基于高内涵筛选技术的麦冬硫熏前后肝毒性比较研究

目的应用高内涵筛选技术(high content screening,HCS)对硫熏麦冬的肝毒性进行研究。方法以人肝癌细胞系Hep G2细胞为载体,分别设置阳性对照药(噻氯吡啶)、阴性对照药(阿司匹林)、麦冬提取物、硫熏麦冬提取物组,利用HCS技术测定并分析不同药物的细胞数目、DNA含量、谷胱甘肽(GSH)降低水平、活性氧(ROS)含量和线粒体膜电位(MMP)。结果与麦冬提取物组细胞相比,硫熏麦冬提取物组从50 mg/mL开始,GSH降低水平超过肝毒性的阈值;从12.5mg/mL开始,硫熏麦冬提取物组细胞MMP的改变也超过毒性阈值。结论麦冬硫熏后表现出潜在的肝毒性,由其对MMP的影响推测硫熏致肝毒性可能与线粒体介导的细胞凋亡有关。     

固相萃取结合UHPLC-LTQ-Orbitrap MS分析黄精发酵前后的化学成分

目的应用固相萃取结合超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道质谱(UHPLC-LTQ-Orbitrap MS)技术对黄精发酵前后的化学成分进行分析鉴定。方法采用Waters HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液和的乙腈为流动相梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,在电喷雾正离子模式下进行检测,四级杆飞行时间串联质谱法对各主要色谱峰进行归属。结果根据所获得的精确相对分子质量,同时结合色谱保留行为、质谱裂解规律、特征碎片离子、对照品比对以及相关文献报道,共鉴定发酵前后黄精中的69个化学成分,包括57个甾体皂苷类成分、5个黄酮类成分、4个三萜皂苷类成分、2个生物碱类及1个有机酸类成分。其中,从发酵前黄精提取液中鉴定了62个化学成分,从发酵后黄精提取液中鉴定了18个化学成分。结论发酵对黄精中的化学成分影响很大,如成分异构化、原生苷种类以及含量减少、次生苷或苷元含量的增多等,可为黄精的进一步开发利用提供科学依据。     

玫瑰花 玫瑰茄 枸杞子复合发酵液化学成分的HPLC-HRMS分析

目的:研究玫瑰花、玫瑰茄及枸杞子3者复合物提取液经肠膜明串株菌肠膜亚种发酵前后化学成分的差异。方法:采用高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱(HPLC-LTQ-Orbitrap MS)技术对其复合物提取液及发酵液中化学成分进行筛选及鉴定。结果:根据所获得的精确相对分子质量,同时结合色谱保留行为、质谱裂解规律、特征碎片离子、对照品比对以及相关文献报道,共筛选鉴定了48个化学成分,包括39个有机酸、6个黄酮及3个花青素类成分。结论:玫瑰花、玫瑰茄及枸杞子3者复合物提取液发酵前后化学成分的种类和含量均发生不同程度的变化,其中苷类成分可以转化为更利于人体吸收利用的苷元类成分,可为其他发酵中药的现代研究提供借鉴思路。     

丹参素在大鼠体内代谢产物的鉴定分析

应用UHPLC-LTQ-Orbitrap技术对丹参素在大鼠血浆和尿液中的代谢产物进行鉴定。SD大鼠灌胃给药丹参素CMC-Na混悬液后,收集其血浆和尿液,应用固相萃取法进行样品前处理。采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱。在电喷雾负离子模式下采集生物样品的质谱数据。根据精确相对分子质量以及多级质谱裂解信息,结合对照品及文献报道结果比对,最终鉴定了丹参素以及21个丹参素Ⅰ相和Ⅱ相代谢产物,同时分析了丹参素主要的体内代谢反应,如脱水、甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化、去羟基化以及相关的复合反应等。该文应用高分辨液质联用技术快速阐明了丹参素在大鼠体内的代谢产物,为今后药效物质基础和作用机制研究奠定了基础。     

玫瑰枸杞发酵饮品发酵前和发酵后氨基酸含量变化研究

目的:分析玫瑰枸杞发酵饮品发酵后氨基酸含量的变化。方法:采用氨基酸分析仪分别对玫瑰枸杞发酵饮品发酵前和发酵后游离氨基酸和水解氨基酸进行测定分析。结果:发酵后游离氨基酸和水解氨基酸的总量均增加;样品中的游离氨基酸的总量由发酵前的2,630.01μg/mL增加到发酵后的4,893.77μg/mL;水解氨基酸的总量由发酵前的2,928.47μg/mL增加到发酵后的9,739.37μg/mL,发酵后样品中的水解氨基酸总量约为游离氨基酸总量的2倍。结论:发酵可促使氨基酸的溶出与转化,游离氨基酸和水解氨基酸的含量均得到了较大的提高,可增加玫瑰枸杞发酵饮品的营养价值。     

黄精覆盆子发酵饮品化学成分的UPLC-HRMS分析

目的:研究发酵前后黄精覆盆子饮品中的化学成分。方法:样品经固相萃取处理后,采用Waters HSS T3 UPLC色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)和0.1%甲酸水溶液(A)与乙腈(B)流动相系统进行梯度洗脱,应用液质联用技术检测发酵前后黄精覆盆子饮品中的化学成分。结果:结合精确分子质量、多级质谱裂解信息、对照品比对以及文献报道,总共筛选鉴定了60个化合物。其中,甾体皂苷类成分有42个,三萜类成分有3个,黄酮类成分有9个,生物碱类成分有6个。结论:本研究为黄精覆盆子发酵饮品的微生物发酵工艺研究奠定了基础,为其药用价值的进一步开发利用提供了借鉴。