昆仑雪菊提取物对糖尿病大鼠胰岛素抵抗IRS-1/PI3K/GLUT4信号通路的影响

目的:观察昆仑雪菊提取物对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠血糖、胰岛素分泌水平及胰岛素受体底物-1/磷脂酰肌醇(-3)激酶/葡萄糖转运蛋白4(IRS-1/PI3K/GLUT4)信号传导通路的影响。方法:将35只雄性STZ诱导的糖尿病Wistar大鼠随机分为5组,模型组、昆仑雪菊提取物低、中、高剂量组、吡咯列酮组,每组7只;另选7只SPF级雄性Wistar大鼠为正常组。正常组和模型组灌服生理盐水,昆仑雪菊低、中、高剂量组,分别按100,200,400 mg·kg~(-1)·d~(-1)剂量灌胃,吡咯列酮组灌服吡咯列酮10 mg·kg~(-1)·d~(-1)。连续4周。4周后,心包外抽血,离心取血清;取胰腺组织。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠胰岛素(INS)分泌水平;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测骨骼肌IRS-1,PI3K,GLUT4的蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测骨骼肌GLUT4的mRNA表达。结果:灌胃4周后,经检测发现昆仑雪菊提取物对降低糖尿病大鼠体重作用不明显,但对空腹血糖、餐后2 h血糖具有降低作用,并在一定程度上能够促进胰岛素分泌,促进调节因子IRS-1,PI3K,GLUT4的表达,与模型组比较有显著性差异(P0.05)。结论:昆仑雪菊提取物可降低2型糖尿病大鼠血糖,促进胰岛素分泌,提高大鼠骨骼肌IRS-1,PI3K,GLUT4的表达,改善胰岛素抵抗。     

大黄牡丹汤组方对急性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的影响

目的研究大黄牡丹汤组方(RPDP)对急性胰腺炎(AP)模型大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响。方法大鼠分为药物作用12 h假手术(SO)组、模型组和RPDP组,药物作用24 h SO组、模型组和RPDP组。经十二指肠壁浆肌层穿刺距离胆胰管开口0.3 mm处的胆管,加压注射3.5%牛磺胆酸钠0.1 mL/100 g,建立大鼠AP模型。治疗组造模后立即给予RPDP 40 g/kg灌胃1次,SO组、AP模型组给予等量的生理盐水灌胃1次。经RPDP治疗后12 h和24 h,麻醉取血及胰腺组织,检测胰腺组织细胞凋亡率、一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合成酶(iNOS)的活性。结果与模型组比较,RPDP组两个时间点的血清淀粉酶活性显著降低(P<0.05),胰腺组织内NO含量明显升高(P<0.05),胰腺细胞凋亡指数显著增加(P<0.05)。结论 RPDP可诱导急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡,其机制应该与增加胰腺组织iNOS活性和NO含量有关。     

大黄牡丹汤组方对急性胰腺炎大鼠的保护作用

目的:探讨大黄牡丹汤组方对急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)大鼠胰腺、肝脏、肾脏功能的保护作用及其可能的作用机制。方法:取40只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、模型对照组(以0.1 m L/min的速度,经十二指肠壁浆肌层穿刺距离胆胰管开口0.3 mm处的胆管,加压注射质量分数35 g/L的牛磺胆酸钠1μL/g)、假手术组(开腹后轻牵引、翻动胰腹、十二指肠和胰胆管)及大黄牡丹汤治疗组(大黄牡丹汤40 g/kg灌胃给药),每组10只。造模后24 h,处死各组大鼠并立即心脏取血。采用ELISA法检测血清白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、淀粉酶含量,用生化分析仪检测丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、总胆红素(TBi L)含量,用免疫组化法检测胰腺、肝脏组织核因子-κB(NF-κB)P56蛋白表达的情况。结果:与模型对照组对比,大黄牡丹汤组血清IL-10含量增高,血清TNF-α含量下降,差别有统计学意义(P0.01),ALT、AST、TBi L、BUN、Cr降低,差别有统计学意义(P0.01),胰腺、肝脏组织内NF-κB P56的表达均减少(P0.01)。结论:大黄牡丹汤可改善AP时的胰腺、肝脏病变及肝、肾功能,其作用机制可能与促进IL-10表达、抑制NF-κB P56和TNF-α的表达有关。     

痛泻要方对肝郁脾虚型D-IBS大鼠结肠组织p38 MAPK信号通路相关蛋白及其靶基因表达的影响

目的:探讨痛泻要方对肝郁脾虚型腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠模型结肠组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK),丝裂原和应激蛋白激酶1(MSK1),环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)mRNA和蛋白表达,白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响,以及血清总超氧化物歧化酶(T-SOD),丙二醛(MDA)含量的影响。方法:将60只SPF级Wistar大鼠随机分为6组,每组10只。除空白组外,其余各组大鼠用番泻叶灌胃联合慢性束缚应急法复建肝郁脾虚型D-IBS模型,连续14 d后开始给药。痛泻要方低、中、高剂量组(2.25,4.5,9 g·kg^-1)每日灌胃,匹维溴铵组(0.02 g·kg^-1)每日灌胃;空白组和模型组每日同体积生理盐水灌胃,共21 d,末次灌胃18 h后,心脏采血及剖取结肠组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠结肠p38 MAPK,MSK1,CREB mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠p38 MAPK,MSK1,CREB蛋白的表达;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠结肠IL-1β,IL-6和TNF-α的含量;羟胺法检测大鼠血清T-SOD水平;硫代巴比妥酸法(TBA)检测MDA的含量;苏木素-伊红(HE)染色观察结肠病理形态学改变。结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠组织中p38 MAPK,MSK1,CREB mRNA表达及蛋白含量明显上升,同时IL-1β,IL-6,TNF-α含量明显升高(P<0.05);血清T-SOD水平明显下降,MDA含量明显升高(P<0.05);与模型组比较,痛泻要方中、高剂量组可明显降低结肠组织中p38 MAPK mRNA表达,p38 MAPK,CREB蛋白及IL-1β,IL-6,TNF-α的含量(P<0.05),升高血清SOD水平,降低MDA含量(P<0.05);痛泻要方高剂量组可明显减低MSK1,CREB mRNA表达及MSK1蛋白含量(P<0.05);病理组织学结果显示,各组大鼠结肠形态结构未见明显的器质性病变,符合IBS的形态学特点。结论:痛泻要方对肝郁脾虚型D-IBS大鼠的治疗在一定范围内呈明显的剂量效应关系,究其治疗作用可能与提高机体抗氧化应激效应和抑制p38 MAPK信号通路,调节其下游炎性因子的水平有关。     

中医辨证诊治急性胰腺炎方法研究

急性胰腺炎(Acute pancreatitis,AP)主要是指在各种外界诱导因素下胰酶被异常激活导致的胰腺组织局部急性炎症,同时多伴有体内其他组织器官功能发生改变。在临床上AP是一种病死率极高的急性疾病,且由于现代人不良生活规律和饮食习惯,导致该病的诱因容易出现,同时由于并发症较多易导致预后不良,因此危害较为严重。中医辨证诊治方法在控制AP并发症并减轻腹痛等症状方面有明显效果,主要对中医在急性胰腺炎治疗中的应用进行分析和探讨,为中医药的应用及研究提供参考和依据。     

水通道蛋白在胰腺炎相关肺损伤中的研究现状

急性胰腺炎肺损伤(AP-ALI)是急性胰腺炎临床常见的并发症，炎症性水肿是该病持续进展的关键病理机制之一。水通道蛋白(AQPs)是细胞中水液代谢的基础调控蛋白，其受核因子-κB(NF-κB)、脂氧素A₄(LXA₄)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、环腺苷酸(cAMP)信号通路的调节进而参与AP-ALI炎症性水肿的疾病进展。本文主要描述了AQPs的生理病理机制及其与AP-ALI炎症发生的关系，以期为急性胰腺炎肺损伤的临床治疗提供参考。     

二甲双胍对2型糖尿病大鼠视网膜的保护及其对血清胱抑素C的调节作用

目的：在大鼠2型糖尿病(T2DM)造模的基础上继续制备糖尿病视网膜病变(DR)模型，观察二甲双胍对T2DM大鼠DR的预防及保护作用和对血清胱抑素C(Cys C)的影响，并对其机制进行探讨。

方法：筛选120只雄性SD大鼠，随机取30只分为空白对照组A(10只)，T2DM组(10只)和二甲双胍干预组A(10只)； 其余90只随机分为三组，分别为空白对照组B(30只)，DR组(30只)和二甲双胍干预组B(30只)。除空白对照组A、B外，其余所有组大鼠均构建T2DM模型，成模后二甲双胍干预组A大鼠给予二甲双胍灌胃，空白对照组A和T2DM组大鼠均给予生理盐水灌胃，干预3mo后分别测量三组大鼠的空腹血糖(FBG)和空腹血清胰岛素(FINS)指标，计算并分析胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)； 测各组大鼠血清Cys C、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、血管内皮生长因子(VEGF)和活性氧(ROS)水平，并行FFA、HE染色及透射电镜观察大鼠视网膜组织及血管形态； 在T2DM病程3mo后，二甲双胍干预组B大鼠开始给予二甲双胍灌胃，其余大鼠均给予生理盐水灌胃，按干预时长不同，分别于第4、5、6mo各组取10只大鼠进行观察，测各组大鼠血清Cys C、TNF-α、IL-8、VEGF和ROS水平，并行FFA、HE染色及透射电镜观察大鼠视网膜组织及血管形态。

结果：空白对照组A、T2DM组和二甲双胍干预组A三组间大鼠血清FBG、FINS、HOMA-IR、Cys C、TNF-α、IL-8、VEGF和ROS的表达均有差异(P<0.05)，且均为T2DM组最高，二甲双胍干预组A低于T2DM组； 空白对照组B、DR组和二甲双胍干预组B分别在4、5、6mo各同龄组中，三组间大鼠血清Cys C、TNF-α、IL-8、VEGF和ROS的表达均有差异(P<0.05)，且均为DR组最高，二甲双胍干预组B的表达低于DR组，随着DR病程的延长，Cys C、TNF-α、IL-8、VEGF和ROS的表达也进一步增加； FFA结果显示：与对应的空白对照组相比，各模型组大鼠视网膜血管走行迂曲，并且随着病程的延长可见微动脉瘤及荧光渗漏； HE染色结果显示：与对应的空白对照组相比，各模型组大鼠视网膜细胞排列紊乱，并随着病程的延长可见异常扩张的血管； 透射电镜结果显示：与对应的空白对照组相比，各模型组大鼠视网膜毛细血管损伤严重； 但与对应模型组比较，各二甲双胍干预组大鼠FFA、HE和透射电镜结果均有不同程度的改善。

结论：二甲双胍可通过下调血清Cys C介导的炎症和氧化应激水平，改善视网膜组织病变，从而对T2DM大鼠视网膜病变起预防和治疗作用。     

牛月黄胆酸钠诱导大鼠急性胰腺炎肺肠损伤模型制备方法的研究北大核心CSCD

目的建立大鼠急性胰腺炎(AP)肺肠损伤动物模型,通过比较不同时间点大鼠胰腺、肺、结肠病理改变、血清生化及炎症细胞因子含量,探讨AP大鼠肺肠损伤模型复建的最佳时间。方法用经胰胆管逆行注射5%牛[月黄]胆酸钠的方法建立AP大鼠肺肠损伤模型,将模型大鼠分为模型12 h组、模型24 h组、模型48 h组,每组20只。另取20只正常大鼠作为空白组,空白组大鼠经胰胆管逆行注射0.9%生理盐水。分别于造模后12、24和48 h采集相对应组大鼠的全血及胰腺、结肠、肺组织。用生化法检测血清中的淀粉酶(AMS)、C反应蛋白(CRP)含量;用免疫组化法检测胰腺、肺、结肠组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和诱导型一氧化氮合酶(INOS)表达水平。结果空白组、模型12 h组、模型24 h组和模型48 h组全血血清中AMS含量分别为(8.15±4.30)、(24.11±3.70)、(35.83±7.12)和(32.69±10.17)U·L^(-1);CRP含量分别为(8.54±4.93)、(23.31±11.04)、(37.56±5.98)和(32.09±14.61)mg·L^(-1);胰腺组织中TNF-α表达含量分别为1.65±0.18、4.70±0.49、16.39±1.38和12.91±0.56;IL-6表达含量分别为2.17±0.25、5.23±0.92、17.18±2.86和10.71±1.91;INOS表达含量分别为2.46±1.26、7.81±0.77、19.60±1.73和16.04±0.75;肺组织中TNF-α表达含量分别为1.91±0.21、4.57±0.27、19.13±2.22和15.90±1.27;IL-6表达含量分别为1.25±0.24、6.18±0.66、17.27±0.32和13.96±6.61;INOS表达含量分别为2.38±0.25、8.48±3.08、17.47±2.27和10.72±6.30;结肠组织中TNF-α表达含量分别为1.94±0.14、8.61±0.74、18.71±2.23和14.60±2.13;IL-6表达含量分别1.98±0.61、7.07±1.58、14.47±0.91和12.63±1.00;INOS表达含量分别为2.52±0.79、8.31±0.86、16.22±1.50和13.66±1.13。模型组的上述指标与空白组比较,其中模型24 h组的差异最明显,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论AP肺肠损伤模型以24 h为最佳成模时间点。