类风湿关节炎患者外周血单个核细胞蛋白质组学研究

目的 运用蛋白质组学的方法,比较正常人及早期活动性类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)蛋白质的差异表达,寻找RA疾病相关致病蛋白质.方法 选取9例早期活动期RA患者以及9名健康成年志愿者,用淋巴细胞分离液分离PBMCs,抽提PBMCs中的蛋白,采用同相pH梯度(IPG)双向凝胶电泳(2-DE)分离正常人及RA患者PBMCs总蛋白质.凝胶经考马斯亮蓝染色显色后,PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法验证部分差异蛋白质.结果 获得RA患者及正常人PBMCs蛋白质双向凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为556和579,匹配率分别为89.4%和 88.5%,通过比较分析,差异表达蛋白质点数为23,选取18个点进行质谱鉴定,成功鉴定14个蛋白质,其中a-肌动蛋白、纤维蛋白素原a-链、载脂蛋白A-I(ApoA-I)等9个蛋白质点在RA中表达上调,硫氧还蛋白-2、谷胱甘肽S-转移酶等6个蛋白质点在RA中表达下调,这些差异蛋白质的功能涉及物质代谢、抗氧化、信号传导、能量产生及细胞骨架.并用RT-PCR方法验证差异蛋白质ApoA-I.其结果与上述蛋白质差异表达结果相符.结论 在RA患者PBMCs中存在着差异表达蛋白质,这些差异蛋白质可能是RA发病的内在因素.其RT-PCR结果与蛋白质差异表达相符,证明蛋白质组研究的可靠性.     

脑梗死肝阳化风证患者外周血淋巴细胞凝胶图谱分析

目的建立脑梗死肝阳化风证高分辨率的二维凝胶电泳图谱,从蛋白质组学角度探讨脑梗死中医肝阳化风证的本质内涵。方法设脑梗死肝阳化风证组、健康人对照组、脑梗死阴虚生风证对照组3组,取外周静脉血分离淋巴细胞提取蛋白质,经双向凝胶电泳,考马斯亮蓝染色获取凝胶图谱,PDQuestV7.3.1软件比较分析3组图谱并识别差异表达蛋白质点。结果建立了脑梗死肝阳化风证、健康人组、脑梗死阴虚生风证患者外周静脉血淋巴细胞2-DE图谱,分别获得蛋白质点459个,552个,644个;通过分析比较,发现了脑梗死肝阳化风证与阴虚生风证的相同蛋白质点8个,差异蛋白质点23个。结论提示相类证有共同的物质基础,同病异证有不同的本质内涵,为进一步研究中医肝阳化风证本质内涵奠定了科学基础。     

动脉粥样硬化蛋白质组学的研究进展

动脉粥样硬化(AS)是多病因的复杂发病过程,近年来蛋白质组学研究涉及血流动力学、血管平滑肌细胞和基质功能不良、氧化应激、炎症、细胞凋亡、同型半胱氨酸损伤等多方面.     

中医药治验多发性硬化1例报告

采用滋补肝肾、开窍明目、调理脾胃、活血化瘀的方法治愈多发性硬化1例,并从中医学角度,对本病的病因病机和治疗进行了分析讨论。     

痹肿消汤干预类风湿关节炎患者外周血单个核细胞蛋白质组学研究

目的 观察痹肿消汤干预前后的早期活动性类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）蛋白质的双向凝胶电泳（2-DE）图谱,并分析其差异表达的蛋白质,寻找RA疾病相关蛋白, 探讨痹肿消汤治疗类风湿关节炎可能的作用机制。 方法 18例早期活动性RA患者随机分为两组,治疗组9例口服痹肿消汤（白花蛇舌草25g 肿节风30g 丹参15g 络石藤20g 骨碎补15g 薏苡仁30g等15味中药）,对照组9例口服甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）和普威（nimesulide tablets）,疗程均为3个月。9名健康成年人为正常对照组。健康成年人及RA患者治疗前后分别采血10mL,用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,抽提外周血单个核细胞中的蛋白,采用固相pH梯度（IPG）2-DE分离正常人及RA患者PBMCs总蛋白质。凝胶经考染显色后, PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）     

脑梗死肝阳化风证外周血淋巴细胞相关蛋白质鉴定和分析

目的 应用比较蛋白质组学方法分析并鉴定脑梗死肝阳化风证和阴虚生风证的相关蛋白质,探讨中医肝阳化风证及阴虚生风证的本质内涵.方法 设计选择脑梗死肝阳化风证,阴虚生风证患者及健康人各15例,提取外周静脉血淋巴细胞总蛋白质,经双向凝胶电泳,考马斯亮蓝染色获取凝胶图谱,PDQuest V7.3.1软件比较分析3组双向凝胶电泳图谱并识别差异表达蛋白质,对有意义的蛋白进行质谱分析和数据库检索鉴定.结果 经比较分析,发现肝阳化风证组与阴虚生风证组差异蛋白质点23个,鉴定出22个共15种蛋白质,相同表达蛋白质点8个,鉴定出6个蛋白质点共5种蛋白质.包括代谢酶类、信号传导蛋白、细胞骨架蛋白,抗氧化蛋白等多类蛋白质表达异常.结论 脑梗死肝阳化风证与阴虚生风证具有相同蛋白和差异蛋白,提示二者具有相同的物质基础和不同的本质内涵.     

蛋白质组学方法研究TPx在肝风内动证中的表达及关系

目的：从蛋白质组学角度研究中医肝风内动证的可能的标志性蛋白——硫氧环蛋白过氧化物酶（Peroxiredoxin／Thioredoxin peroxidase，TPx）在中医肝风内动三亚型中的表达，探讨其与中医肝风内动证的关系。方法：设肝阳化风证、血虚生风证、阴虚生风证、健康人组4组，抽取外周静脉血淋巴细胞并提取总蛋白行二维凝胶电泳，PDquestV7．3．1软件分析，质谱分析鉴定，找出各组共有的差异蛋白。结果：鉴定硫氧环蛋白过氧化物酶（Peroxiredoxin／Thioredoxin peroxidase，TPx）为中医肝风内动证与健康人组比较共同的差异蛋白。结论：硫氧环蛋白过氧化物酶（TPx）可能是中医肝风内动证的特异的标志蛋白。     

神经鞘瘤术后完全性截瘫一例

患者男性,50岁,因“双下肢进行性感觉障碍、无力4年,加重2年余（拄双拐行走）”,在外院行胸9～10神经鞘瘤切除术。术后20 d 转来湘雅博爱康复医院进行康复治疗。查体：BP 130/78 mmHg,神清语利,胸背部可见一长约10 cm 的手术疤痕,愈合良好。双上肢肌力、肌张力正常,双下肢肌肉轻度萎缩,肌力0级,双侧感觉消失平面为 T10,双侧膝反射活跃,双侧踝反射减弱,肛门指检无自主收缩,肛周黏膜感觉及肛门深感觉均消失,双侧巴氏征未引出。既往糖尿病病史8年余,血糖控制良好。外院病理检查：神经鞘瘤。术后 MRI：脊髓影像在 T10中断（低信号）。入院时 ASIA 评价：A 级,感觉消失平面 T10,球海绵体反射（+）、肛门黏膜反射（+）;肌力（MMT）：双下肢各关键肌肌群肌力0级;肌痉挛（改良 Ashworth）：双侧髋内收、屈膝肌群肌张力2级;腱反射：双侧膝反射活跃,双侧踝反射减弱;平衡功能：Berg量表0/56分;Barthel指数：0/100分。临床治疗：甲泼尼龙500 mg 连续1周,再改为40 mg 静脉滴注3 d。人血白蛋白10 g 静脉滴注1次/d 及呋塞米20 mg 静脉推注1次/d,连续1周;纳洛酮12 mg 静滴,3 d 后改为8 mg 连续1周。并注意护胃、维持电解质平衡等对症治疗,在用甲泼尼龙过程中曾出现一过性高血糖,予以胰岛素对症处理,停药后血糖恢复正常。并结合双下肢被动关节运动、牵伸训练、电动起立床、神经肌肉电刺激疗法、中医针灸、高压氧等综合康复治疗。按脊髓损伤制定饮水计划,并行膀胱及肠道功能训练,定期清洁导尿,定期辅助排便。20 d 后因故转当地医院继续治疗。出院时ASIA 评价：A 级,感觉消失平面下降至 T12;球海绵体反射（+）、肛门黏膜反射（+）;肌力（MMT）：双下肢屈髋肌力3级,伸膝肌力2级,踝背屈肌群肌力左/右1/2级,髋内收     

脑梗死急性期、恢复期患者的腺苷酸环化酶表达及意义

目的 观察脑梗死(CI)急性期、恢复期患者的腺苷酸环化酶(AC)表达,探讨其不同病期的病理生理过程.方法 选择CI急性期、恢复期患者各30例,健康者15例,抽取三组外周血分离淋巴细胞,抽提总RNA,用RT-PCR技术检测AC表达.结果 CI急性期患者AC mRNA表达缺失,恢复期患者较健康者表达降低(P＜0.05).结论 CI缺血缺氧状态下机体抑制性激素可能占主导地位,与抑制型G蛋白耦联结合后抑制AC活性,降低细胞基础cAMP水平.     

中医肝阳化风证本质蛋白质组学研究

目的 从蛋白质表达水平初步探讨中医肝阳化风证的本质内涵。