厚朴醇提物与远志醇提物配伍对大鼠粪便代谢物的影响

目的:考察厚朴醇提物、远志醇提物及二者配伍对大鼠粪便代谢物的影响,分析其潜在的代谢通路,为探索厚朴缓解远志所致胃肠动力障碍的机制提供实验依据。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为空白组,厚朴醇提物组(3. 50 g·kg~(-1)),远志醇提物组(1. 75 g·kg~(-1)),配伍组(3. 50 g·kg~(-1)+1. 75 g·kg~(-1)),连续灌胃给药3 d,收集大鼠末次给药24 h内的粪便,采用UPLC-Q-TOF-MS采集粪便代谢物数据,流动相乙腈(A)-0. 1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0～0. 5 min,3%A;0. 5～12. 5 min,3%～70%A; 12. 5～13 min,70%～90%A; 13～16 min,90%～97%A; 16～17 min,97%～100%A; 17～22 min,100%A; 22～23 min,100%～3%A),电喷雾离子源,正、负离子模式数据采集范围m/z 50～1 200;借助Progenesis QI v2. 0,SIMCA-P 14. 0,SPSS 20. 0,MetaboAnalyst 4. 0等软件进行多元分析,筛选特征代谢标志物并分析其相关代谢通路。结果:共筛选出5-亚胺甲基四氢叶酸,L-3-羟基犬尿氨酸,7,8-二氢蝶酸等17个特征代谢标志物,其相关代谢通路为不饱和脂肪酸的生物合成、亚油酸代谢、维生素B_6代谢、叶酸生物合成等。结论:厚朴缓解远志所致胃肠动力障碍的作用机制可能与嘌呤代谢、叶酸生物合成、色氨酸代谢、初级胆汁酸生物合成有关。     

基于网络药理学探究冰片改善冠心病的作用机制

目的 基于网络药理学探究冰片(天然冰片、艾片、合成冰片)改善冠心病的作用机制.方法 利用Pharm-Mapper预测3种冰片主要成分的潜在靶点,借助OMIM筛选与CHD相关的基因靶点,通过分子对接技术模拟配体分子与靶点蛋白的结合,通过一致性评价筛选出结合较好的靶点进行GO与KEGG富集分析.结果 筛选出3种冰片改善CHD的共同重要靶点为HMGCR、ESR1、CYP2C9、NOS3、MMP3、PPARG;分子对接结果显示3种冰片配体分子均与MMP3、PPARG结合较优,而左旋龙脑与CYP2C9,右旋龙脑、异龙脑与HMGCR、NOS3、ESR1结合较好;通过KEGG富集分析,共筛选出38条通路,主要涉及雌激素信号通路、AMPK信号通路、癌症转录失调、代谢途径.结论 ESR1、HMGCR、MMP3、PPARG、CYP2C9、NOS3可能为3种冰片作用于CHD发挥疗效的潜在靶点,其中MMP3、PPARG可能均为3种冰片治疗CHD的潜在重要靶点.     

3种冰片防治给药对AMI模型大鼠的心肌保护作用

目的:比较3种冰片不同剂量防治给药改善急性心肌梗死(AMI)模型大鼠作用的强弱以及对氧化应激因子的影响,为阐明其抗心肌梗死量效关系及机制提供参考。方法:将健康成年SPF级SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、溶剂模型组、硝酸甘油组、天然冰片高、中、低剂量(0. 6,0. 3,0. 15 g·kg~(-1))组,艾片及合成冰片高、中、低剂量(0. 2,0. 1,0. 05 g·kg~(-1))组,共13组,每组20只。按20 m L·kg~(-1)灌胃,1次/d,连续预防给药3 d;假手术组与模型组给予同体积蒸馏水,溶剂模型组给予同体积5%聚山梨酯80。干预给药第3天,末次给药30 min后,施予冠状动脉左前降支结扎造模,将造模成功大鼠连续治疗给药3 d。采用BL-420N生物系统分析仪记录大鼠心电ST段波幅及血流动力学变化;大鼠体质量及心脏称重,计算心脏脏器系数; 2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色计算心肌梗死率;苏木素-伊红(HE)染色评价心肌病理损伤程度;按试剂盒要求,检测血清中心肌酶乳酸脱氢酶(LDH),天门冬氨酸氨基转氨酶(AST),肌酸激酶同工酶(CK-MB)及氧化应激因子超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)的水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠ST段波幅于5 min后显著抬高,左心室舒张压(LVDP)值显著升高,左室心肌收缩成分实测最大缩短速度(Vpm)值显著降低,心脏脏器系数及心肌梗死率显著升高,心肌病理组织严重损伤,血清CK-MB,AST,LDH,MDA含量显著升高(P 0. 05,P 0. 01)。与溶剂模型组比较,天然冰片及艾片中、低剂量,合成冰片高剂量均能显著抑制大鼠心电不同时间点ST段的异常抬高,天然冰片与艾片高、中剂量、低剂量及合成冰片高剂量均可显著升高左心室收缩压(LVSP)值,降低LVDP值(P 0. 01),天然冰片中、低剂量,艾片高、中,合成冰片高剂量组能显著升高左室内压上升最大速度(dp/dt max)及Vpm值(P 0. 05,P 0. 01),天然冰片及艾片中、低剂量组均能显著降低大鼠心脏脏器系数,天然冰片高、中、低剂量与艾片,合成冰片中、低剂量组均能显著改善大鼠心肌梗死率(P 0. 05,P 0. 01),天然冰片低剂量,艾片高、中剂量及合成冰片高剂量组能显著改善其病理损伤程度(P 0. 01),艾片高剂量能显著降低CK-MB含量;艾片中、低剂量显著降低AST活性,艾片中、低剂量,合成冰片高、中、低剂量明显降低LDH活性(P 0. 05,P 0. 01),艾片高、中剂量,合成冰片高剂量组大鼠血清SOD活性显著增加(P 0. 05,P 0. 01),天然冰片高、中、低与艾片高、中剂量组的血清MDA水平明显降低(P 0. 01)。结论:3种冰片各剂量组能不同程度发挥心肌保护作用。此实验条件下改善心肌梗死药效呈艾片天然冰片合成冰片趋势,天然冰片量效呈负相关、合成冰片呈正相关,艾片无明显量效关系。     

3种冰片防治AMI模型大鼠的抗炎及调控HIF-1α/VEGF

目的 探讨艾片（左旋龙脑）、天然冰片（右旋龙脑）、冰片（合成龙脑）不同剂量对实验性急性心梗（AMI）模型大鼠心电生理及抗炎、调控缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/血管内皮生长因子（VEGF）心血管保护的可能机制。方法 SD雄性成年大鼠，按体重随机分为假手术组、模型组、溶剂模型组、硝酸甘油组、天然冰片高、中、低剂量（0.6、0.3、0.15 g·kg^-1）组、艾片及合成冰片高、中、低剂量（0.2、0.1、0.05 g·kg^-1）组，每组10只。按10 mL·kg^-1灌胃，预给药3 d，末次给药30 min后，施冠状动脉左前降支（LAD）结扎造模，将模型成功大鼠连续治疗3 d。采用BL-420N生物系统分析造模前后及治疗3 d后心电图及心率变异性（HRV），实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测心肌组织中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6） mRNA表达量，蛋白免疫印迹法、免疫组织化学法检测血管内皮生长因子受体1（VEGFR1）、HIF-1α、CD34蛋白表达水平。结果 与假手术组比较，模型组造模当天及干预3 d后心率、心电ST段、T波、QRS时限、QTC间期、Q波显著升高，HRV及T波明显改变（P<0.05，P<0.01）；与溶剂模型组比较，造模当天艾片中、低剂量组、天然冰片组心率，艾片组、天然冰片高、中剂量、冰片高剂量组ST波幅，艾片组、天然冰片中、低剂量、冰片高剂量组HRV参数，艾片高、中剂量、天然冰片低剂量、冰片组低频与高频范围内的功率谱比值（LF/HF），艾片、冰片高剂量、天然冰片中剂量组T波波幅，艾片中、低剂量、天然冰片高、中剂量组QTC间期，艾片与天然冰片各自高、低剂量、冰片组QRS时限，均明显减小或缩短（P<0.05，P<0.01）；治疗3 d后艾片组、天然冰片高、中剂量、冰片中剂量组心率，艾片组、天然冰片高、中剂量、冰片高剂量组的ST段波幅，艾片与天然冰片各自高剂量、冰片高、中剂量组的QTC间期与QRS时限及Q波波幅，艾片中剂量组QRS时限，天然冰片中剂量组QTC间期、冰片低剂量组Q波，皆显著减小或缩短（P<0.01）；艾片与天然冰片各自中、低剂量、冰片高、中剂量组的IL-1β、IL-6 mRNA表达量显著下调（P<0.01）；艾片、天然冰片各自高、中剂量、冰片高、低剂量组LF/HF明显减小（P<0.05，P<0.01）；艾片高剂量、天然冰片组、冰片高、低剂量组HRV及天然冰片高、中剂量、冰片高剂量组T波波幅显著增大；艾片中、低剂量、天然冰片低剂量、冰片高剂量组HIF-1α、VEGFR1、CD34蛋白，天然冰片中剂量组VEGFR1、CD34蛋白表达明显上调（P<0.05，P<0.01）。结论 3种冰片防治给药可不同程度改善AMI模型大鼠心率、心率变异性、心电图，可能会通过抗炎、促血管新生而发挥心肌保护作用。综合效应提示艾片较优，天然冰片略次、冰片次之。