怀山药的化学成分研究

目的：研究怀山药Dioscorea opposita Thunb.的化学成分。方法：利用Diaion HP-20、Toyopearl HW-40、Sephadex LH-20、MCI Gel CHP-20、硅胶柱等柱色谱技术及制备液相色谱、薄层色谱、重结晶等方法,对怀山药化学成分进行分离、纯化,根据化合物的理化性质和光谱学数据鉴定其结构。结果：从怀山药中分离得到14个化合物,分别是：L-色氨酸（1）,Seguinosides F（2）,1-methoxycarbonyl-β -carboline（3）,Helichrysin A（4）,Bungein A（5）,对苯二酚（6）,Zarzissine（7）,Cyclo-（Pro-Thr）（8）,香草醇（9）,烟酰胺（10）,熊果苷（11）,丁香酸甲酯-4-O-β -D-吡喃葡萄糖苷（12）,苯丙氨酸（13）,1,2-benzenedicarboxylic acid,1,2-bis[2-（2-hydroxyethoxy）ethyl] ester（14）。结论：化合物1-14均为首次从怀山药中分离得到。     

姜黄素联合FOLFOX方案对胃癌细胞株BGC-823的抑制和诱导凋亡的作用

目的:探讨姜黄素联合FOLFOX方案(奥沙利铂/氟尿嘧啶方案)对胃癌细胞株BGC-823的增殖和凋亡作用以及可能发生的机制。方法:以胃癌细胞株BGC-823 cell为研究对象,设置空白对照组、姜黄素组(10μmol/L)、FOLFOX组[5-FU(0.1mmol/L)+奥沙利铂(5 mmol/L)]和姜黄素联合FOLFOX组4组,采用CCK-8法测定细胞增殖抑制率,Hoechst染色观察细胞凋亡情况,real-time PCR和Western blot分别检测Bcl-2、Bax m RNA和蛋白表达变化,Caspase-3活性检测试剂盒测定Caspase-3活性。结果:1CCK8显示,与空白对照组比较,各用药组均抑制BGC-823细胞的增殖,姜黄素联合FOLFOX组的抑制作用最明显,差异均有统计学意义(P<0.05);2Hoechst染色结果显示,各用药组凋亡细胞明显多于空白对照组,姜黄素联合FOLFOX组凋亡细胞最明显;3real-time PCR和Western blot证实,与空白对照组比较,各用药组Bcl-2 m RNA、Bcl-2蛋白降低而Bax m RNA、Bax蛋白升高,姜黄素联合FOLFOX组变化更明显,差异均有统计学意义(P<0.05);4Caspase-3活性检测证实,各用药组Caspase-3活性均升高,姜黄素联合FOLFOX组最高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素联合FOLFOX能抑制胃癌细胞株BGC-823细胞增殖,诱导凋亡,机制可能与Bax激活/Bcl-2失活,活化Caspase-3信号通路有关。     

穗花杉双黄酮在大鼠体内的组织分布研究

目的:建立一种穗花杉双黄酮在大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、大肠、小肠等组织中的分析方法,并考察大鼠灌服穗花杉双黄酮后在各组织中的分布特性。方法:采用HPLC-UV法测定穗花杉双黄酮在大鼠各组织中的含量。按500 mg·kg-1的剂量灌胃给予大鼠穗花杉双黄酮,分别于给药后10 min、0.5、1、2、4、8、12 h后脱颈椎处死,立即解剖采集心、肝、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠、脑等组织。各组织处理后测定其中穗花杉双黄酮的分布情况。结果:各组织在不同范围内线性关系良好,最低检测限0.125 ng,日内日间精密度均小于10%,各组织中穗花杉双黄酮的绝对回收率在75.07%-89.80%之间;相对回收率在92.00%-107.00%之间;各组织中穗花杉双黄酮在-20℃冰箱内保存15天条件下稳定性良好。结论:穗花杉双黄酮在各组织中浓度差异较大,大鼠灌服穗花杉双黄酮主要分布于胃、大肠、小肠、肝、肾中,其次为心、肺、脾中,并可透过血脑屏障分布于脑组织中。     

桑白皮各化学拆分组分化学成分研究

目的：研究桑白皮各化学拆分组分的化学成分。方法：利用Diaion HP-20、Toyopearl HW-40、Sephadex LH-20、MCI Gel CHP-20、硅胶柱等柱色谱技术以及制备液相技术,对桑白皮化学拆分组分进行分离纯化,并根据其理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构。结果：从桑白皮各拆分组分中共分离并鉴定了23个化合物的结构,其中从30%乙醇组分中分离得到16个单体化合物,分别为：香草酸（1）,3,4-二甲氧基苯酚（2）,苯甲酸（3）,丁香酸（4）,kelampayoside A（5）,对羟基苯丙酸（6）,咖啡酸（7）,氢化阿魏酸（8）,6,7-二羟基香豆素（9）,5,7-二羟基香豆素（10）,桑色素-7-O-β-D-葡萄糖苷（11）,liriodendrin（12）,2,3-反式二氢桑色素（13）,2,3-顺式二氢桑色素（14）,2,3-反式二氢槲皮素（15）,2,3-顺式二氢槲皮素（16）;从50%乙醇组分中分离得到4个单体化合物,分别为：东莨菪亭（17）,桑色素（18）,山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖苷（19）,伞形花内酯（20）;从80%乙醇组分中分离得到3个单体化合物,分别为：桑根酮R（21）,cis-mulberroside A（22）,白藜芦醇（23）。结论：化合物2,4-6,11,16,19为首次从该植物中分离得到。     

UPLC-MS/MS法同时测定生地黄饮片中7种核苷类成分的含量

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定生地黄饮片中7种核苷类成分(2′-脱氧腺苷、次黄嘌呤、腺嘌呤、腺苷、肌苷、尿嘧啶、尿苷)的含量。方法:采用Waters BEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸溶液﹣甲醇为流动相,梯度洗脱;正离子多反应监测(MRM)模式来检测生地黄饮片中7种核苷类成分的含量。结果:7种核苷类成分在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.9913,加样回收率为98.54%～102.07%,RSD值均小于3.19%。结论:该方法可快速、准确地对生地黄饮片中7种核苷类成分进行定性定量分析。     

怀菊花中糖苷类化学成分研究

目的:研究怀菊花的化学成分。方法:利用各种色谱技术对怀菊花乙酸乙酯部位进行分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构。结果:从怀菊花中分离并鉴定了13个糖苷类化合物,分别为:9-hydroxy-megastigma-4,7-dien-3-one-9-O-β-D-glucopyranoside(1)、corchoionoside C(2)、(6S,9R)-长寿花糖苷(3)、lippianoside E(4)、amarantholidol A glycoside(5)、4-甲氧基苄基-β-D-葡萄糖苷(6)、everiastoside E(7)、苯乙醇-β-巢菜糖苷(8)、二氢丁香苷(9)、苯甲醇-β-巢菜糖苷(10)、苯甲醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)、京尼平苷(12)、4-烯丙基-2,6-二甲氧基苯基葡萄糖苷(13)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。     

基于肺水肿模型探讨葶苈子升降浮沉药性

目的 基于葶苈子药性沉降，根据“病位在里者宜沉降”的治则，建立病位在里的肺水肿模型，结合病势趋向的改变，验证葶苈子药性“沉降”的科学性，以期初步阐释中药升降浮沉药性的科学内涵。方法 选择60只雄性SD大鼠，随机分为假手术组、模型组（20 mg·kg^-1）、阳性药地塞米松组（0.075 mg·kg^-1）、葶苈子低、中、高剂量（1.167、2.334、4.668 g·kg^-1）组并通过胸膜腔注射1%角叉菜胶（2 mL·kg^-1）建立肺水肿模型，检测肺水肿评价指标（肺剖检、胸腔渗出液量、白细胞数量、肺湿重/干重比、肺含水量及肺通透性），确定葶苈子干预肺水肿的最佳剂量；检测与机体气机调节密切相关的五大系统（中枢系统、呼吸系统、循环系统、消化系统、泌尿系统）相关指标，观察葶苈子干预对肺水肿大鼠病势趋向的改变，确定其升降浮沉之性；并观察各组大鼠苏木素-伊红（HE）染色切片、炎症细胞种类和数目等，初步探究葶苈子改善肺水肿的作用机制。结果 与假手术组比较，胸腔积水量和胸腔积水中白细胞渗出量显著增加（P<0.01），肺湿重/干重比、肺含水量及肺通透性显著升高（P<0.01），并出现咳嗽、喘促、呼吸困难、弓背现象，少量大鼠鼻子湿润，鼻孔出现泡沫状液体等症状，剖检时肺出现体积增大或伴有瘀血，气管处出现大量粉红色泡沫状液体；与模型组比较，葶苈子可减少大鼠胸腔积水量和胸腔积水中白细胞渗出量，降低肺脏器系数、肺湿重/干重及肺含水量，改善肺组织水肿出血等，且以葶苈子中剂量治疗肺水肿效果最佳（P<0.01）；对于呼吸系统，与假手术组比较，模型组大鼠咳嗽潜伏时间、引喘潜伏时间明显减少（P<0.05，P<0.01），咳嗽次数和喘息次数显著增加（P<0.01），与模型组比较，葶苈子低、中、高剂量组均显著增加咳嗽潜伏期、引喘潜伏期，减少咳嗽次数、喘息次数（P<0.01）；对于泌尿系统，与假手术组比较，模型组大鼠显著减少尿量，葶苈子中、高剂量显著增加尿量（P<0.01），低剂量组明显增加尿量（P<0.05），但均对排汗无影响；对于消化系统，与假手术组比较，模型组大鼠胃残留率显著增加（P<0.01），胃排空率、小肠推动率显著下降（P<0.01），胃泌素（GT）明显增加（P<0.05），和模型组比较，葶苈子低剂量组显著增加小肠推动率（P<0.01），中、高剂量组可显著增加胃排空率、小肠推动率（P<0.01），显著减少胃残留率（P<0.01），显著或显著减少GT以促进胃肠运动及胃肠道的运输（P<0.01），增加胃动素（MTL）促进大鼠的胃排空（P<0.05，P<0.01）；对于循环系统，与假手术组比较，大鼠左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）、心输出量（CO）显著降低（P<0.01），模型组大鼠的心率有升高趋势，收缩压（SBP）显著升高（P<0.01），舒张压（DBP）明显升高（P<0.05）；与模型组比较，葶苈子低剂量组明显增加LVEF、降低大鼠的DBP（P<0.05），葶苈子中剂量组显著增加LVEF、LVFS、CO和SBP（P<0.01），明显降低大鼠的DBP（P<0.05），葶苈子高剂量组显著增加LVFS（P<0.01），显著降低大鼠的SBP（P<0.01），明显降低大鼠的DBP（P<0.05）；对于中枢系统，与假手术组比较，模型组大鼠站立次数显著降低（P<0.01），葶苈子明显减少大鼠的运动距离、运动时间、站立次数和在旷场中心活动时间，增加静止时间和旷场边缘活动时间（P<0.05，P<0.01）；此外，与假手术组比较，模型组大鼠肺管腔周围的炎症浸润严重，气管增厚、内有水肿液聚集，肺组织破坏严重，血中白细胞计数、中性粒细胞比例显著增加（P<0.01），单核细胞比例明显增加（P<0.05），肺泡灌洗液中γ干扰素（IFN-γ）显著降低（P<0.01），白细胞介素-4（IL-4）明显提高（P<0.05）、免疫球蛋白E（IgE）水平显著升高（P<0.01），肺组织活性氧（ROS）水平显著升高（P<0.01），与模型组比较，葶苈子能减少白细胞计数和中性粒细胞积聚，减少肺小血管充血和肺间质水肿，降低肺泡灌洗液中IFN-γ和IL-4水平，升高IgE水平，降低肺组织ROS水平（P<0.05，P<0.01）。结论 葶苈子对病位在里的肺水肿模型具有显著改善作用，通过泻水逐饮、调节水液排泄，降泻肺气、调节气机、泻肺气之壅闭，促肺气肃降、调节气机下行，提示葶苈子作用趋势为沉降。其中以葶苈子中剂量作用最佳，其作用机制可能是通过调控中性粒细胞炎症反应来发挥干预作用的。     

葶苈子、薏苡仁、车前子的利水功效比较

目的对比葶苈子、薏苡仁、车前子利水功效,并观察其作用机制异同点。方法代谢笼法考察葶苈子(2.34 g/kg)、薏苡仁(7.00 g/kg)、车前子(3.50 g/kg)的利尿作用,冰点降低法、酶法、离子选择电极法、ELISA法、Western blot法研究其利尿机制。结果葶苈子、薏苡仁、车前子显著增加水负荷大鼠给药7 h后的尿量(P0.05)以及降低水负荷大鼠给药7 h后的体质量(P0.05),且三者对尿肌酐(Ucr)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)无显著影响(P0.05)。葶苈子主要通过降低血清Na+、心钠素(ANP)、脑钠素(BNP)、肺中AQP3、肾脏AQP1与AQP2水平来发挥利尿作用;薏苡仁主要通过降低血清Na+、Cl-、ANP、肺中AQP3、胃中AQP3、肾脏AQP1与AQP2水平来发挥利尿作用;车前子主要通过降低血清Na+和Cl-、肺中AQP3、胃中AQP3、肾脏AQP1与AQP2水平来发挥利尿作用。结论 3味药材都具有显著的利尿效果,对肾脏无明显损害。主入肺经的葶苈子对利钠肽系统影响较大,主入脾经的薏苡仁对胃AQP3影响较大,主入肾经的车前子对钠氯转运以及肾脏AQPs影响较大。     

一年蓬全草的化学成分研究

目的:研究一年蓬全草的化学成分。方法:利用制备高效液相等各种色谱技术进行化学成分分离,根据理化性质和光谱数据对化合物进行结构鉴定。结果:从一年蓬全草中分离并鉴定16个化合物,分别为:芹菜素-7-O-β-D-(6″-咖啡酰基)吡喃葡萄糖苷(1)、6-甲氧基山柰酚(2)、瑞香素(3)、伞形花内酯(4)、梣皮树脂醇(5)、3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)propan-1-one(6)、3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)propan-1-one(7)、楝叶吴萸素B(8)、C-藜芦酰乙二醇(9)、L-苯丙氨酸(10)、对羟基苯甲酸(11)、对羟基桂皮酸(12)、丁香酸(13)、对羟基苯乙醇(14)、异黑麦草内酯(15)、异香草酸(16)。结论:所有化合物均为首次从一年蓬中分离得到。     

适形放疗、同步化疗加羟基喜树碱热灌注化疗治疗晚期膀胱癌的临床疗效观察

目的：探讨适形放疗、同步化疗加羟基喜树碱热灌注化疗治疗晚期膀胱癌的临床疗效。方法将48例晚期膀胱癌患者按就诊顺序随机分为两组,每组各24例,其中对照组采取适形放疗＋同步化疗（吉西他滨＋表阿霉素）,观察组在此基础上加用羟基喜树碱热灌注化疗,比较两组临床疗效及不良反应发生情况。结果观察组有效率为79.17%,显著高于对照组的58.33%（P〈0.05）;两组不良反应发生率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论适形放疗、同步化疗加羟基喜树碱热灌注化疗治疗晚期膀胱癌疗效确切,不良反应可耐受,值得临床推广和应用。