5种结核分枝杆菌Rpf样蛋白的活性鉴定及促生长作用

目的 探讨结核分枝杆菌5种Rpf样蛋白(RpfA、RpfB、RpfC、RpfD、RpfE)的生物学活性及其促生长作用.方法 根据GenBank中结核分枝杆菌H37Rv基因组核酸序列分别设计5种Rpf样蛋白特异性引物序列,采用PCR技术扩增目的 片段,克隆、表达及纯化结核分枝杆菌的5种Rpf样蛋白,应用获得的Rpf样蛋白对藤黄微球菌、BCG和结核分枝杆菌标准菌株H37Rv的促生长活性观察.结果 成功获得了纯化的五种Rpf重组蛋白,其浓度分别为374.76μg/mL、300μg/mL、116.27μg/mL、306.9μg/mL、349.8μg/mL;促生长效果观察,其中RpfC无明显的促生长活性,RpfE的促生长活性最明显;A、B和D均有一定程度的促进这三种菌生长增殖的作用.结论 Rpf样蛋白具有促进结核分枝杆菌增殖的作用,有可能成为一种新型的培养基添加剂,为结核菌的快速培养及相关研究奠定基础.     

结核分枝杆菌Rv1009基因蛋白的克隆和表达

目的克隆表达结核分枝杆菌促Rv1009基因,序列测定正确后进行融合、表达。方法采用热启动聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1009编码基因,用限制性内切酶消化后插入pGEX 4T-2载体中,将重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3),目的基因经IPTG诱导,表达Rv1009基因蛋白。结果经PCR扩增在1300bp处发现一条目的片段,获得了结核分枝杆菌H37Rv株Rv1009基因蛋白,经诱导后高效表达分子量为64KD的外源蛋白,与预期分子量大小一致,凝胶自动扫描分析,在A600值为0．6,IPTG终浓度为0．3 mmol／L,诱导表达3 h时融合蛋白表达量即达峰值,占菌体总蛋白的22．8％。结论构建了结核分枝杆菌Rv1009基因重组表达载体,获得了RPF样融合蛋白的高效表达,为今后深入研究奠定了基础。     

5种血清miRNA的检测在前列腺癌诊断中的价值评估

目的 检测miR-141,miR-16,miR-103,miR-574,miR-34b等五种前列腺癌相关的miRNA在前列腺癌患者血清中的含量,评价其在前列腺癌诊断中的价值.方法 收集临床血清样本,将其分为前列腺癌、前列腺增生、PSA升高等三组,提取血清中miRNA.应用荧光定量PCR方法检测相应miRNA的含量,用GraphPad Prism软件进行统计学分析.结果 miRNA-103和miR-34b在前列腺癌患者、前列腺增生患者和PSA增高人群血清中的含量普遍较正常人增高,其中miRNA-34b平均增高2.2×104倍,在所有PSA升高的样本中均增高.其余3种miRNA的水平相对于正常人未呈现显著差异.结论 miR-34b的诊断价值与PSA相当,是一个潜在的前列腺癌诊断性血清标志物.     

西安地区健康人群ALT与AST参考区间的初步探讨

目的 建立西安地区健康人群血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的参考区间.方法 参照IFCC多中心酶学研究参考人群筛选标准,募集18～79岁健康参考人群1 098人,其中男性506人和女性592人,分别用和光试剂检测系统、加入磷酸吡哆醛的罗氏试剂检测系统和不加磷酸吡哆醛的罗氏试剂检测系统建立西安地区健康人群酶活性参考区间.结果 三个系统间检测结果存在明显差异(P<0.01),各系统间男性和女性结果存在差异.ALT和AST需要按性别划分参考区间.不加磷酸吡哆醛的罗氏试剂检测系统ALT-1:7.46～51.34 U/L(女),9.09～71.06 U/L(男);AST-1:11.89～40.49 U/L(女),13.6～40.52 U/L(男).加入磷酸吡哆醛的罗氏试剂检测系统ALT-P:10.24～57.06 U/L(女),11.02～84.00 U/L(男);AST-P:13.55～50.14 U/L(女),15.3～53.42 U/L(男).和光试剂检测系统ALT:6.41～41.73 U/L(女),7.21～67.77 U/L(男);AST:9.41～40.64 U/L(女),12.1～41.11 U/L(男).结论 西安地区人群ALT和AST三个系统间检测结果的参考区间上限较目前临床所用参考区间较高,且各个检测系统间结果存在较大差异.罗氏加入磷酸吡哆醛试剂的参考范围高于不加磷酸吡哆醛试剂的参考范围,加入磷酸吡哆醛试剂的参考范围比不加磷酸吡哆醛试剂的参考范围高15%～20%.但不加磷酸吡哆醛试剂的参考范围高于和光试剂(不加磷酸吡哆醛)检测结果的参考范围,不加磷酸吡哆醛试剂的参考范围比和光试剂(不加磷酸吡哆醛)检测结果的参考范围约高10%.而和光试剂(不加磷酸吡哆醛)检测结果高于目前临床所用的参考范围.     

十二指肠球部癌五例报道

原发性癌发生于十二指肠球部者极为罕见。现报道我院2001年以来确诊的原发性十二指肠球部癌5例。     

腺苷脱氨酶检测在白细胞性胸腔积液中的临床应用

目的研究不同病因产生的白细胞性胸腔积液中腺苷脱氨酶（ADA）活性值的差异，及其与传统的常规生化学指标之闻的相互关系。方法分析100例白细胞性胸腔积液中的ADA活性值，其中包括结核性40例、恶性肿瘤性40例、漏出性20例。结果以40U／L作为诊断结核的阳性界限值。其特异度为98．4％，敏感度为97．0％；ADA活性值与白细胞总数、淋巴细胞百分比、中性粒细胞百分比、常规生化指标含量无关。恶性胸腔积液的ADA活性值与漏出性胸腔积液比较无显著性差异。结论ADA检测对结核性胸腔积液具有相当高的特异度（98．4％），敏感度（97．0％）。常规生化指标与ADA活性值无明显相关性。     

临床使用一次性真空采血器的体会

如今，一次性真空采血器己广泛应用于临床护理工作中。作在两年前开始使用一次性真空采血器（静脉头皮式针），并在实践中逐步掌握其操作和性能，感受到它给工作带来了快捷、方便，提高了工作效率。现报告如下。     

骨科抗菌药物使用强度与细菌耐药率的变化趋势研究

目的 研究骨科抗菌药物使用强度与临床常见致病菌耐药率的变化趋势.方法 采用能够准确反映抗菌药物使用强度的DDD/(100人·d)对2006-2009年医院骨科抗菌药物使用情况进行了统计,并分析同期常见致病菌耐药的变化趋势.结果 头孢地嗪的使用强度2006-2009年分别为7.81、7.66、2.92和0.84,呈下降趋势,大肠埃希菌、鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌对头孢地嗪的耐药率也出现了相应的下降;头孢哌酮/舒巴坦的使用强度分别为3.92、3.55、3.40和0.90,2009年下降幅度较大,2009年大肠埃希菌、鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率也出现了较大幅度的下降:头孢他啶和左氧氟沙星的使用强度变化趋势与大肠埃希菌、鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌对其耐药率的变化相一致;头孢呋辛和头孢曲松作为主要预防性抗菌药物,其使用强度的变化趋势与主要致病菌对其耐药率的变化无一致性.结论 细菌耐药趋势与部分抗菌药物使用强度的变化有一定关系.     

张家口地区2型糖尿病患者外周血血脂异常的分析

过去认为,糖尿病脂代谢异常是继发于糖代谢的紊乱.但在2001年美国糖尿病协会(ADA)大会上,得到了重新认识.Mc Garry提出了脂代谢异常是T2 DM的原发性病理生理改变,糖尿病可称为糖脂病(diabetes mellipidus).TG水平显著增高是T2 DM最常见的脂质代谢紊乱.本文分析T2 DM患者血脂的变化,为进一步探讨T2 DM与血脂的关系.     

大豆不同亚型钙调素抗原表位的分析

目的 探讨制备抗不同亚型大豆钙调素单克隆抗体的可能性。方法 借助于微机，对５种大豆不同亚型ＣａＭ分子的抗原表位进行预测和分析。结果 大豆ＣａＭ分子存在６个抗原表位，其中至少有１个表位（氨基酸序列７４～８６）可刺激小鼠产生抗大豆不同亚型ＣａＭ分子的单克隆抗体（ｍＡｂ），另外，在序列６，７，９６及１２２，１２３附近也有可能是研制小鼠ｍＡｂ的大豆不同亚型ＣａＭ分子抗原表位所在。结论 为研制抗大豆不同亚型