补肾阳中药治疗促性腺激素缺乏型男性不育的网络分子机制初探

目的初探补肾阳中药治疗促性腺激素缺乏型男性不育的潜在分子机制。方法结合生物信息学方法建立补肾阳中药的成分库、表征美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration,FDA)批准用于治疗促性腺激素缺乏男性不育的药物靶标库;再应用通路分析软件(ingenuity pathway analysis,IPA)将成分库投影靶标库,筛选出可作用于靶标及通路的成分,预测分子成分功能,构建“成分-靶标”分子网络。结果分别建立了补肾阳中药成分库(242个化合物)与FDA批准药物靶标库(565个靶标),成分库与靶标库投影后发现补肾阳中药成分库中的30个化学成分可直接激活或抑制药物靶标库中的60个靶标,参与缺氧诱导因子1-α(hypoxia-inducible factor 1-alpha,HIF1α)信号途径,血小板反应蛋白1(thrombospondin 1,TSP1)抑制血管生成途径,芳基烃受体信号途径,孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)/类视黄醇X受体(retinoid X receptor,RXR)激活等18条通路的直接调控。结论本研究构建了补肾阳中药治疗促性腺激素缺乏型男性不育的“成分-靶标”分子网络,分析其治疗效应机制,为补肾阳中药治疗促性腺激素缺乏型男性不育奠定理论基础和实验依据,具有一定的科学意义。     

微波消解⁃电感耦合等离子体质谱法测冰黄肤乐软膏中的6种重金属的量

目的建立同时测定含硫制剂冰黄肤乐软膏中Cr、As、Cu、Cd、Pb、Hg 6种重金属元素的分析方法。方法采用微波消解?电感耦合等离子体质谱(ICP?MS)法,对样品进行前处理,采用内标法监测待测溶液的基体效应,补偿漂移值,采用外标法对重金属元素的含量进行测定。结果6种元素在各自范围内线性关系良好(r≥0.9930),回收率符合痕量分析的要求。除Cr以外,其余5种重金属含量均未超标,符合《中国药典》标准。结论该方法操作简单,准确,灵敏度高,可用于含硫制剂软膏类6种重金属元素的含量检测。     

珍珠层粉氨基酸指纹图谱的构建及氨基酸含量测定的研究

目的 建立中药珍珠层粉HPLC氨基酸指纹图谱,进行指纹图谱的模式识别研究,并测定珍珠层粉的氨基酸含量,为珍珠层粉质量评价提供依据;方法 采用Venusi1-AA 氨基酸分析柱（4.6 mm × 250 mm,5 μm,柱号：AA952505-0）,柱温：28℃,进样量。10 μL,波长：254 nm,流速：0.9 mL?min-1,以pH为6.5的醋酸钠水溶液为流动相A,以80%乙腈水溶液为流动相B。运用SAS和SPSS统计软件进行聚类分析和主成分分析,对珍珠层粉指纹图谱进行模式识别研究。结果 建立了珍珠层粉氨基酸指纹图谱,以及氨基酸指纹图谱的共有模式,检测出23个共有峰,并指认出其中15个共有峰相似度分析的结果与聚类分析和主成分分析保持一致,不同产地的珍珠层粉氨基酸成分差异不大,但不同基源的珍珠层粉氨基酸成分差异明显。本研究测定17个批次珍珠层粉中17种氨基酸（Asp天门冬氨酸、Glu谷氨酸、Ser丝氨酸、Gly甘氨酸、His组氨酸、Arg精氨酸、Thr苏氨酸、Ala丙氨酸、Pro脯氨酸、Tyr酪氨酸、Val缬氨酸、Met蛋氨酸、Cys胱氨酸、Ile异亮氨酸、Leu亮氨酸、Phe苯丙氨酸、Lys赖氨酸）的含量。结论 本研究建立的珍珠层粉氨基酸指纹图谱分析方法专属性强,及氨基酸含量测定方法简便易行、准确可靠,可对珍珠层粉的质量评价提供依据。     

近红外判别结合COI序列基因分析鉴定地龙物种基源

目的:建立地龙药材的真伪鉴别方法，为地龙药材优质用药提供新方法。方法:采用COI序列进行分子生物学层面的基因序列分析，近红外二级光谱判别建模分析进行光谱学层面的分析，两者共同鉴定地龙药材的真伪。结果:COI序列分析能够鉴别地龙种属，明确药材的基源，近红外建模分析结果与COI序列分析结果一致。结论:近红外判别与COI基因分析结合能够简便，全面的控制地龙药材真实性，明确药材基源。     

柱前衍生-HPLC法对水蛭的指纹图谱及其16种氨基酸含量测定研究

目的建立18批水蛭药材游离类氨基酸柱前衍生-高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的分析方法,并完成对水蛭中16种游离和水解氨基酸成分的同时定量。方法加水超声提取游离氨基酸,以6 mol/L盐酸提取水解氨基酸;基于异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生法,以氨基酸分析专用色谱柱(4.6×250 mm,5μm);流动相A为0.1 mol/L无水乙酸钠(pH 6.5)-乙腈(93∶7),B为乙腈-水(4∶1);流速0.8 mL/min,检测波长254 nm,柱温40℃进行梯度洗脱。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012 A版)”、SAS和SIMCA-13.0进行药材的相似度评价和聚类分析。结果建立了18批水蛭药材中游离氨基酸HPLC指纹图谱的共有模式,确定25个共有峰,并指认16种氨基酸成分;18批药材相似度均高于0.960;聚类分析与主成分分析结果一致,均将药材分为3类;含量测定结果表明不同批次的药材中氨基酸含量差异较大,水解氨基酸中含量最高的谷氨酸范围为7.26~18.36 mg/g,游离氨基酸含量最高的丙氨酸范围为1.43~4.39mg/g。结论建立了18批水蛭药材中游离类氨基酸的HPLC指纹图谱,同时测定了18批水蛭药材中游离和水解氨基酸的含量,该方法准确,重复性好,可全面反映水蛭药材的氨基酸信息,为该药材的质量控制提供一定的参考依据。     

经典名方五子衍宗丸干预半去势雄性小鼠生精功能的转录组学分析

目的：筛选五子衍宗丸干预半去势雄性小鼠生精功能相关的转录组，探讨其在干预生精功能低下进展中的潜在作用机制。方法：Balb/c小鼠按体质量随机分为假手术组、模型组、丙酸睾丸素组、五子衍宗丸组，每组12只，模型组和给药组摘取右侧睾丸和附睾构建半去势生精功能低下模型，假手术组仅剪开毛皮和右侧阴囊并立即消毒缝合，饲养1周后，五子衍宗丸组每天灌胃五子衍宗丸混悬液1.56 g·kg-1，丙酸睾丸素组肌肉注射丙酸睾丸素0.2 mg·kg-1，每周2次，假手术组和模型组每天灌胃等体积生理盐水，连续给药3周。干预结束后，苏木素-伊红（HE）染色观察睾丸组织病理；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清睾酮（T）、促黄体生成素（LH）和卵泡刺激素（FSH）含量；小动物精子自动检测仪测定附睾精子数量和活力；利用转录组学芯片技术检测各组睾丸组织mRNA表达水平，筛选五子衍宗丸调控相关基因转录组，并从中任选3条mRNA进行实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）验证转录组数据。验证合格的转录组数据通过基因本体（GO）注释分析及京都基因和基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析，解析五子衍宗丸调...     

复方马红散中羟基红花黄色素A与ZnO的含量测定方法研究

目的:针对复方马红散中具有抗炎、收湿止痒功效的两味中药红花和炉甘石，分别建立快速、高效、准确的高效液相色谱法及紫外-可见光分光光度法以测定其中羟基红花黄色素A和ZnO的含量，为复方马红散的质量控制提供保障、为其质量标准的建立提供参考。方法:羟基红花黄色素A的含量测定采用Waters XSelect HSS T3色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱温设置为30 ℃，以乙腈-0.1%磷酸溶液（23:77）为流动相等度洗脱，流速1.0 mL/min，进样量为20 μL，在403 nm波长下检测。以锌试剂为显色剂，采用改良的紫外-可见光分光光度法在620 nm下测定ZnO的含量。结果:15批复方马红散样品中羟基红花黄色素A的含量范围为8.61~15.31 mg/g。15批复方马红散样品中ZnO的含量范围为82.67~149.40 mg/g。结论:本文基于2020版《中华人民共和国药典》和相关文献，对羟基红花黄色素A、ZnO的含量测定方法进行了一定的优化，经方法学考察，所建立的含量测定方法能快速、准确地测定复方马红散中羟基红花黄色素A、ZnO的含量，对其质量控制及质量标准的制定有一定的参考意义。