超短波影响神经源性疼痛时nNOS和NMDA受体表达的实验研究

目的：研究神经源性疼痛时兔背根神经节(dorsal root ganglia，DRG)和脊髓后角内神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase，nNOS)与N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor，NMDA受体)阳性表达的特点以及超短波对其的影响，从而探讨超短波治疗的分子作用机制。方法：新西兰纯种成年兔45只，随机分为空白对照组(n=15)，损伤模型组(n=15)和超短波治疗组(n=15)。采用免疫组化法结合图像分析，定量观察损伤后不同时间(10d、30d和90d)DRG和脊髓后角内nNOS和NMDA受体阳性表达的分布特点。结果：术后10d时模型组和治疗组手术侧DRG和脊髓后角内nNOS阳性表达增多，NMDA受体阳性表达在DRG内降低；90d时治疗组nNOS和NMDA受体表达已基本接近正常，而模型组nNOS和NMDA受体仍未恢复正常。结论：超短波治疗可改变神经源性疼痛时DRG和脊髓内神经元表达上调的nNOS和表达下调的NMDA受体水平，提示其可能通过影响NMDA受体-NO系统发挥缓解疼痛的满意疗效。     

连接蛋白43与Snail在乳腺癌组织中的表达及意义

目的 观察乳腺癌组织中连接蛋白43(Cx43)与Snail的表达,探讨Cx43与Snail在乳腺癌发病中的作用.方法 分别应用SP免疫组织化学方法和Western blot法检测80例乳腺癌组织及相应癌旁正常乳腺组织中Cx43和Snail的表达,并进行相关性分析.结果 Cx43在80例乳腺癌组织及相应癌旁正常乳腺组织中阳性表达率分别为40.00%和95.00%,差异有显著性(P<0.01);Snail的阳性表达率分别为86.25%和20.00%,差异有显著性(P<0.01).Cx43阳性表达与Snail呈负相关(χ2=11.423,P<0.01,r=-0.353).Western blot结果显示:与正常乳腺组织相比,乳腺癌组织中Cx43表达明显减少,而Snail的表达明显增加.结论 乳腺癌组织中Cx43表达下调和Snail表达上调在乳腺癌的发生中发挥一定的作用.     

乳腺癌中PKCζ、MMP-2、MMP-9的表达及相关性

目的：探讨乳腺癌中蛋白激酶C灼(protein kinase C灼, PKC灼)、基质金属蛋白酶-2( matrix metalloproteinase-2, MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)的表达及三者与其侵袭、转移的关系。方法应用免疫组化PV 9000两步法检测PKC灼、MMP-2、MMP-9在100例乳腺癌组织及对应癌旁正常乳腺组织中的表达,并分析三者表达的相关性。应用RNAi技术将合成的PKC灼-siRNA转染入乳腺癌细胞株MDA-MB-231中,即siPKC灼/MDA-MB-231细胞组,以转染空载质粒的scr/MDA-MB-231的细胞组作为对照组,应用Transwell侵袭实验检测细胞的体外侵袭能力。利用Western blot法检测转染细胞中PKC灼蛋白的表达。酶联免疫吸附实验( enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测培养基中MMP-2、MMP-9的含量。结果 PKC灼、MMP-2、MMP-9在乳腺浸润性导管癌中的阳性率分别为62.5%、37.5%、32.5%,明显高于乳腺导管内癌和癌旁正常乳腺组织(P均<0.05)。 PKC灼蛋白表达与淋巴结转移、远处转移有关(P均<0.01),与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、ER、PR等无关( P均>0.05);转染 siRNA的 siPKC灼/MDA-MB-231细胞组与 scr/MDA-MB-231组相比,体外侵袭能力以及PKC灼蛋白的表达水平明显下降(P均<0.05),培养基中MMP-2、MMP-9蛋白表达量亦明显下降(P均<0.05)。结论 PKC灼通过影响乳腺癌细胞中MMP-2、MMP-9的分泌来促进乳腺癌的侵袭、转移。     

组织工程心脏瓣膜支架材料的研究和展望

背景：当前应用于临床的生物瓣和机械瓣都存在着一定缺陷,而组织工程心脏瓣膜将避免这些问题成为理想的生物瓣膜替代物。目的：综述近年来组织工程心脏瓣膜支架材料的研究进展及面临的问题。方法：应用计算机检索1990至2011年万方数据库相关文章,检索词为“组织工程,心脏瓣膜,支架材料”,并限定文章语言种类为中文。同时计算机检索1990至2011年PubMed数据库相关文章,检索词为“tissue engineering．heartvalve,scaffoldmaterials”,并限定文章语言种类为English。共检索到文献147篇,最终纳入符合标准的文献61篇。结果与结论：人工心脏瓣膜置换是目前治疗心脏瓣膜性病变的主要外科治疗手段,但现有机械瓣和生物瓣都不是理想的心脏瓣膜置换物,在耐久性,增长潜力,相容性,抗感染方面有着显著的缺陷。组织工程心脏瓣膜是一个活体器官,并具有和自体心脏瓣膜同样的生长,修复和重建能力,这一新概念的提出为构建理想的心脏瓣替换物带来了希望。     

EMT经p38-MAPK调节乳腺癌MCF-7细胞P-gp介导的多药耐药

摘 要　目的：探讨乳腺癌细胞中上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）与P-糖蛋白（P-glucoprotein, P-gp）介导的多药耐药（multidrug resistance, MDR）的关系及其可能的机制。方法：将携Snail基因的真核表达载体pcDNA-Snail转染人乳腺癌细胞MCF-7，用多柔比星（doxorubicin, DOX）诱导各组细胞耐药。免疫细胞荧光检测上皮标志物E-钙黏素（E-cadherin）、间质标志物波形蛋白（vimentin）以及P-gp的表达,MTT检测耐药细胞的增殖,RT-PCR检测Snail、MDR1、p38-MAPK mRNA的表达。结果：细胞免疫荧光显示,转染pcDNA-Snail载体后,MCF-7细胞发生EMT,E-cadherin表达显著降低，vimentin表达显著升高；P-gp在发生EMT的MCF-7细胞中表达显著升高。经DOX诱导，MCF-7/Snail细胞的耐药能力较MCF-7/DOX细胞显著增强（P<0.05）。RT-PCR显示，MCF-7细胞发生EMT后,p38-MAPK表达显著升高（P<0.05），MDR1表达较亲本细胞明显升高（P<0.01）。结论：MCF-7细胞发生EMT后，可能通过p38-MAPK引发P-gp介导的MDR。     

乳腺癌中COX-2表达及其抑制剂塞来昔布对乳腺癌细胞系增生和凋亡的影响

 目的 为进一步观察COX-2对乳腺癌的作用，我们检测了乳腺癌组织、乳腺癌细胞株MCF-7和B37中COX-2的表达，并观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布对乳腺癌细胞株生长和凋亡的影响。 方法 应用免疫组织化学染色的方法检测132例乳腺癌组织标本中COX-2蛋白的表达；应用免疫细胞化学染色、原位杂交、逆转录多聚酶联反应（RT-PCR）的方法，分别检测COX-2蛋白和mRNA在乳腺癌细胞株MCF-7、B37中的表达；采用MTT法、AO/EB双荧光染色法和流式细胞术，研究塞来昔布对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。 结果 52.3%(69/132)的乳腺癌组织标本表达COX-2蛋白；在乳腺癌细胞株MCF-7和B37中均有COX-2的表达，25μmol/L塞来昔布作用72h后，COX-2表达明显减少；25、50、100μmol/L的塞来昔布与MCF-7细胞作用72h，生长抑制率分别为36.3%、57.7%、74.5%。100μmol/L塞来昔布作用72h后，MCF-7细胞凋亡率为38.5％。 结论 乳腺癌组织和乳腺癌细胞株MCF-7、B37中存在COX-2的表达；塞来昔布可抑制乳腺癌细胞增殖，并促进细胞凋亡，塞来昔布可能作为新的药物治疗乳腺癌。     

氯丙嗪所致恶性综合征3例报告

恶性综合征(NMS)是抗精神病药物所致的一种少见且严重的副作用,可因急性呼吸衰竭和肾功能衰竭而致死。死亡率可达15％。本文报告3例氯丙嗪所致NMS患者,其中2例因急性呼吸衰竭而死亡,1例因较长时间持续高热、昏迷终致痴呆。     

Cx26和Cx43在乳腺癌中的表达及与上皮间质转化的关系

目的研究连接蛋白26(Connexin26,Cx26)和连接蛋白43(Connexin43,Cx43)在乳腺癌中的表达及与上皮间质转化(EMT)的关系。方法应用免疫组织化学方法检测70例浸润性导管癌、10例乳腺良性病变(乳腺纤维腺瘤)患者中Cx26和Cx43的表达情况,并分析其与EMT的关系。结果Cx26和Cx43在浸润性导管癌中表达的阳性率分别为31%(22/70)和47%(33/70),与乳腺纤维腺瘤中相比,Cx26和Cx43在浸润性导管癌中的表达明显降低(P0.05);在浸润性导管癌中Cx26和Cx43的表达与EMT状态呈负相关(r=-0.26,r=-0.24)。结论Cx26和Cx43与EMT状态呈负相关,可作为乳腺浸润性导管癌中EMT发生的有价值的标记物。