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目的 探讨采用叠氮溴化乙锭(EMA)联合聚合酶链反应(PCR)快速鉴别死活腺病毒的方法。方法将不同稀释度的病毒接种至生长良好的单层细胞上,通过细胞病变效应(CPE)的发生情况计算病毒滴度;将3种腺病毒和新城疫鸡瘟病毒分别制备成106 PFU/mL的母液并梯度稀释备用,提取DNA后用PCR扩增后进行凝胶电泳,观察目的片段的扩增结果;分别用0 μg/mL、70 μg/mL、120 μg/mL和150 μg/mL的EMA处理灭活后的腺病毒,提取DNA进行PCR,观察目的片段的电泳结果;用120 μg/mL的EMA处理107 PFU/mL、106 PFU/mL、105 PFU/mL、104 PFU/mL、103 PFU/mL的腺病毒,观察PCR和凝胶电泳结果。结果 104 PFU/mL及以上滴度的病毒DNA PCR后得到阳性条带,其他滴度的病毒DNA PCR后未检测到阳性条带;3个型别的腺病毒(共8个分离株)的DNA均扩增出目的条带,新城疫鸡瘟病毒的DNA未扩增出目的条带;120 μg/mL及150 μg/mL的EMA抑制灭活腺病毒DNA 扩增,未得到阳性条带;120 μg/mL EMA不影响107 PFU/mL、106 PFU/mL、105 PFU/mL的腺病毒活病毒DNA扩增,得到阳性条带。结论 本研究证实EMA-PCR方法可快速鉴别死活腺病毒,能有效避免单纯PCR检测腺病毒产生的假阳性结果。 相似文献
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目的:观察降尿酸方联合低剂量非布司他治疗慢性肾功能不全伴痛风的临床疗效。方法:选取慢性肾功能不全伴痛风的高尿酸血症患者60例,分为两组各30例,对照组予常规剂量非布司他治疗,治疗组予降尿酸方联合低剂量非布司他治疗,疗程为8周,观察治疗前后两组的血尿酸(UA)、血清肌酐(Scr)、肾小球滤过率(eGFR)、胱抑素C (Cys-C)水平变化以及痛风发作情况。结果:治疗组总有效率为96.67%,对照组为93.33%,两组比较差异无统计学意义(P﹥0.05),两组均能降低患者血尿酸水平(P﹤0.05)。结论:采用降尿酸方联合低剂量非布司他治疗慢性肾功能不全伴痛风患者疗效较好,在降低血尿酸水平、保护肾脏功能方面与常规剂量非布司他具有同样的安全性。 相似文献
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脑积水是蛛网膜下隙出血的常见并发症,严重影响病人预后,目前以手术治疗为主,预后差异较大。本研究探讨其发病期间气血水3者之间的关系,基于气血水理论提出脑积水形成的中医基本病机是瘀血阻窍,津行不畅。急性期因瘀致水,慢性期气不化水,积水增多,致病程迁延,久病入络,瘀水难消。据此针对脑积水产生的关键环节加以干预,分期治疗,旨在抑制脑积水产生或减轻脑积水程度,减轻病损程度。 相似文献
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目的 了解重组免疫印迹(RIBA)确证人免疫缺陷病毒(HIV)抗体的不确定情况,探索转归规律,为实验室检测和艾滋病防治提供参考依据。方法 回顾性分析2018年成都地区采用RIBA确证HIV抗体为不确定的人群特征和条带特征,追踪不确定者的抗体复查结果和时间。结果 共有737名抗体不确定者,占检测人数的10.87%。女性不确定比例高于男性。各类送检来源中,孕产妇的不确定比例(44.05%)最高。抗体不确定带型共有15种,以gp160(46.68%)、gp160和gp41(21.44%)、p24(16.01%)为主。170名(23.07%)不确定者进行了抗体复查,65人转阳,18人转阴,87人不确定。老年人的转阳率较高,≥70岁可达94.12%(〖XC小五号.EPS;P〗=42.941,P<0.001)。gp160、gp41带型转阳率(84.75%)较高(〖XC小五号.EPS;P〗=74.132,P<0.001),p24转阴率(31.58%)较高(〖XC小五号.EPS;P〗=13.782,P=0.001)。转阳者和复查不确定者的复查间隔时间分布差异有统计意义(H=7.270,P=0.026)。结论 女性通过RIBA检测HIV抗体的不确定比例高于男性。RIBA确证HIV抗体的不确定带型主要是gp160、gp160和gp41、p24。在有限条件下可优先加强高转阳率带型(gp160和gp41)及高转阳率人群(老年人)随访。 相似文献
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中医上市后经典名方虽然在国内被广泛应用,但缺乏高质量的循证证据支撑,影响其走出国门。设计良好的基于前瞻性队列的登记研究可更加真实地反映上市后经典名方在现实医疗环境下治疗与结局的因果效应关系。本文以安宫牛黄丸治疗急性缺血性脑卒中为例,从控制选择性偏倚、信息偏倚和混杂偏倚的角度,在临床设计、统计学考量和质量控制3个方面对基于前瞻性队列的登记研究设计要点进行论述。 相似文献
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目的 通过对冠状病毒突刺糖蛋白的抗体免疫表位进行深度分析,为冠状病毒疫苗的研发提供可靠的科学依据.方法 基于目的蛋白一级序列、二级结构、高级结构和B细胞免疫表位预测,分析新型冠状病毒突刺糖蛋白的抗体免疫表位信息.应用PHD和Jpred4等软件,预测目的蛋白的α螺旋、β折叠、转角以及卷曲结构;应用在线软件Bepipred... 相似文献
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PCR-变性梯度凝胶电泳法初探婴儿期肠道菌群菌种演替 总被引:1,自引:1,他引:0
目的通过研究婴儿粪便菌种组成,探索婴儿期肠道菌群定植规律。方法收集15例健康婴儿出生后第0、2、4、7、10、14、28天,以及3、6、12月时的新鲜粪便,采用PCR-变性梯度凝胶电泳(DGGE)检测肠道菌群结构,对其优势菌种进行测序,分析婴儿期肠道菌群菌种演替过程。结果 DGGE指纹图谱可见,婴儿期的肠道菌群结构随出生后时间变化显著;克隆测序结果显示,变形菌门的细菌定植最早,以专性需氧菌肠杆菌、假单胞菌为主,其次是厚壁菌门的专性厌氧菌(梭状芽孢杆菌、小韦荣球菌)和兼性厌氧菌(多枝梭菌)定植,随后疣微菌门定植,放线菌门定植最晚,以双歧杆菌为主,并逐渐成为优势菌群。结论婴儿期肠道中专性需氧菌首先定植,随后是专性厌氧菌和兼性厌氧菌。变形菌门细菌定植最早,厚壁菌门细菌次之,随后是疣微菌门细菌,以双歧杆菌为主的放线菌门细菌定植最晚。 相似文献