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1.
目的:观察健脾复方胃肠安对人胃癌MKN45细胞自噬的影响,探讨其抗肿瘤的作用机制。方法:体外培养人胃癌MKN45细胞,采用细胞活力检测法(CCK-8)检测不同质量浓度胃肠安(250,500,1000,2000 mg·L^-1)作用体外培养的人胃癌细胞MKN45细胞,共孵育24,48,72 h,检测细胞增殖活力的改变;采用吖啶橙(AO)染色和单丹磺胺戊二胺(MDC)染色观察胃肠安对胃癌MKN45细胞自噬小体及自噬囊泡的变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测微管相关蛋白1轻链3(LC3),酵母ATG6同源物(Beclin1),泛素结合蛋白-1(p62),自噬相关基因5(ATG5),自噬相关基因7(ATG7)mRNA和蛋白的表达。结果:CCK-8实验显示,与空白组比较,胃肠安(500,1000,2000 mg·L^-1)可明显抑制MKN45细胞的增殖能力(P<0.05,P<0.01);AO和MDC染色显示,与空白组比较,随着胃肠安浓度的增加,自噬小体和自噬囊泡含量逐渐增加;Real-time PCR和Western blot结果显示,与空白组比较,胃肠安(1000 mg·L^-1)组细胞中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ,Beclin1,ATG5,ATG7 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),p62表达下降(P<0.05,P<0.01)。结论:胃肠安可诱导人胃癌MKN45细胞自噬,其机制涉及上调自噬相关基因Beclin1,ATG5,ATG7 mRNA和蛋白表达,下调p62 mRNA和蛋白表达,促进自噬标志蛋白LC3-I向LC3-Ⅱ转化。  相似文献   
2.
3.
[目的]评价以健脾为基础的中药复方辨证治疗对老年胃癌生存期的影响。[方法]采用前瞻性的同期对照研究,分层分析、Cox多因素回归分析方法,在临床病理分期、手术和化疗等因素基线均衡的条件下,比较接受健脾为基础的中药治疗组和未接受中药的同期对照组老年胃癌病例的生存期,Kaplan-Meier法估算中位生存时间(OS),组间生存分布差异采用Log-rank进行显著性检验。[结果]共有404例≥60岁老年胃癌病例纳入研究,包括203例晚期胃癌和201例Ⅰb~Ⅳ(M0)接受根治术(R0)后胃癌病例。203例晚期胃癌的同期对照研究:中药组共78例,对照组共125例。Cox多因素回归分析示,中药(P=0.000)、化疗(P=0.000)、放疗(P=0.021)是影响老年晚期胃癌患者OS独立的保护性因素。以化疗因素分层:化疗亚组中,中药组(51例)的中位OS19.9个月,较对照组(45例)的14.0个月延长(P=0.015),服用中药的相对危险度为0.544(95%CI:0.331~0.896);非化疗亚组中,中药组(27例)的中位OS17.9个月较对照组(80例)的7.5个月延长(P=0.000),服用中药的相对危险度0.244(95%CI:0.132~0.451)。201例Ⅰb~Ⅳ(M0)期根治术(R0)后老年胃癌的同期对照研究:中药组共80例,对照组共121例。Cox多因素回归分析示,临床病理分期(P=0.000)、中药(P=0.000)是老年胃癌根治术后患者OS独立的影响因素。临床病理分期(P=0.001)、中药(P=0.000)是老年胃癌根治术后患者无病生存(DFS)独立的影响因素。以临床病理分期分层:Ⅲ~Ⅳ(M0)期亚组中,中药组(53例)的OS未达到中位数,对照组(102例)的中位OS31.9个月,生存分布差异有统计学意义(P=0.000)。服用中药的相对危险度为0.316(95%CI:0.171~0.585)。1年、3年、5年生存率,中药组分别为:100%、79%、67%,对照组则分别为:89%、45%、32%。中药组的DFS未达到中位数,对照组的中位DFS25.7个月,无病生存分布差异有统计学意义(P=0.000)。服用中药的相对危险度0.367(95%CI:0.206~0.656)。1年、3年、5年无病生存率,中药组分别为:98%、66%、66%,对照组则分别为:81%、43%、35%。[结论]以健脾为基础的中药复方辨证治疗是老年晚期胃癌预后的独立的保护性因素,可延长老年晚期胃癌的生存期;延长Ⅲ~Ⅳ(M0)期老年胃癌根治术后的无病生存期和总生存期。中医药治疗在改善老年胃癌总体预后方面的作用值得进一步作随机对照研究评价。  相似文献   
4.
目的:观察胃肠安颗粒与汤剂对MKN45人胃癌裸鼠皮下移植瘤皮下移植瘤生长、淋巴结转移作用及对RUN和FYVE结构域蛋白3(RUFY3),锌指转录因子1(SNAI1),血管内皮生长因子(VEGF)和上皮细胞间质转化(EMT)蛋白的影响。方法:建立人胃癌MKN45细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为空白(生理盐水0. 5 m L/只)组,胃肠安颗粒(胃肠安颗粒3. 54 g·kg-1)组,胃肠安煎剂(生药35. 49 g·kg-1)组。观察各组裸鼠皮下移植瘤瘤重、腋窝淋巴结的体积,苏木素-伊红(HE)染色检测各组淋巴结的形态,免疫组化检测包括RUFY3,SNAI1,VEGF,E-钙黏蛋白(E-cadherin),N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(Vimentin)相关蛋白表达。结果:与空白组比较,胃肠安颗粒组和胃肠安煎剂组皮下移植瘤瘤重显著降低(P 0. 01),腋窝淋巴结体积显著减小(P 0. 01); HE染色显示淋巴结中均可见转移的肿瘤细胞;裸鼠胃癌组织RUFY3,SNAI1,VEGF,N-cadherin,Vimentin蛋白表达显著降低(P 0. 01),E-cadherin蛋白表达显著增加(P 0. 01)。结论:胃肠安颗粒与胃肠安煎剂在抑制人胃癌皮下移植瘤生长和淋巴结转移方面具有相同疗效,可在一定程度上代替汤剂使用;胃肠安颗粒和胃肠安煎剂均能降低裸鼠皮下移植瘤中RUFY3,SNAI1,VEGF,N-cadherin,Vimentin蛋白表达,增加E-cadherin蛋白表达,提示胃肠安可能通过调节RUFY3,SNAI1,VEGF,EMT相关蛋白的表达而起到抑制肿瘤转移的作用。  相似文献   
5.
目的:研究健脾复方胃肠安颗粒抑制人胃癌MKN45细胞侵袭转移的分子机制。方法:体外培养人胃癌MKN45细胞,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)检测不同质量浓度的胃肠安颗粒(600,900,1 200,1 500 mg·L-1)与人胃癌MKN45细胞共孵育24,48,72 h,对细胞增殖活力的影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RUN和FYVE结构域蛋3(RUFY3)在人正常胃黏膜细胞和不同胃癌细胞系中的表达;Western blot检测不同质量浓度的胃肠安颗粒干预(600,900,1 200 mg·L-1)对人胃癌MKN45细胞中RUFY3蛋白表达的影响;利用慢病毒转染技术,构建稳定沉默RUFY3的人胃癌细胞MKN45细胞;采用Transwell迁移和侵袭实验,检测胃肠安颗粒和沉默RUFY3干预后人胃癌MKN45细胞迁移和侵袭能力的变化;采用Western blot检测各组细胞中上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin),N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(Vimentin),锌指转录因子(SNAIL1,SNAIL2)的表达。结果:与正常胃黏膜组比较,RUFY3在人胃癌细胞中表达明显升高(P<0.05)。与慢病毒阴性组比较,沉默RUFY3组MKN45细胞中RUFY3的蛋白表达显著降低(P<0.01);胃肠安颗粒可抑制人胃癌MKN45细胞中RUFY3的表达(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖。与空白组比较,胃肠安组和沉默RUFY3均能抑制人胃癌MKN45细胞的侵袭和转移能力(P<0.01)。与空白组比较,胃肠安颗粒干预和沉默RUFY3后,人胃癌MKN45细胞中上皮标志基因E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.01),间质标志基因N-cadherin,Vimentin蛋白表达降低,但差异无统计学意义;锌指转录因子SNAIL1,SNAIL2的蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:健脾复方胃肠安颗粒可能通过RUFY3调控EMT抑制人胃癌MKN45细胞的侵袭和转移。  相似文献   
6.
目的 观察中药复方WCAP及其拆方对人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤生长及对白介素-6/信号转导和转录激活因子3(IL-6/STAT3)信号通路的影响。方法 建立人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤模型,将30只SPF级裸小鼠随机分为6组,即空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、复方组、健脾组、清热解毒组和软坚散结组,每组5只,观察各组裸小鼠皮下移植瘤瘤质量及抑瘤率,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Western blot法分别检测瘤组织中IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc癌基因(c-myc)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的mRNA和蛋白表达水平。结果 (1)与空白对照组比较,各干预组瘤质量均轻于空白对照组,5-FU组、复方组及各拆方组均可抑制裸小鼠皮下移植瘤的生长(P<0.05),复方组抑瘤率高于各拆方组(P<0.05)。(2)与空白对照组比较,5-FU组、复方组和软坚散结组IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc、cyclin D1、VEGF...  相似文献   
7.
目的观察过氧化氢(H_2O_2)诱导的HT-29结肠癌细胞凋亡中microRNA(miRNA)的表达变化及其在细胞凋亡中的作用。方法常规培养的HT.29结肠癌细胞,给予500nMH_2O_2处理48h,构建HT-29细胞凋亡模型;常规RNA抽提后,利用miRNA颈环结构引物进行反转录反应后,采用实时荧光定量PCR分析miRNAs的表达水平。构建miR-23的Psuper过表达质粒,并将其转染HT-29细胞。实时荧光定量PCR分析Psuper-miR-23在HT-29细胞中的过表达效率。在H202诱导的HT-29细胞中过表达miR-23,48h后通过流式细胞术检测HT-29细胞的凋亡情况,并通过定量PCR检测细胞中Caspase3的表达。结果在H_2O_2诱导的HT-29结肠癌细胞凋亡模型中,miR-22、miR-24、miR-26、miR-30、miR-181和miR-214的表达水平在对照组与H_2O_2组之间表达差异没有显著性,而miR-23在处理组的表达水平明显升高。Psuper-miR-23过表达质粒转染培养的HT-29细胞能够明显提高miR-23的表达水平。在H_2O_2诱导的HT-29细胞过表达miR-23,能够促进HT-29细胞的凋亡。结论miR-23在H_2O_2诱导的HT-29细胞凋亡模型中表达升高,将其过表达能够促进H_2O_2诱导的HT-29细胞凋亡作用,表明miR-23可能参与了H_2O_2诱导的细胞凋亡过程。  相似文献   
8.
秦皮乙素是陕西道地药材秦皮的活性成分,具有广泛的抗肿瘤活性。信号转导通路紊乱是肿瘤细胞生长失调的重要特征,信号通路的激活失活可影响下游基因的表达引起细胞的异常增殖,促进肿瘤的生长、侵袭和转移。研究发现秦皮乙素可通过调节多条信号通路发挥抑制肿瘤细胞增殖和侵袭转移、诱导凋亡及调节肿瘤微环境等作用。现将秦皮乙素抗肿瘤治疗的信号转导通路做一综述,以期为秦皮乙素进一步的临床应用及药物开发提供实验基础。  相似文献   
9.
目的 评价中医药干预联合奥铂及氟尿嘧啶类药物的化疗方案对晚期胃癌的临床疗效。方法 初治晚期胃癌患者一线治疗采用奥铂及氟尿嘧啶类药物的化疗方案,并根据是否接受健脾中药治疗分为中药组和同期非中药组,在基线均衡的条件下比较患者的生存期及1、2、3、5年生存率。Cox多因素回归模型分析影响晚期胃癌预后的独立性因素,Kaplan-Meier法估算中位生存时间(OS)。结果 共有205例晚期胃癌病例纳入研究,包括87例中药组和118例非中药组。Cox多因素分析显示,性别(P = 0.002),化疗周期(P = 0.000),靶向治疗(P = 0.043),健脾中药(P = 0.003)是影响晚期胃癌病例生存期的独立因素。在非靶向治疗的亚组中,中药组的中位生存期为21.271个月较非中药组的10.849个月显著延长(P = 0.001,Log-rank检验),服用中药的相对危险度是0.549(95%CI:0.384-0.782)。中药组的1、2、3、5年生存率分别为76%、40%、27%、22%,非中药组的1、2、3、5年生存率分别为46%、22%、13%、7%。结论 健脾中药是影响晚期胃癌患者预后的独立保护性因素,及早健脾中药干预并联合奥铂及氟尿嘧啶类药物的化疗方案可使晚期胃癌患者生存获益。  相似文献   
10.
目的:评价中医药治疗晚期胃癌临床试验/观察类文献的文献质量,对疗效指标的参考标准及结果简要评述。方法:检索2005-2010年中医药治疗晚期胃癌的国内文献,阅读全文及收集信息,评价文献质量并行疗效结果的分析。结果:纳入文献75篇,其中观察类文献12篇,占16%;对照试验文献63篇,占84%。9篇有临床诊断的参考标准,占12%;2篇有中医证型的辨证标准,占2.7%;6篇说明了是否存在与中药治疗相关的副性事件,占8%。45篇对照文献说明组间基线均衡,占71.4%;无1篇文献行样本含量的估算。对疗效结果的统计显示:24篇文献以生存期为疗效判定指标,占32%,中位生存期7.4~19个月;63篇文献分析有效率或疾病控制率,占84%,以WHO标准为疗效判定标准的有效率为7.69%~67.8%。51篇评价化疗不良反应,占68%。12篇分析中医证候,占16%;7篇以生活质量为评价标准,占9.3%。结论:中医药治疗晚期胃癌文献的研究设计不严密,统计学方法运用欠严谨,有待进一步提高。中医药治疗晚期胃癌具有一定疗效,但疗效评价标准不一,疗效结果难以重复,导致可信度降低。  相似文献   
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