞计数发现吴茱萸汤、吴茱萸、生姜、大枣水提物不同透析部分在不同浓度上对TPH2启动子转录活性具有不同的调控作用.结论:吴茱萸汤治疗偏头痛的可能分子靶点与激活TPH2表达有关.TPH2启动子调控红色荧光蛋白表达细胞模型可用于对以此为靶点的药物筛选和活性评价.  相似文献
5.
附子乌头草乌及其炮制品的毒效比较   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
目的:从毒效角度出发,比较附子、乌头、草乌不同炮制品及提取物的毒性,为研究和应用这些生药提供相关实验依据。方法:以小鼠为主要研究对象,观察急性死亡率,心电影响阈剂量来观察毒性,以镇痛及其抗室颤来观察其药效。结果:从急性毒性看,白附片和黑顺片毒性较小,其最大给药剂量均为20.52 g.kg-1。盐附子毒性较大,LD50为11.301 g.kg-1。结合相关活性综合考察,临床安全指数由大到小依次为:黑顺片>白附片>盐附子。草乌毒性较大(LD50 292.38 mg.kg-1),经炮制后毒性明显减小,约降低70.32倍。结论:附子、乌头炮制后起到了减毒存效的作用,而草乌炮制后则表现为毒效同时降低。  相似文献
6.
石榴叶鞣质对高血脂小鼠糖代谢影响及其机制   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
目的:探讨石榴叶鞣质对高脂小鼠糖代谢的影响以及降糖的作用机制。方法:通过高脂饮食建立高脂并高血糖小鼠,灌胃石榴叶鞣质,观察小鼠血清糖脂的变化,肝糖元含量;通过体外HepG2细胞实验观察石榴叶鞣质对葡萄糖的利用及其胞内糖元含量变化。结果:灌胃石榴叶鞣质8周后,高脂小鼠外周血总胆固醇、甘油三酯和血糖均有明显降低,肝糖元升高;体外实验石榴叶鞣质可以明显促进HepG2细胞对葡萄糖的利用,增加胞内糖元含量。结论:石榴叶鞣质对高脂合并的高血糖有明显的降低作用,其作用机制可能与增加肝内糖元转化有关。  相似文献
7.
菊花-槐花总黄酮的制备工艺及质量控制   总被引:1,自引:1,他引:0       下载免费PDF全文
目的:优化菊花-槐花总黄酮的制备工艺,并建立总黄酮及指标成分的质量控制方法.方法:采用单因素试验和正交设计考察菊花-槐花总黄酮的制备和纯化工艺,分别用比色法和高效液相色谱法测定总成分和指标成分.结果:菊花-槐花总黄酮的制备工艺为处方药材用14倍量的70%乙醇回流提取3次,每次1h;提取液浓缩至0.5g·mL-1,以质量比1:0.5的比例上样HPD 600大孔树脂柱,先用10倍树脂体积的蒸馏水洗去杂质,再用5倍树脂体积的80%乙醇解吸附;收集洗脱液,浓缩至干后,即得菊花-槐花总黄酮.经比色法测定工艺产品的总黄酮质量分数为64.98%~66.79%;经HPLC法测定其-指标成分木犀草素-7-O-葡萄糖苷质量分数为5.87%~6.93%,芦丁质量分数为14.09%~16.62%.结论:含水乙醇提取结合大孔树脂柱纯化是制备菊花-槐花总黄酮的有效方法,比色法和高效液相色谱法可用于其质量控制.  相似文献
8.
目的:通过研究黄芩苷对脑缺血和肺炎模型中TLRs-NOD2受体的影响,探讨肺、脑相关炎性病变的共同机制。方法:分别建立小鼠脑缺血再灌和急性肺炎模型,造模后对小鼠腹腔注射黄芩苷,检测小鼠脑和肺组织中TLR2/4、NOD2和TNFα蛋白的表达。结果:脑损伤模型小鼠脑组织和肺组织中,TLR2/4、NOD2和TNFα显著高表达,黄芩苷能够不同程度的下调这些因子;肺炎模型小鼠脑组织和肺组织中,TLR2/4、NOD2和TNFα不同程度的高表达,黄芩苷可以在不同程度上抑制这些因子。结论:黄芩苷对TLR2/4、NOD2受体及下游炎性因子TNFα存在着显著的调控作用,这种调控作用及对炎性反应的影响可能是其对肺、脑病变作用的共同基础。  相似文献
9.
甘遂对正常小鼠肝脏相关炎性因子表达的影响   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
目的:观察甘遂醇提取物对正常小鼠肝脏功能及其相关炎性因子表达的影响,以探讨其对肝脏的安全性.方法:分别给小鼠灌胃给药(1.2、0.6、0.3 g·kg-1)2 h、4h和7d,取血清测ALT,取肝脏做组织学观察,并提取RNA,Real time PCR测IL-β、TNFα和Caspase3表达的变化.结果:甘遂醇提取物给药不同时间对正常小鼠肝脏组织形态影响不明显,给药2h大剂量对ALT明显升高,对炎性因子IL-β的mRNA表达明显上调,对凋亡相关因子Caspase3的mRNA表达影响不明显.结论:甘遂对正常小鼠肝脏具有确实的毒性.其作用特点主要与炎性损伤有关,与凋亡关系不明显.  相似文献
10.
HepG2IgG转基因细胞应用于中药致敏物质预测研究   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
本文对HepG2IgG细胞对于Ⅱ型致敏性预测进行了较为深入系统的研究,其中包括转染宿主细胞的筛选、转染最佳条件、最适检测仪器以及转染持续时间等。并对己知致敏原及其市售的几种中药注射剂进行了致敏性筛选。结果表明,该细胞系具有检出灵敏性高,细胞转染成功率高,致敏因子表达稳定等特点。为早期预测II型致敏反应的中药提供了一个有价值的工具。  相似文献
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